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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7une | ||||||||||||
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タイトル | The V1 region of bovine V-ATPase in complex with human mEAK7 (focused refinement) | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | PROTON TRANSPORT / mTOR signaling | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ROS and RNS production in phagocytes / Insulin receptor recycling / Transferrin endocytosis and recycling / Amino acids regulate mTORC1 / Ion channel transport / pH reduction / cellular response to increased oxygen levels / synaptic vesicle lumen acidification / clathrin-coated vesicle membrane / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V1 domain ...ROS and RNS production in phagocytes / Insulin receptor recycling / Transferrin endocytosis and recycling / Amino acids regulate mTORC1 / Ion channel transport / pH reduction / cellular response to increased oxygen levels / synaptic vesicle lumen acidification / clathrin-coated vesicle membrane / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V1 domain / proton-transporting V-type ATPase complex / cell projection organization / vacuolar acidification / Neutrophil degranulation / ATP metabolic process / H+-transporting two-sector ATPase / transport vesicle / proton-transporting ATPase activity, rotational mechanism / proton-transporting ATP synthase activity, rotational mechanism / proton transmembrane transport / cilium / synaptic vesicle membrane / melanosome / intracellular iron ion homeostasis / lysosome / endosome / apical plasma membrane / lysosomal membrane / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) Bos taurus (ウシ) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.73 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Wang, R. / Li, X. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Molecular basis of mEAK7-mediated human V-ATPase regulation. 著者: Rong Wang / Yu Qin / Xiao-Song Xie / Xiaochun Li / 要旨: The activity of V-ATPase is well-known to be regulated by reversible dissociation of its V and V domains in response to growth factor stimulation, nutrient sensing, and cellular differentiation. The ...The activity of V-ATPase is well-known to be regulated by reversible dissociation of its V and V domains in response to growth factor stimulation, nutrient sensing, and cellular differentiation. The molecular basis of its regulation by an endogenous modulator without affecting V-ATPase assembly remains unclear. Here, we discover that a lysosome-anchored protein termed (mammalian Enhancer-of-Akt-1-7 (mEAK7)) binds to intact V-ATPase. We determine cryo-EM structure of human mEAK7 in complex with human V-ATPase in native lipid-containing nanodiscs. The structure reveals that the TLDc domain of mEAK7 engages with subunits A, B, and E, while its C-terminal domain binds to subunit D, presumably blocking V-V torque transmission. Our functional studies suggest that mEAK7, which may act as a V-ATPase inhibitor, does not affect the activity of V-ATPase in vitro. However, overexpression of mEAK7 in HCT116 cells that stably express subunit a4 of V-ATPase represses the phosphorylation of ribosomal protein S6. Thus, this finding suggests that mEAK7 potentially links mTOR signaling with V-ATPase activity. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7une.cif.gz | 787.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7une.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7une.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7une_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7une_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7une_validation.xml.gz | 127.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7une_validation.cif.gz | 198.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/un/7une ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/un/7une | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 26622MC 7unfC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 2種, 4分子 LMNU
#1: タンパク質 | 分子量: 68420.914 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bos taurus (ウシ) / 参照: UniProt: P31404, H+-transporting two-sector ATPase #3: タンパク質 | | 分子量: 51982.465 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: KIAA1609, hCG_39793 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: D3DUL8 |
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-V-type proton ATPase subunit ... , 4種, 10分子 DdbcQOPgef
#2: タンパク質 | 分子量: 28297.893 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bos taurus (ウシ) / 参照: UniProt: A0A3Q1M4W9 | ||||
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#4: タンパク質 | 分子量: 26178.371 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bos taurus (ウシ) / 参照: UniProt: P11019 #5: タンパク質 | 分子量: 56637.555 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bos taurus (ウシ) / 参照: UniProt: P31408 #6: タンパク質 | 分子量: 13588.344 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bos taurus (ウシ) / 参照: UniProt: Q0VCV6 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Cryo-EM structure of the V1 region of bovine V-ATPase in complex with human mEAK7 タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
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3次元再構成 | 解像度: 3.73 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 13841 / 対称性のタイプ: POINT |