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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7rwj | ||||||
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タイトル | afTMEM16 in C22 lipid nanodiscs with MSP2N2 scaffold protein in the presnece of Ca2+ | ||||||
要素 | Plasma membrane channel protein (Aqy1), putative | ||||||
キーワード | LIPID TRANSPORT / TMEM16 / lipid scrambling | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 phospholipid scramblase activity / cortical endoplasmic reticulum / phospholipid translocation / chloride channel activity / voltage-gated calcium channel activity / chloride transmembrane transport / monoatomic ion transmembrane transport / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Neosartorya fumigata (カビ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||
データ登録者 | Falzone, M.E. / Accardi, A. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: TMEM16 scramblases thin the membrane to enable lipid scrambling. 著者: Maria E Falzone / Zhang Feng / Omar E Alvarenga / Yangang Pan / ByoungCheol Lee / Xiaolu Cheng / Eva Fortea / Simon Scheuring / Alessio Accardi / 要旨: TMEM16 scramblases dissipate the plasma membrane lipid asymmetry to activate multiple eukaryotic cellular pathways. Scrambling was proposed to occur with lipid headgroups moving between leaflets ...TMEM16 scramblases dissipate the plasma membrane lipid asymmetry to activate multiple eukaryotic cellular pathways. Scrambling was proposed to occur with lipid headgroups moving between leaflets through a membrane-spanning hydrophilic groove. Direct information on lipid-groove interactions is lacking. We report the 2.3 Å resolution cryogenic electron microscopy structure of the nanodisc-reconstituted Ca-bound afTMEM16 scramblase showing how rearrangement of individual lipids at the open pathway results in pronounced membrane thinning. Only the groove's intracellular vestibule contacts lipids, and mutagenesis suggests scrambling does not require specific protein-lipid interactions with the extracellular vestibule. We find scrambling can occur outside a closed groove in thinner membranes and is inhibited in thicker membranes, despite an open pathway. Our results show afTMEM16 thins the membrane to enable scrambling and that an open hydrophilic pathway is not a structural requirement to allow rapid transbilayer movement of lipids. This mechanism could be extended to other scramblases lacking a hydrophilic groove. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7rwj.cif.gz | 228.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7rwj.ent.gz | 180.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7rwj.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7rwj_validation.pdf.gz | 861.3 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7rwj_full_validation.pdf.gz | 880.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7rwj_validation.xml.gz | 40 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7rwj_validation.cif.gz | 58.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/rw/7rwj ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/rw/7rwj | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 24717MC 7rx2C 7rx3C 7rxaC 7rxbC 7rxgC 7rxhC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 84616.859 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Neosartorya fumigata (strain ATCC MYA-4609 / Af293 / CBS 101355 / FGSC A1100) (カビ) 株: ATCC MYA-4609 / Af293 / CBS 101355 / FGSC A1100 / 遺伝子: AFUA_4G02970 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q4WA18 #2: 化合物 | ChemComp-CA / #3: 化合物 | ChemComp-PGW / ( 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: afTMEM16 scramblase C22 lipid nanodiscs with MSP2N2 scaffold in the presence of Ca2+ タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Aspergillus fumigatus (カビ) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのタイプ: UltrAuFoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: OTHER |
撮影 | 電子線照射量: 44.4 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: (1.14_3260:phenix.real_space_refine) / 分類: 精密化 |
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EMソフトウェア | 名称: SerialEM / カテゴリ: 画像取得 |
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 31890 / 対称性のタイプ: POINT |
精密化 | 交差検証法: THROUGHOUT |
原子変位パラメータ | Biso max: 83.15 Å2 / Biso mean: 40.2515 Å2 / Biso min: 19.52 Å2 |