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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7q5s | ||||||
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タイトル | Protein community member fatty acid synthase complex from C. thermophilum | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSFERASE / Fatty Acid Synthase / complex / chaetomium / thermophilum / fatty / acid / synthesis | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 fatty acid synthase complex / holo-[acyl-carrier-protein] synthase activity / long-chain fatty acid biosynthetic process / fatty acid synthase activity / enoyl-[acyl-carrier-protein] reductase (NADH) activity / fatty acid biosynthetic process / magnesium ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Chaetomium thermophilum var. thermophilum DSM 1495 (菌類) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.47 Å | ||||||
データ登録者 | Chojnowski, G. / Skalidis, I. / Kyrilis, F.L. / Tueting, C. / Hamdi, F. / Kastritis, P.L. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2022 タイトル: Cryo-EM and artificial intelligence visualize endogenous protein community members. 著者: Ioannis Skalidis / Fotis L Kyrilis / Christian Tüting / Farzad Hamdi / Grzegorz Chojnowski / Panagiotis L Kastritis / 要旨: Cellular function is underlined by megadalton assemblies organizing in proximity, forming communities. Metabolons are protein communities involving metabolic pathways such as protein, fatty acid, and ...Cellular function is underlined by megadalton assemblies organizing in proximity, forming communities. Metabolons are protein communities involving metabolic pathways such as protein, fatty acid, and thioesters of coenzyme-A synthesis. Metabolons are highly heterogeneous due to their function, making their analysis particularly challenging. Here, we simultaneously characterize metabolon-embedded architectures of a 60S pre-ribosome, fatty acid synthase, and pyruvate/oxoglutarate dehydrogenase complex E2 cores de novo. Cryo-electron microscopy (cryo-EM) 3D reconstructions are resolved at 3.84-4.52 Å resolution by collecting <3,000 micrographs of a single cellular fraction. After combining cryo-EM with artificial intelligence-based atomic modeling and de novo sequence identification methods, at this resolution range, polypeptide hydrogen bonding patterns are discernible. Residing molecular components resemble their purified counterparts from other eukaryotes but also exhibit substantial conformational variation with potential functional implications. Our results propose an integrated tool, boosted by machine learning, that opens doors for structural systems biology spearheaded by cryo-EM characterization of native cell extracts. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7q5s.cif.gz | 3.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7q5s.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7q5s.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7q5s_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7q5s_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7q5s_validation.xml.gz | 477.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7q5s_validation.cif.gz | 748 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/q5/7q5s ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/q5/7q5s | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 13846MC 7q5qC 7q5rC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10892 (タイトル: Cryo-EM SPA dataset of Megadalton-range protein communities from a Chaetomium thermophilum native cell extract Data size: 1.1 TB Data #1: Unaligned fractions saved by Falcon 3 EC camera [micrographs - multiframe]) |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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非結晶学的対称性 (NCS) | NCSドメイン:
NCSドメイン領域:
NCSアンサンブル:
NCS oper:
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 235450.672 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Chaetomium thermophilum var. thermophilum DSM 1495 (菌類) 参照: UniProt: G0S867 #2: タンパク質 | 分子量: 205066.922 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Chaetomium thermophilum var. thermophilum DSM 1495 (菌類) 参照: UniProt: G0S866 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Fatty Acid Synthase Complex from Chaetomium thermophilum タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 単位: MEGADALTONS / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum var. thermophilum DSM 1495 (菌類) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
緩衝液成分 | 濃度: 200 mM / 名称: Ammonium acetate / 式: NH4CH2COOH |
試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277 K 詳細: For plunging, blot force 2 and blotting time of 6 sec were applied. |
-電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: TFS GLACIOS |
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電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 92000 X / 倍率(補正後): 95675 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN / 試料ホルダーモデル: OTHER / 最高温度: 103.15 K / 最低温度: 77.15 K / Residual tilt: 14.7 mradians |
撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 実像数: 2808 |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.47 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 5231 / アルゴリズム: SIMULTANEOUS ITERATIVE (SIRT) / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL 詳細: Initial models were predicted using AlphaFold v2.0.1, fitted into reconstructions using COOT and finally refined in real space using COOT and phenix.real_space_refine | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 244.94 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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Refine LS restraints NCS |
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