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- PDB-7ecw: The Csy-AcrIF14-dsDNA complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7ecw
タイトルThe Csy-AcrIF14-dsDNA complex
要素
  • (54-MER DNA) x 2
  • AcrIF14
  • CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2
  • CRISPR-associated protein Csy3
  • RNA (60-MER)
  • Type I-F CRISPR-associated protein Csy1
キーワードIMMUNE SYSTEM/RNA/DNA / inhibitor / complex / IMMUNE SYSTEM / IMMUNE SYSTEM-RNA-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


CRISPR-associated protein Csy1 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy1) / CRISPR-associated protein Csy2 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy2) / CRISPR-associated protein Csy3 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy3)
類似検索 - ドメイン・相同性
: / DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) / Tail protein / Uncharacterized protein / CRISPR-associated protein Csy3 / Uncharacterized protein
類似検索 - 構成要素
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
Moraxella phage Mcat5 (ファージ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å
データ登録者Zhang, L.X. / Feng, Y.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Science Foundation (NSF, China)31822012 中国
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2021
タイトル: Insights into the dual functions of AcrIF14 during the inhibition of type I-F CRISPR-Cas surveillance complex.
著者: Xi Liu / Laixing Zhang / Yu Xiu / Teng Gao / Ling Huang / Yongchao Xie / Lingguang Yang / Wenhe Wang / Peiyi Wang / Yi Zhang / Maojun Yang / Yue Feng /
要旨: CRISPR-Cas systems are bacterial adaptive immune systems, and phages counteract these systems using many approaches such as producing anti-CRISPR (Acr) proteins. Here, we report the structures of ...CRISPR-Cas systems are bacterial adaptive immune systems, and phages counteract these systems using many approaches such as producing anti-CRISPR (Acr) proteins. Here, we report the structures of both AcrIF14 and its complex with the crRNA-guided surveillance (Csy) complex. Our study demonstrates that apart from interacting with the Csy complex to block the hybridization of target DNA to the crRNA, AcrIF14 also endows the Csy complex with the ability to interact with non-sequence-specific dsDNA as AcrIF9 does. Further structural studies of the Csy-AcrIF14-dsDNA complex and biochemical studies uncover that the PAM recognition loop of the Cas8f subunit of the Csy complex and electropositive patches within the N-terminal domain of AcrIF14 are essential for the non-sequence-specific dsDNA binding to the Csy-AcrIF14 complex, which is different from the mechanism of AcrIF9. Our findings highlight the prevalence of Acr-induced non-specific DNA binding and shed light on future studies into the mechanisms of such Acr proteins.
履歴
登録2021年3月13日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02021年11月17日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02021年11月17日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年6月5日Group: Data collection / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond
改定 1.22025年6月18日Group: Data collection / Structure summary / カテゴリ: em_admin / em_software / pdbx_entry_details / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.12025年6月18日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-31059
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Type I-F CRISPR-associated protein Csy1
B: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2
C: CRISPR-associated protein Csy3
D: CRISPR-associated protein Csy3
E: CRISPR-associated protein Csy3
F: CRISPR-associated protein Csy3
G: CRISPR-associated protein Csy3
H: CRISPR-associated protein Csy3
I: AcrIF14
J: AcrIF14
M: RNA (60-MER)
N: 54-MER DNA
O: 54-MER DNA


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)392,44113
ポリマ－392,44113
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: native gel electrophoresis
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area53800 Å2
ΔGint-170 kcal/mol
Surface area132920 Å2

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要素

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タンパク質 , 4種, 10分子 ABCDEFGHIJ

#1: タンパク質 Type I-F CRISPR-associated protein Csy1


分子量: 49313.254 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 遺伝子: csy1, ALP65_00954, IPC1505_30690 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A3A8DDU9
#2: タンパク質 CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2 / Type I-F CRISPR-associated protein Csy2


分子量: 36244.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
遺伝子: csy2, ALP65_00953, EQH76_13810, NCTC13437_01526, PACL_0128
発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: B3G161
#3: タンパク質
CRISPR-associated protein Csy3


分子量: 37623.324 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 遺伝子: IPC1505_30680, IPC36_28835 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A659BSG0
#4: タンパク質 AcrIF14


分子量: 14297.373 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Moraxella phage Mcat5 (ファージ) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0R6PCL0

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RNA鎖 , 1種, 1分子 M

#5: RNA鎖 RNA (60-MER)


分子量: 19265.404 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 313291946

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DNA鎖 , 2種, 2分子 NO

#6: DNA鎖 54-MER DNA


分子量: 16708.691 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#7: DNA鎖 54-MER DNA


分子量: 16574.561 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)

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詳細

Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1membrane proteinCOMPLEXall0RECOMBINANT
2membrane proteinCOMPLEX#1-#3, #5-#71RECOMBINANT
3AcrIF14COMPLEX#41RECOMBINANT
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
22Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)287
33Moraxella phage Mcat5 (ファージ)1647551
由来(組換発現)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
22Escherichia coli (大腸菌)562
33Escherichia coli (大腸菌)562
緩衝液pH: 7
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: FEI TITAN
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: DARK FIELD
撮影電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.17.1_3660: / 分類: 精密化
EMソフトウェア名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 127454 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00723689
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.86732324
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d13.8493962
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0533477
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0064087

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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