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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7btb | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of pre-60S ribosome from Saccharomyces cerevisiae rpl4delta63-87 strain at 3.22 Angstroms resolution(state R2) | |||||||||
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![]() | RIBOSOME / Pre-60s / rpl4 | |||||||||
機能・相同性 | ![]() protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / nuclear exosome (RNase complex) / PeBoW complex / 7S RNA binding / positive regulation of ATP-dependent activity / rRNA primary transcript binding / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding ...protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / nuclear exosome (RNase complex) / PeBoW complex / 7S RNA binding / positive regulation of ATP-dependent activity / rRNA primary transcript binding / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding / maturation of 5.8S rRNA / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / proteasome binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / ribosomal large subunit binding / ATPase activator activity / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / Formation of a pool of free 40S subunits / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / preribosome, large subunit precursor / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translational elongation / ribosomal large subunit export from nucleus / ribosomal subunit export from nucleus / regulation of translational fidelity / ribonucleoprotein complex binding / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / protein-RNA complex assembly / maturation of LSU-rRNA / translation initiation factor activity / nuclear periphery / proteasome complex / assembly of large subunit precursor of preribosome / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / cytosolic ribosome assembly / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / macroautophagy / small-subunit processome / protein catabolic process / maintenance of translational fidelity / rRNA processing / ribosome biogenesis / ATPase binding / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / protein-macromolecule adaptor activity / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / nucleolus / RNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.22 Å | |||||||||
![]() | Li, Y. / Wilson, D.M. | |||||||||
資金援助 | ![]() ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural insights into assembly of the ribosomal nascent polypeptide exit tunnel. 著者: Daniel M Wilson / Yu Li / Amber LaPeruta / Michael Gamalinda / Ning Gao / John L Woolford / ![]() ![]() ![]() 要旨: The nascent polypeptide exit tunnel (NPET) is a major functional center of 60S ribosomal subunits. However, little is known about how the NPET is constructed during ribosome assembly. We utilized ...The nascent polypeptide exit tunnel (NPET) is a major functional center of 60S ribosomal subunits. However, little is known about how the NPET is constructed during ribosome assembly. We utilized molecular genetics, biochemistry, and cryo-electron microscopy (cryo-EM) to investigate the functions of two NPET-associated proteins, ribosomal protein uL4 and assembly factor Nog1, in NPET assembly. Structures of mutant pre-ribosomes lacking the tunnel domain of uL4 reveal a misassembled NPET, including an aberrantly flexible ribosomal RNA helix 74, resulting in at least three different blocks in 60S assembly. Structures of pre-ribosomes lacking the C-terminal extension of Nog1 demonstrate that this extension scaffolds the tunnel domain of uL4 in the NPET to help maintain stability in the core of pre-60S subunits. Our data reveal that uL4 and Nog1 work together in the maturation of ribosomal RNA helix 74, which is required to ensure proper construction of the NPET and 60S ribosomal subunits. | |||||||||
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.7 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 255.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 439.4 KB | 表示 | |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+60S ribosomal protein ... , 34種, 34分子 LaABCDEFGHJMNOPQRSTUVXYZcdefgh...
-タンパク質 , 5種, 5分子 Knwyz
#12: タンパク質 | 分子量: 42596.691 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P38779 |
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#38: タンパク質 | 分子量: 69984.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P53261 |
#46: タンパク質 | 分子量: 23001.410 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q08746 |
#48: タンパク質 | 分子量: 26476.605 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q12522 |
#49: タンパク質 | 分子量: 12435.429 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P38202 |
-Ribosome assembly ... , 2種, 2分子 Wx
#23: タンパク質 | 分子量: 27098.012 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P33201 |
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#47: タンパク質 | 分子量: 57106.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P25382 |
-Nucleolar GTP-binding protein ... , 2種, 2分子 bm
#27: タンパク質 | 分子量: 74531.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q02892 |
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#37: タンパク質 | 分子量: 55585.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P53742 |
-Ribosome biogenesis protein ... , 6種, 6分子 oqrtuv
#39: タンパク質 | 分子量: 25499.186 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P53927 |
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#41: タンパク質 | 分子量: 52667.832 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q12080 |
#42: タンパク質 | 分子量: 29786.783 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P40078 |
#43: タンパク質 | 分子量: 36621.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P40693 |
#44: タンパク質 | 分子量: 24027.650 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q07915 |
#45: タンパク質 | 分子量: 39665.789 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P36160 |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 1236
#50: RNA鎖 | 分子量: 1097493.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: GenBank: NR_132207 |
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#51: RNA鎖 | 分子量: 50682.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: GenBank: 1669301378 |
#52: RNA鎖 | 分子量: 38951.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: GenBank: 1039023795 |
#53: RNA鎖 | 分子量: 74308.391 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: GenBank: 1104417410 |
-非ポリマー , 3種, 7分子 




#54: 化合物 | #55: 化合物 | #56: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Eukaryotic pre-60S ribosomal subunits from Saccharomyces cerevisiae rpl4delta63-87 strain(stateR2) タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#53 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 1.9 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 3.22 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 47025 / 対称性のタイプ: POINT |