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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7b5e | |||||||||||||||
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タイトル | Structure of calcium-bound mTMEM16A(ac)-I551A chloride channel at 4.1 A resolution | |||||||||||||||
要素 | Anoctamin-1 | |||||||||||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / ligand-gated ion channel / anoctamin-1 | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 glial cell projection elongation / trachea development / iodide transmembrane transporter activity / iodide transport / mucus secretion / intracellularly calcium-gated chloride channel activity / cellular response to peptide / Stimuli-sensing channels / voltage-gated chloride channel activity / chloride transport ...glial cell projection elongation / trachea development / iodide transmembrane transporter activity / iodide transport / mucus secretion / intracellularly calcium-gated chloride channel activity / cellular response to peptide / Stimuli-sensing channels / voltage-gated chloride channel activity / chloride transport / chloride channel activity / positive regulation of insulin secretion involved in cellular response to glucose stimulus / detection of temperature stimulus involved in sensory perception of pain / chloride channel complex / chloride transmembrane transport / regulation of membrane potential / cell projection / establishment of localization in cell / presynaptic membrane / cellular response to heat / phospholipase C-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / apical plasma membrane / external side of plasma membrane / signaling receptor binding / glutamatergic synapse / protein homodimerization activity / identical protein binding / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Lam, A.K.M. / Rheinberger, J. / Paulino, C. / Dutzler, R. | |||||||||||||||
資金援助 | スイス, オランダ, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Gating the pore of the calcium-activated chloride channel TMEM16A. 著者: Andy K M Lam / Jan Rheinberger / Cristina Paulino / Raimund Dutzler / 要旨: The binding of cytoplasmic Ca to the anion-selective channel TMEM16A triggers a conformational change around its binding site that is coupled to the release of a gate at the constricted neck of an ...The binding of cytoplasmic Ca to the anion-selective channel TMEM16A triggers a conformational change around its binding site that is coupled to the release of a gate at the constricted neck of an hourglass-shaped pore. By combining mutagenesis, electrophysiology, and cryo-electron microscopy, we identified three hydrophobic residues at the intracellular entrance of the neck as constituents of this gate. Mutation of each of these residues increases the potency of Ca and results in pronounced basal activity. The structure of an activating mutant shows a conformational change of an α-helix that contributes to Ca binding as a likely cause for the basal activity. Although not in physical contact, the three residues are functionally coupled to collectively contribute to the stabilization of the gate in the closed conformation of the pore, thus explaining the low open probability of the channel in the absence of Ca. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7b5e.cif.gz | 274.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7b5e.ent.gz | 218.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7b5e.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7b5e_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7b5e_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7b5e_validation.xml.gz | 49.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7b5e_validation.cif.gz | 72.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/b5/7b5e ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/b5/7b5e | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 111016.914 Da / 分子数: 2 / 変異: I551A / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 遺伝子: Ano1, Tmem16a / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8BHY3 #2: 化合物 | ChemComp-CA / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: mTMEM16A(ac)-I551A in calcium-bound form / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.221908 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) | ||||||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: CaCl2 was added immediately before freezing Free calcium concentration is 1mM. | ||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TALOS ARCTICA |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 49407 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 53 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 34234 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 5OYB | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 55.17 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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