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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6rvw | ||||||||||||||||||
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タイトル | Structure of right-handed protein cage consisting of 24 eleven-membered ring proteins held together by gold (I) bridges. | ||||||||||||||||||
要素 | Transcription attenuation protein MtrB | ||||||||||||||||||
キーワード | RNA BINDING PROTEIN / TRAP / protein cage / gold binding / snub cube | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 DNA-templated transcription termination / regulation of DNA-templated transcription / RNA binding / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Geobacillus stearothermophilus (バクテリア) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Malay, A.D. / Miyazaki, N. / Biela, A.P. / Iwasaki, K. / Heddle, J.G. | ||||||||||||||||||
資金援助 | ポーランド, 日本, 5件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2019 タイトル: An ultra-stable gold-coordinated protein cage displaying reversible assembly. 著者: Ali D Malay / Naoyuki Miyazaki / Artur Biela / Soumyananda Chakraborti / Karolina Majsterkiewicz / Izabela Stupka / Craig S Kaplan / Agnieszka Kowalczyk / Bernard M A G Piette / Georg K A ...著者: Ali D Malay / Naoyuki Miyazaki / Artur Biela / Soumyananda Chakraborti / Karolina Majsterkiewicz / Izabela Stupka / Craig S Kaplan / Agnieszka Kowalczyk / Bernard M A G Piette / Georg K A Hochberg / Di Wu / Tomasz P Wrobel / Adam Fineberg / Manish S Kushwah / Mitja Kelemen / Primož Vavpetič / Primož Pelicon / Philipp Kukura / Justin L P Benesch / Kenji Iwasaki / Jonathan G Heddle / 要旨: Symmetrical protein cages have evolved to fulfil diverse roles in nature, including compartmentalization and cargo delivery, and have inspired synthetic biologists to create novel protein assemblies ...Symmetrical protein cages have evolved to fulfil diverse roles in nature, including compartmentalization and cargo delivery, and have inspired synthetic biologists to create novel protein assemblies via the precise manipulation of protein-protein interfaces. Despite the impressive array of protein cages produced in the laboratory, the design of inducible assemblies remains challenging. Here we demonstrate an ultra-stable artificial protein cage, the assembly and disassembly of which can be controlled by metal coordination at the protein-protein interfaces. The addition of a gold (I)-triphenylphosphine compound to a cysteine-substituted, 11-mer protein ring triggers supramolecular self-assembly, which generates monodisperse cage structures with masses greater than 2 MDa. The geometry of these structures is based on the Archimedean snub cube and is, to our knowledge, unprecedented. Cryo-electron microscopy confirms that the assemblies are held together by 120 S-Au-S staples between the protein oligomers, and exist in two chiral forms. The cage shows extreme chemical and thermal stability, yet it readily disassembles upon exposure to reducing agents. As well as gold, mercury(II) is also found to enable formation of the protein cage. This work establishes an approach for linking protein components into robust, higher-order structures, and expands the design space available for supramolecular assemblies to include previously unexplored geometries. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6rvw.cif.gz | 2.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6rvw.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 6rvw.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6rvw_validation.pdf.gz | 2.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6rvw_full_validation.pdf.gz | 2.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6rvw_validation.xml.gz | 219.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6rvw_validation.cif.gz | 377.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/rv/6rvw ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/rv/6rvw | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 8161.224 Da / 分子数: 264 / 変異: K35C, R64S / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Geobacillus stearothermophilus (バクテリア) 遺伝子: mtrB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9X6J6 #2: 化合物 | ChemComp-AU / |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: RH TRAP protein cage / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 2.16 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Geobacillus stearothermophilus (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 0.89 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: 3.0 s blotting time |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 94388 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL Target criteria: gradient-driven minimization of combined map and restraints target | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Accession code: 4V4F / Initial refinement model-ID: 1 / PDB-ID: 4V4F / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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