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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6rui | ||||||
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タイトル | RNA Polymerase I Pre-initiation complex DNA opening intermediate 2 | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / RNA Polymerase I / Pre-initiation complex / PIC / Open Complex / OC / Core Factor / CF / Rrn3 / DNA opening | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase I transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I core factor complex / RNA polymerase I core binding / rDNA binding / RNA polymerase I general transcription initiation factor activity / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I preinitiation complex assembly / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA ...RNA polymerase I transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I core factor complex / RNA polymerase I core binding / rDNA binding / RNA polymerase I general transcription initiation factor activity / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I preinitiation complex assembly / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / regulation of cell size / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA-templated transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / termination of RNA polymerase III transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA polymerase III activity / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / RNA Polymerase I Promoter Escape / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription by RNA polymerase I / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / Estrogen-dependent gene expression / transcription by RNA polymerase III / Dual incision in TC-NER / transcription elongation by RNA polymerase I / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / RNA polymerase II, core complex / TBP-class protein binding / promoter-specific chromatin binding / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription elongation by RNA polymerase II / ribonucleoside binding / DNA-directed RNA polymerase / peroxisome / ribosome biogenesis / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / protein dimerization activity / nucleolus / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | ||||||
データ登録者 | Mueller, C.W. / Sadian, Y. / Tafur, L. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: Molecular insight into RNA polymerase I promoter recognition and promoter melting. 著者: Yashar Sadian / Florence Baudin / Lucas Tafur / Brice Murciano / Rene Wetzel / Felix Weis / Christoph W Müller / 要旨: RNA polymerase I (Pol I) assembles with core factor (CF) and Rrn3 on the rDNA core promoter for transcription initiation. Here, we report cryo-EM structures of closed, intermediate and open Pol I ...RNA polymerase I (Pol I) assembles with core factor (CF) and Rrn3 on the rDNA core promoter for transcription initiation. Here, we report cryo-EM structures of closed, intermediate and open Pol I initiation complexes from 2.7 to 3.7 Å resolution to visualize Pol I promoter melting and to structurally and biochemically characterize the recognition mechanism of Pol I promoter DNA. In the closed complex, double-stranded DNA runs outside the DNA-binding cleft. Rotation of CF and upstream DNA with respect to Pol I and Rrn3 results in the spontaneous loading and opening of the promoter followed by cleft closure and positioning of the Pol I A49 tandem winged helix domain (tWH) onto DNA. Conformational rearrangement of A49 tWH leads to a clash with Rrn3 to initiate complex disassembly and promoter escape. Comprehensive insight into the Pol I transcription initiation cycle allows comparisons with promoter opening by Pol II and Pol III. | ||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | 6rui.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6rui.ent.gz | 929.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6rui.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
文書・要旨 | 6rui_validation.pdf.gz | 946.1 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6rui_full_validation.pdf.gz | 1001.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6rui_validation.xml.gz | 151.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6rui_validation.cif.gz | 236.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ru/6rui ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ru/6rui | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 10006MC 4982C 4984C 4985C 4987C 6rqhC 6rqlC 6rqtC 6rrdC 6ruoC 6rweC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA鎖 , 2種, 2分子 TU
#1: DNA鎖 | 分子量: 21216.605 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: synthetic construct (人工物) |
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#2: DNA鎖 | 分子量: 21942.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: synthetic construct (人工物) |
-DNA-directed RNA polymerase I subunit ... , 7種, 7分子 INMABDG
#3: タンパク質 | 分子量: 13676.566 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA12, RRN4, YJR063W, J1747 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P32529 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 26933.518 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA34, YJL148W, J0637 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P47006 |
#5: タンパク質 | 分子量: 46721.707 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA49, RRN13, YNL248C, N0880 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q01080 |
#6: タンパク質 | 分子量: 186676.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA190, RPA1, RRN1, YOR341W, O6276 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P10964, DNA-directed RNA polymerase |
#7: タンパク質 | 分子量: 135910.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA135, RPA2, RRN2, SRP3, YPR010C, YP9531.03C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P22138, DNA-directed RNA polymerase |
#9: タンパク質 | 分子量: 14599.128 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA14, YDR156W, YD8358.11 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P50106 |
#12: タンパク質 | 分子量: 36264.852 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPA43, RRN12, YOR340C, O6271 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P46669 |
-DNA-directed RNA polymerases I and III subunit ... , 2種, 2分子 CK
#8: タンパク質 | 分子量: 37732.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPC40, RPA5, RPC5, YPR110C, P8283.18 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P07703 |
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#15: タンパク質 | 分子量: 16167.860 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPC19, YNL113W, N1937 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P28000 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 5種, 5分子 EFHJL
#10: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPB5, RPA7, RPC9, YBR154C, YBR1204 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P20434 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPO26, RPB6, YPR187W, P9677.8 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P20435 |
#13: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPB8, YOR224C, YOR50-14 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P20436 |
#14: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPB10, YOR210W / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P22139 |
#16: タンパク質 | 分子量: 7729.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RPC10, RPB12, YHR143W-A, YHR143BW / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P40422 |
-RNA polymerase I-specific transcription initiation factor ... , 4種, 4分子 OQSR
#17: タンパク質 | 分子量: 72458.258 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RRN3, YKL125W / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P36070 |
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#18: タンパク質 | 分子量: 60435.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RRN7, YJL025W, J1273 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P40992 |
#19: タンパク質 | 分子量: 102163.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RRN6, YBL014C, YBL0311, YBL0312 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P32786 |
#20: タンパク質 | 分子量: 59334.262 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 遺伝子: RRN11, YML043C, YM9827.09C / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q04712 |
-非ポリマー , 1種, 1分子
#21: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 4 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 1.1075 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 42727 / 対称性のタイプ: POINT |