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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6pwo | ||||||
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タイトル | MscS DDM | ||||||
要素 | Small-conductance mechanosensitive channel | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / MscS / DDM / Mechanosensitive Channel of Small Conductance / Mechanosensitive / Channel | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 intracellular water homeostasis / mechanosensitive monoatomic ion channel activity / protein homooligomerization / monoatomic ion transmembrane transport / identical protein binding / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
データ登録者 | Reddy, B.G. / Perozo, E. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2019 タイトル: Molecular basis of force-from-lipids gating in the mechanosensitive channel MscS. 著者: Bharat Reddy / Navid Bavi / Allen Lu / Yeonwoo Park / Eduardo Perozo / 要旨: Prokaryotic mechanosensitive (MS) channels open by sensing the physical state of the membrane. As such, lipid-protein interactions represent the defining molecular process underlying ...Prokaryotic mechanosensitive (MS) channels open by sensing the physical state of the membrane. As such, lipid-protein interactions represent the defining molecular process underlying mechanotransduction. Here, we describe cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of the small-conductance mechanosensitive channel (MscS) in nanodiscs (ND). They reveal a novel membrane-anchoring fold that plays a significant role in channel activation and establish a new location for the lipid bilayer, shifted ~14 Å from previous consensus placements. Two types of lipid densities are explicitly observed. A phospholipid that 'hooks' the top of each TM2-TM3 hairpin and likely plays a role in force sensing, and a bundle of acyl chains occluding the permeation path above the L105 cuff. These observations reshape our understanding of force-from-lipids gating in MscS and highlight the key role of allosteric interactions between TM segments and phospholipids bound to key dynamic components of the channel. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6pwo.cif.gz | 308.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6pwo.ent.gz | 254.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6pwo.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6pwo_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6pwo_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6pwo_validation.xml.gz | 58.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6pwo_validation.cif.gz | 82.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/pw/6pwo ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/pw/6pwo | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 31205.178 Da / 分子数: 7 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) 株: K12 / 遺伝子: mscS, yggB, b2924, JW2891 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0C0S1 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mechanosensitive Channel of Small Conductance / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 295 K 詳細: 22C. Blot Force 3 for 3 seconds. Double application with a blotting between applications. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 50 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.15.2_3472: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 3.0.6 / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C7 (7回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 50782 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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