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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6oua | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the yeast Ctf3 complex | ||||||
要素 |
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キーワード | CELL CYCLE / kinetochore / chromosome / cryo-em | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 attachment of spindle microtubules to kinetochore / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / DNA replication initiation / meiotic cell cycle / chromosome segregation / kinetochore / cell division / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.18 Å | ||||||
データ登録者 | Hinshaw, S.M. / Harrison, S.C. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2019 タイトル: The structure of the yeast Ctf3 complex. 著者: Stephen M Hinshaw / Andrew N Dates / Stephen C Harrison / 要旨: Kinetochores are the chromosomal attachment points for spindle microtubules. They are also signaling hubs that control major cell cycle transitions and coordinate chromosome folding. Most well- ...Kinetochores are the chromosomal attachment points for spindle microtubules. They are also signaling hubs that control major cell cycle transitions and coordinate chromosome folding. Most well-studied eukaryotes rely on a conserved set of factors, which are divided among two loosely-defined groups, for these functions. Outer kinetochore proteins contact microtubules or regulate this contact directly. Inner kinetochore proteins designate the kinetochore assembly site by recognizing a specialized nucleosome containing the H3 variant Cse4/CENP-A. We previously determined the structure, resolved by cryo-electron microscopy (cryo-EM), of the yeast Ctf19 complex (Ctf19c, homologous to the vertebrate CCAN), providing a high-resolution view of inner kinetochore architecture (Hinshaw and Harrison, 2019). We now extend these observations by reporting a near-atomic model of the Ctf3 complex, the outermost Ctf19c sub-assembly seen in our original cryo-EM density. The model is sufficiently well-determined by the new data to enable molecular interpretation of Ctf3 recruitment and function. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6oua.cif.gz | 136.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6oua.ent.gz | 99.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6oua.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6oua_validation.pdf.gz | 901.8 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6oua_full_validation.pdf.gz | 907.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6oua_validation.xml.gz | 28.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6oua_validation.cif.gz | 41.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ou/6oua ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ou/6oua | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 84617.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q12748 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 21438.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q12262 |
#3: タンパク質 | 分子量: 27874.799 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P47167 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Ctf3 complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Recombinant protein frozen in vitreous ice |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: C-flat-2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 50.7 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化 |
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EMソフトウェア | 名称: SerialEM / バージョン: 3.7 / カテゴリ: 画像取得 |
画像処理 | 詳細: Counting mode |
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 4.18 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 71632 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | 空間: REAL |