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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6ou9 | |||||||||
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タイトル | Asymmetric focused reconstruction of human norovirus GI.7 Houston strain VLP asymmetric unit in T=3 symmetry | |||||||||
要素 | Major capsid protein | |||||||||
キーワード | VIRUS LIKE PARTICLE / Caliciviridae / Calicivirus / Norovirus / GI.7 | |||||||||
機能・相同性 | Calicivirus coat protein C-terminal / Calicivirus coat protein C-terminal / Calicivirus coat protein / Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / Major capsid protein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Norovirus Hu/GI.7/TCH-060/USA/2003 (ウイルス) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Jung, J. / Grant, T. / Thomas, D.R. / Diehnelt, C.W. / Grigorieff, N. / Joshua-Tor, L. | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2019 タイトル: High-resolution cryo-EM structures of outbreak strain human norovirus shells reveal size variations. 著者: James Jung / Timothy Grant / Dennis R Thomas / Chris W Diehnelt / Nikolaus Grigorieff / Leemor Joshua-Tor / 要旨: Noroviruses are a leading cause of foodborne illnesses worldwide. Although GII.4 strains have been responsible for most norovirus outbreaks, the assembled virus shell structures have been available ...Noroviruses are a leading cause of foodborne illnesses worldwide. Although GII.4 strains have been responsible for most norovirus outbreaks, the assembled virus shell structures have been available in detail for only a single strain (GI.1). We present high-resolution (2.6- to 4.1-Å) cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of GII.4, GII.2, GI.7, and GI.1 human norovirus outbreak strain virus-like particles (VLPs). Although norovirus VLPs have been thought to exist in a single-sized assembly, our structures reveal polymorphism between and within genogroups, with small, medium, and large particle sizes observed. Using asymmetric reconstruction, we were able to resolve a Zn metal ion adjacent to the coreceptor binding site, which affected the structural stability of the shell. Our structures serve as valuable templates for facilitating vaccine formulations. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6ou9.cif.gz | 251.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6ou9.ent.gz | 203.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6ou9.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6ou9_validation.pdf.gz | 847.7 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6ou9_full_validation.pdf.gz | 855.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6ou9_validation.xml.gz | 43.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6ou9_validation.cif.gz | 67.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ou/6ou9 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ou/6ou9 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 58100.730 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Norovirus Hu/GI.7/TCH-060/USA/2003 (ウイルス) 発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: G8FL04 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Norovirus Hu/GI.7/TCH-060/USA/2003 / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 10.45 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Norovirus Hu/GI.7/TCH-060/USA/2003 (ウイルス) 株: GI.7 |
由来(組換発現) | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
ウイルスについての詳細 | 中空か: YES / エンベロープを持つか: NO / 単離: STRAIN / タイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE |
天然宿主 | 生物種: Homo sapiens |
ウイルス殻 | 名称: VP1 / 直径: 420 nm / 三角数 (T数): 3 |
緩衝液 | pH: 5.75 |
試料 | 濃度: 4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: unspecified / グリッドの材料: COPPER |
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 295 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1400 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 7 sec. / 電子線照射量: 70 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 実像数: 1973 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 35 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 38535 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 461160 / アルゴリズム: FOURIER SPACE 詳細: Symmetry expansion and signal subtraction of the icosahedral asymmetric units from the whole particle images, follow by asymmetric focused reconstruction towards the apex of the spike domain 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 4RPB PDB chain-ID: A / Accession code: 4RPB / Pdb chain residue range: 225-532 / Source name: PDB / タイプ: experimental model |