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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6n7p | |||||||||||||||
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タイトル | S. cerevisiae spliceosomal E complex (UBC4) | |||||||||||||||
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![]() | RNA BINDING PROTEIN / pre-mRNA splicing / spliceosome / E complex | |||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() Processing of Intronless Pre-mRNAs / nuclear cap binding complex / pre-mRNA 5'-splice site binding / RNA cap binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / primary miRNA processing / mRNA splice site recognition / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex ...Processing of Intronless Pre-mRNAs / nuclear cap binding complex / pre-mRNA 5'-splice site binding / RNA cap binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / primary miRNA processing / mRNA splice site recognition / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / snRNP binding / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / splicing factor binding / mRNA 3'-end processing / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U4 snRNP / U2 snRNP / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / U1 snRNP / poly(U) RNA binding / response to osmotic stress / U2-type prespliceosome / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / precatalytic spliceosome / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / spliceosomal complex assembly / mRNA 5'-splice site recognition / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / Prp19 complex / 7-methylguanosine mRNA capping / U5 snRNP / spliceosomal snRNP assembly / mRNA export from nucleus / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / spliceosomal complex / mRNA transcription by RNA polymerase II / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA binding / perinuclear region of cytoplasm / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||||||||
![]() | Liu, S. / Li, X. / Zhou, Z.H. / Zhao, R. | |||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: A unified mechanism for intron and exon definition and back-splicing. 著者: Xueni Li / Shiheng Liu / Lingdi Zhang / Aaron Issaian / Ryan C Hill / Sara Espinosa / Shasha Shi / Yanxiang Cui / Kalli Kappel / Rhiju Das / Kirk C Hansen / Z Hong Zhou / Rui Zhao / ![]() 要旨: The molecular mechanisms of exon definition and back-splicing are fundamental unanswered questions in pre-mRNA splicing. Here we report cryo-electron microscopy structures of the yeast spliceosomal E ...The molecular mechanisms of exon definition and back-splicing are fundamental unanswered questions in pre-mRNA splicing. Here we report cryo-electron microscopy structures of the yeast spliceosomal E complex assembled on introns, providing a view of the earliest event in the splicing cycle that commits pre-mRNAs to splicing. The E complex architecture suggests that the same spliceosome can assemble across an exon, and that it either remodels to span an intron for canonical linear splicing (typically on short exons) or catalyses back-splicing to generate circular RNA (on long exons). The model is supported by our experiments, which show that an E complex assembled on the middle exon of yeast EFM5 or HMRA1 can be chased into circular RNA when the exon is sufficiently long. This simple model unifies intron definition, exon definition, and back-splicing through the same spliceosome in all eukaryotes and should inspire experiments in many other systems to understand the mechanism and regulation of these processes. | |||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 754.7 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 117 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 194.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-U1 small nuclear ribonucleoprotein ... , 5種, 5分子 ABCDH
#1: タンパク質 | 分子量: 34506.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q00916 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 27106.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q05900 |
#3: タンパク質 | 分子量: 40413.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c 発現宿主: ![]() ![]() 株 (発現宿主): ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P32605 |
#4: タンパク質 | 分子量: 65222.020 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q03776 |
#8: タンパク質 | 分子量: 10485.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P53207 |
-Pre-mRNA-processing ... , 2種, 2分子 EJ
#5: タンパク質 | 分子量: 74834.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P39682 |
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#10: タンパク質 | 分子量: 69176.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P33203 |
-タンパク質 , 4種, 4分子 FGIK
#6: タンパク質 | 分子量: 57010.840 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q00539 |
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#7: タンパク質 | 分子量: 56575.277 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q03782 |
#9: タンパク質 | 分子量: 30245.885 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q07508 |
#11: タンパク質 | 分子量: 22426.990 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P40018 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 6分子 LMNOPQ
#12: タンパク質 | 分子量: 16296.798 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q02260 |
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#13: タンパク質 | 分子量: 12876.066 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q06217 |
#14: タンパク質 | 分子量: 11240.139 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P43321 |
#15: タンパク質 | 分子量: 10385.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q12330 |
#16: タンパク質 | 分子量: 9669.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P54999 |
#17: タンパク質 | 分子量: 8490.809 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P40204 |
-RNA鎖 , 2種, 2分子 Rr
#18: RNA鎖 | 分子量: 182114.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: GenBank: 1039023756 |
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#19: RNA鎖 | 分子量: 81030.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() ![]() |
-Nuclear cap-binding protein ... , 2種, 2分子 XY
#20: タンパク質 | 分子量: 100115.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P34160 |
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#21: タンパク質 | 分子量: 23803.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q08920 |
-非ポリマー , 1種, 3分子 
#22: 化合物 |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Saccharomyces cerevisiae spliceosomal E complex (EBC4) タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#21 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: unspecified |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 124825 / 対称性のタイプ: POINT |