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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6mgw | |||||||||
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タイトル | Structure of mechanically activated ion channel OSCA1.2 in LMNG | |||||||||
要素 | Calcium permeable stress-gated cation channel 1 | |||||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / Mechanically activated ion channel | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mechanosensitive monoatomic ion channel activity / calcium-activated cation channel activity / monoatomic cation transport / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Jojoa-Cruz, S. / Saotome, K. / Patapoutian, A. / Ward, A.B. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2018 タイトル: Cryo-EM structure of the mechanically activated ion channel OSCA1.2. 著者: Sebastian Jojoa-Cruz / Kei Saotome / Swetha E Murthy / Che Chun Alex Tsui / Mark Sp Sansom / Ardem Patapoutian / Andrew B Ward / 要旨: Mechanically activated ion channels underlie touch, hearing, shear-stress sensing, and response to turgor pressure. OSCA/TMEM63s are a newly-identified family of eukaryotic mechanically activated ion ...Mechanically activated ion channels underlie touch, hearing, shear-stress sensing, and response to turgor pressure. OSCA/TMEM63s are a newly-identified family of eukaryotic mechanically activated ion channels opened by membrane tension. The structural underpinnings of OSCA/TMEM63 function are not explored. Here, we elucidate high resolution cryo-electron microscopy structures of OSCA1.2, revealing a dimeric architecture containing eleven transmembrane helices per subunit and surprising topological similarities to TMEM16 proteins. We locate the ion permeation pathway within each subunit by demonstrating that a conserved acidic residue is a determinant of channel conductance. Molecular dynamics simulations reveal membrane interactions, suggesting the role of lipids in OSCA1.2 gating. These results lay a foundation to decipher how the structural organization of OSCA/TMEM63 is suited for their roles as MA ion channels. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6mgw.cif.gz | 258.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6mgw.ent.gz | 206.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6mgw.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6mgw_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6mgw_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6mgw_validation.xml.gz | 40.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6mgw_validation.cif.gz | 60.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mg/6mgw ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mg/6mgw | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 89031.719 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) 遺伝子: CSC1, At4g22120, F1N20.220 / プラスミド: pcDNA3.1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293F / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q5XEZ5 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: OSCA1.2 / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.088 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞: HEK293F / プラスミド: pcDNA3.1 |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 4.4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 29000 X / 最大 デフォーカス(公称値): -2600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): -1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2536 |
画像スキャン | 横: 3710 / 縦: 3838 / 動画フレーム数/画像: 51 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 326398 | |||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | |||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 134337 / クラス平均像の数: 2 / 対称性のタイプ: POINT |