+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6iic | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | CryoEM structure of Mud Crab Dicistrovirus | |||||||||
要素 |
| |||||||||
キーワード | VIRUS / Dicistrovirus | |||||||||
機能・相同性 | Dicistrovirus, capsid-polyprotein, C-terminal / CRPV capsid protein like / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / Structural polyprotein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Mud crab virus (ウイルス) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang, Q. / Gao, Y. | |||||||||
資金援助 | 中国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2019 タイトル: Cryo-electron Microscopy Structures of Novel Viruses from Mud Crab with Multiple Infections. 著者: Yuanzhu Gao / Shanshan Liu / Jiamiao Huang / Qianqian Wang / Kunpeng Li / Jian He / Jianguo He / Shaoping Weng / Qinfen Zhang / 要旨: Viruses associated with sleeping disease (SD) in crabs cause great economic losses to aquaculture, and no effective measures are available for their prevention. In this study, to help develop novel ...Viruses associated with sleeping disease (SD) in crabs cause great economic losses to aquaculture, and no effective measures are available for their prevention. In this study, to help develop novel antiviral strategies, single-particle cryo-electron microscopy was applied to investigate viruses associated with SD. The results not only revealed the structure of mud crab dicistrovirus (MCDV) but also identified a novel mud crab tombus-like virus (MCTV) not previously detected using molecular biology methods. The structure of MCDV at a 3.5-Å resolution reveals three major capsid proteins (VP1 to VP3) organized into a pseudo-T=3 icosahedral capsid, and affirms the existence of VP4. Unusually, MCDV VP3 contains a long C-terminal region and forms a novel protrusion that has not been observed in other dicistrovirus. Our results also reveal that MCDV can release its genome via conformation changes of the protrusions when viral mixtures are heated. The structure of MCTV at a 3.3-Å resolution reveals a T= 3 icosahedral capsid with common features of both tombusviruses and nodaviruses. Furthermore, MCTV has a novel hydrophobic tunnel beneath the 5-fold vertex and 30 dimeric protrusions composed of the P-domains of the capsid protein at the 2-fold axes that are exposed on the virion surface. The structural features of MCTV are consistent with a novel type of virus. Pathogen identification is vital for unknown infectious outbreaks, especially for dual or multiple infections. Sleeping disease (SD) in crabs causes great economic losses to aquaculture worldwide. Here we report the discovery and identification of a novel virus in mud crabs with multiple infections that was not previously detected by molecular, immune, or traditional electron microscopy (EM) methods. High-resolution structures of pathogenic viruses are essential for a molecular understanding and developing new disease prevention methods. The three-dimensional (3D) structure of the mud crab tombus-like virus (MCTV) and mud crab dicistrovirus (MCDV) determined in this study could assist the development of antiviral inhibitors. The identification of a novel virus in multiple infections previously missed using other methods demonstrates the usefulness of this strategy for investigating multiple infectious outbreaks, even in humans and other animals. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6iic.cif.gz | 142.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb6iic.ent.gz | 106 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6iic.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6iic_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 6iic_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6iic_validation.xml.gz | 35.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6iic_validation.cif.gz | 53.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ii/6iic ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ii/6iic | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
| x 60
2 |
|
3 |
| x 5
4 |
| x 6
5 |
|
対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称)) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 20691.158 Da / 分子数: 1 / 断片: UNP residues 760-950 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Mud crab virus (ウイルス) / 参照: UniProt: E5G7H9 |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 28074.658 Da / 分子数: 1 / 断片: UNP residues 1-253 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Mud crab virus (ウイルス) / 参照: UniProt: E5G7H9 |
#3: タンパク質 | 分子量: 48249.680 Da / 分子数: 1 / 断片: UNP residues 312-759 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Mud crab virus (ウイルス) / 参照: UniProt: E5G7H9 |
#4: タンパク質 | 分子量: 5792.425 Da / 分子数: 1 / 断片: UNP residues 254-311 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Mud crab virus (ウイルス) / 参照: UniProt: E5G7H9 |
配列の詳細 | Authors state that these conflicts are due to error in database. |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mud crab dicistrovirus / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Mud crab virus (ウイルス) |
ウイルスについての詳細 | 中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: SPECIES / タイプ: VIRION |
天然宿主 | 生物種: Scylla paramamosain |
緩衝液 | pH: 7.2 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 293 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 96000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Calibrated defocus min: 1000 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 3000 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 100 K / 最低温度: 80 K |
撮影 | 平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 3 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 15 µm / 横: 4096 / 縦: 4096 |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 31801 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 2 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL |