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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6i7b | |||||||||
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タイトル | Influenza A nucleoprotein docked into 3D helical structure of the wild type ribonucleoprotein complex obtained using cryoEM. Conformation 3. | |||||||||
要素 | (Nucleoprotein) x 2 | |||||||||
キーワード | VIRAL PROTEIN / Influenza A virus / Ribonucleoprotein / RNA binding protein | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative stranded viral RNA replication / helical viral capsid / viral penetration into host nucleus / host cell / viral nucleocapsid / symbiont entry into host cell / ribonucleoprotein complex / host cell nucleus / structural molecule activity / RNA binding / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10 Å | |||||||||
データ登録者 | Coloma, R. / Arranz, R. / de la Rosa-Trevin, J.M. / Sorzano, C.O.S. / Carlero, D. / Ortin, J. / Martin-Benito, J. | |||||||||
資金援助 | スペイン, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2020 タイトル: Structural insights into influenza A virus ribonucleoproteins reveal a processive helical track as transcription mechanism. 著者: Rocío Coloma / Rocío Arranz / José M de la Rosa-Trevín / Carlos O S Sorzano / Sandie Munier / Diego Carlero / Nadia Naffakh / Juan Ortín / Jaime Martín-Benito / 要旨: The influenza virus genome consists of eight viral ribonucleoproteins (vRNPs), each consisting of a copy of the polymerase, one of the genomic RNA segments and multiple copies of the nucleoprotein ...The influenza virus genome consists of eight viral ribonucleoproteins (vRNPs), each consisting of a copy of the polymerase, one of the genomic RNA segments and multiple copies of the nucleoprotein arranged in a double helical conformation. vRNPs are macromolecular machines responsible for messenger RNA synthesis and genome replication, that is, the formation of progeny vRNPs. Here, we describe the structural basis of the transcription process. The mechanism, which we call the 'processive helical track', is based on the extreme flexibility of the helical part of the vRNP that permits a sliding movement between both antiparallel nucleoprotein-RNA strands, thereby allowing the polymerase to move over the genome while bound to both RNA ends. Accordingly, we demonstrate that blocking this movement leads to inhibition of vRNP transcriptional activity. This mechanism also reveals a critical role of the nucleoprotein in maintaining the double helical structure throughout the copying process to make the RNA template accessible to the polymerase. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6i7b.cif.gz | 166.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6i7b.ent.gz | 131 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6i7b.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6i7b_validation.pdf.gz | 387.9 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6i7b_full_validation.pdf.gz | 430.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6i7b_validation.xml.gz | 23 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6i7b_validation.cif.gz | 33.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/i7/6i7b ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/i7/6i7b | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 4423MC 0175C 4412C 4426C 4430C 6h9gC 6i54C 6i7mC 6i85C C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 53114.328 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Influenza A virus (A/Wilson-Smith/1933(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) 細胞株: COS1 / 参照: UniProt: Q1K9H2, UniProt: P15682*PLUS #2: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2107.346 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Influenza A virus (A/Wilson-Smith/1933(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) 細胞株: MDCK / 参照: UniProt: P15682 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: HELICAL ARRAY / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Influenza A virus ribonucleoprotein / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Influenza A virus (A/Wilson-Smith/1933(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) |
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: TN buffer (50 nM Tris-HCl, 150 mM KCl) |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER/RHODIUM / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: LEICA EM CPC / 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 2 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 実像数: 420 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 69 / 利用したフレーム数/画像: 3-68 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
らせん対称 | 回転角度/サブユニット: -65.95 ° / 軸方向距離/サブユニット: 34.16 Å / らせん対称軸の対称性: D1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 137461 / 詳細: Manual picking | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 10 Å / 解像度の算出法: OTHER / 粒子像の数: 2867 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 詳細: MonoRes software in Xmipp/Scipion / 対称性のタイプ: HELICAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 2IQH Accession code: 2IQH / Source name: PDB / タイプ: experimental model |