+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5ot7 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Elongation factor G-ribosome complex captures in the absence of inhibitors. | |||||||||
要素 |
| |||||||||
キーワード | RIBOSOME / Elongation factor G / Translation / Translocation | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 translation elongation factor activity / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly ...translation elongation factor activity / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / zinc ion binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Thermus thermophilus (バクテリア) Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Mace, K. / Giudice, E. / Chat, S. / Gillet, R. | |||||||||
資金援助 | フランス, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2018 タイトル: The structure of an elongation factor G-ribosome complex captured in the absence of inhibitors. 著者: Kevin Macé / Emmanuel Giudice / Sophie Chat / Reynald Gillet / 要旨: During translation's elongation cycle, elongation factor G (EF-G) promotes messenger and transfer RNA translocation through the ribosome. Until now, the structures reported for EF-G-ribosome ...During translation's elongation cycle, elongation factor G (EF-G) promotes messenger and transfer RNA translocation through the ribosome. Until now, the structures reported for EF-G-ribosome complexes have been obtained by trapping EF-G in the ribosome. These results were based on use of non-hydrolyzable guanosine 5'-triphosphate (GTP) analogs, specific inhibitors or a mutated EF-G form. Here, we present the first cryo-electron microscopy structure of EF-G bound to ribosome in the absence of an inhibitor. The structure reveals a natural conformation of EF-G·GDP in the ribosome, with a previously unseen conformation of its third domain. These data show how EF-G must affect translocation, and suggest the molecular mechanism by which fusidic acid antibiotic prevents the release of EF-G after GTP hydrolysis. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5ot7.cif.gz | 3.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb5ot7.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 5ot7.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5ot7_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 5ot7_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 5ot7_validation.xml.gz | 244.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5ot7_validation.cif.gz | 423.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ot/5ot7 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ot/5ot7 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 12345
#1: RNA鎖 | 分子量: 489331.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: GenBank: 55771382 |
---|---|
#2: RNA鎖 | 分子量: 24485.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 1319589919 |
#3: RNA鎖 | 分子量: 4889.930 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Escherichia coli (大腸菌) |
#4: RNA鎖 | 分子量: 943515.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: GenBank: 55771382 |
#5: RNA鎖 | 分子量: 38553.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: GenBank: 55771382 |
+50S ribosomal protein ... , 30種, 30分子 67VWXYZabcdefghijkopqrstuvwxyz
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 ABCDEFGHIJKLMNOPQRST
#8: タンパク質 | 分子量: 27116.385 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80371 |
---|---|
#9: タンパク質 | 分子量: 22975.588 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80372 |
#10: タンパク質 | 分子量: 24242.254 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80373 |
#11: タンパク質 | 分子量: 16460.193 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SHQ5 |
#12: タンパク質 | 分子量: 11988.753 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SLP8 |
#13: タンパク質 | 分子量: 17919.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P17291 |
#14: タンパク質 | 分子量: 15868.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P0DOY9 |
#15: タンパク質 | 分子量: 14279.419 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80374 |
#16: タンパク質 | 分子量: 11398.308 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SHN7 |
#17: タンパク質 | 分子量: 12606.369 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80376 |
#18: タンパク質 | 分子量: 13875.388 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SHN3 |
#19: タンパク質 | 分子量: 13494.739 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80377 |
#20: タンパク質 | 分子量: 7027.529 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P0DOY6 |
#21: タンパク質 | 分子量: 10447.213 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SJ76 |
#22: タンパク質 | 分子量: 9995.546 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SJH3 |
#23: タンパク質 | 分子量: 11880.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P0DOY7 |
#24: タンパク質 | 分子量: 8155.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SLQ0 |
#25: タンパク質 | 分子量: 9961.599 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SHP2 |
#26: タンパク質 | 分子量: 10921.086 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: P80380 |
#27: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3089.655 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 参照: UniProt: Q5SIH3 |
-タンパク質 , 1種, 1分子 U
#28: タンパク質 | 分子量: 76547.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) 株: HB8 / ATCC 27634 / DSM 579 / 遺伝子: fusA, fus, TTHA1695 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q5SHN5 |
---|
-Ribosomal protein ... , 3種, 3分子 lmn
#45: タンパク質 | 分子量: 11109.704 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) |
---|---|
#46: タンパク質 | 分子量: 11932.701 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) |
#47: タンパク質 | 分子量: 6060.462 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Thermus thermophilus (strain HB8 / ATCC 27634 / DSM 579) (バクテリア) |
-非ポリマー , 3種, 466分子
#60: 化合物 | ChemComp-MG / #61: 化合物 | #62: 化合物 | ChemComp-GDP / | |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK II / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 303 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 59000 X / 倍率(補正後): 120443 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm / Calibrated defocus min: 400 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 2700 nm / Cs: 0.0023 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 949 |
電子光学装置 | 球面収差補正装置: CS-corrected |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 7 / 利用したフレーム数/画像: 1-7 |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 96509 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 32383 / アルゴリズム: BACK PROJECTION 詳細: Resolution : 5.36 Resolution (masked and sharpened) : 3.8 クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient 詳細: each ribosomal rna and protein was first rigid body fitted in the map using UCSF chimera. The missing componant (mRNA and bL9) were then added and fitted. the quality of the fitting was then ...詳細: each ribosomal rna and protein was first rigid body fitted in the map using UCSF chimera. The missing componant (mRNA and bL9) were then added and fitted. the quality of the fitting was then assesed and adjust manually, residue per residue using coot. the RNA confomation were ajusted with the ERRASER modul (in Phenix). The final model was refined using phenix real space refinement procedure. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 3.8 Å |