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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5mqf | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of a human spliceosome activated for step 2 of splicing (C* complex) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | SPLICING / Spliceosome / pre-mRNA splicing / macromolecular complex | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of selenocysteine incorporation / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / cellular response to selenite ion / selenocysteine insertion sequence binding / exon-exon junction complex / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding ...negative regulation of selenocysteine incorporation / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / cellular response to selenite ion / selenocysteine insertion sequence binding / exon-exon junction complex / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / 3'-5' RNA helicase activity / U7 snRNP / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / Z-decay: degradation of maternal mRNAs by zygotically expressed factors / histone pre-mRNA 3'end processing complex / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / negative regulation of excitatory postsynaptic potential / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / Deadenylation of mRNA / nuclear retinoic acid receptor binding / embryonic brain development / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / oocyte development / alternative mRNA splicing, via spliceosome / embryonic cranial skeleton morphogenesis / poly(A) binding / 7-methylguanosine cap hypermethylation / RNA splicing, via transesterification reactions / U1 snRNP binding / mRNA 3'-end processing / M-decay: degradation of maternal mRNAs by maternally stored factors / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / methylosome / ATP-dependent activity, acting on RNA / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / pICln-Sm protein complex / C2H2 zinc finger domain binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / snRNP binding / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / P granule / host-mediated activation of viral transcription / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / telomerase holoenzyme complex / U2-type spliceosomal complex / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / telomerase RNA binding / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / nuclear vitamin D receptor binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / Notch binding / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / U2-type catalytic step 2 spliceosome / RUNX3 regulates NOTCH signaling / positive regulation of neurogenesis / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / U4 snRNP / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / U1 snRNP / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / protein peptidyl-prolyl isomerization / U2-type prespliceosome / inner cell mass cell proliferation / WD40-repeat domain binding / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / precatalytic spliceosome / nuclear androgen receptor binding / cyclosporin A binding / Notch-HLH transcription pathway / lipid biosynthetic process / Formation of paraxial mesoderm / SMAD binding / positive regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / spliceosomal complex assembly / mitotic G2 DNA damage checkpoint signaling / exploration behavior / mRNA Splicing - Minor Pathway / associative learning / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / blastocyst development / protein K63-linked ubiquitination / U5 snRNA binding / intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage by p53 class mediator / U5 snRNP / protein localization to nucleus / positive regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / embryonic organ development 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.9 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Bertram, K. / Hartmuth, K. / Kastner, B. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structure of a human spliceosome activated for step 2 of splicing. 著者: Karl Bertram / Dmitry E Agafonov / Wen-Ti Liu / Olexandr Dybkov / Cindy L Will / Klaus Hartmuth / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / ![]() 要旨: Spliceosome rearrangements facilitated by RNA helicase PRP16 before catalytic step two of splicing are poorly understood. Here we report a 3D cryo-electron microscopy structure of the human ...Spliceosome rearrangements facilitated by RNA helicase PRP16 before catalytic step two of splicing are poorly understood. Here we report a 3D cryo-electron microscopy structure of the human spliceosomal C complex stalled directly after PRP16 action (C*). The architecture of the catalytic U2-U6 ribonucleoprotein (RNP) core of the human C* spliceosome is very similar to that of the yeast pre-Prp16 C complex. However, in C* the branched intron region is separated from the catalytic centre by approximately 20 Å, and its position close to the U6 small nuclear RNA ACAGA box is stabilized by interactions with the PRP8 RNase H-like and PRP17 WD40 domains. RNA helicase PRP22 is located about 100 Å from the catalytic centre, suggesting that it destabilizes the spliced mRNA after step two from a distance. Comparison of the structure of the yeast C and human C* complexes reveals numerous RNP rearrangements that are likely to be facilitated by PRP16, including a large-scale movement of the U2 small nuclear RNP. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-タンパク質 , 14種, 15分子 ABCDFLOQRSUfmpq
#1: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
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#2: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#3: タンパク質 | 分子量: 61610.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#4: タンパク質 | 分子量: 57379.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#6: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#9: タンパク質 | 分子量: 92406.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#12: タンパク質 | 分子量: 100610.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#14: タンパク質 | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#15: タンパク質 | 分子量: 26674.447 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#16: タンパク質 | 分子量: 300255.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#18: タンパク質 | 分子量: 173003.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||
#27: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #30: タンパク質 | | 分子量: 46930.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #31: タンパク質 | | 分子量: 139251.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 EGHIJ
#5: タンパク質 | 分子量: 65612.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#7: タンパク質 | 分子量: 55245.547 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q9UMS4, 合成酵素; C-N結合を形成; 酸-D-アミノ酸リガーゼ(ペプチド合成) |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 5種, 5分子 KMNPT
#8: タンパク質 | 分子量: 26163.420 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#10: タンパク質 | 分子量: 100148.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 28780.518 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#13: タンパク質 | 分子量: 46959.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#17: タンパク質 | 分子量: 105646.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Peptidyl-prolyl cis-trans ... , 2種, 2分子 Vo
#19: タンパク質 | 分子量: 18257.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#29: タンパク質 | 分子量: 33475.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 WX
#20: タンパク質 | 分子量: 28484.592 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#21: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 ahbicjdkelgn
#22: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #23: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #24: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #25: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #26: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #28: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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-RNA鎖 , 2種, 3分子 YZ2
#32: RNA鎖 | 分子量: 104019.172 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #33: RNA鎖 | | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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-Homo sapiens ... , 2種, 2分子 56
#34: RNA鎖 | 分子量: 36908.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#35: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-詳細
Has protein modification | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Human C* Spliceosome, masked refinement / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 6.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 80 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm |
撮影 | 電子線照射量: 2.1 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 17 / 利用したフレーム数/画像: 2-17 |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 5.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 136534 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | 空間: REAL |