+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5lk7 | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Single particle reconstruction of slow bee paralysis virus virion at pH 5.5 | ||||||
要素 |
| ||||||
キーワード | VIRUS / icosahedral virus / honebee virus / iflavirus | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 viral capsid / RNA helicase activity / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / structural molecule activity / proteolysis / RNA binding / ATP binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Slow bee paralysis virus (ウイルス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.42 Å | ||||||
データ登録者 | Kalynych, S. / Fuzik, T. / Plevka, P. | ||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2017 タイトル: Cryo-EM study of slow bee paralysis virus at low pH reveals iflavirus genome release mechanism. 著者: Sergei Kalynych / Tibor Füzik / Antonín Přidal / Joachim de Miranda / Pavel Plevka / 要旨: Viruses from the family Iflaviridae are insect pathogens. Many of them, including slow bee paralysis virus (SBPV), cause lethal diseases in honeybees and bumblebees, resulting in agricultural losses. ...Viruses from the family Iflaviridae are insect pathogens. Many of them, including slow bee paralysis virus (SBPV), cause lethal diseases in honeybees and bumblebees, resulting in agricultural losses. Iflaviruses have nonenveloped icosahedral virions containing single-stranded RNA genomes. However, their genome release mechanism is unknown. Here, we show that low pH promotes SBPV genome release, indicating that the virus may use endosomes to enter host cells. We used cryo-EM to study a heterogeneous population of SBPV virions at pH 5.5. We determined the structures of SBPV particles before and after genome release to resolutions of 3.3 and 3.4 Å, respectively. The capsids of SBPV virions in low pH are not expanded. Thus, SBPV does not appear to form "altered" particles with pores in their capsids before genome release, as is the case in many related picornaviruses. The egress of the genome from SBPV virions is associated with a loss of interpentamer contacts mediated by N-terminal arms of VP2 capsid proteins, which result in the expansion of the capsid. Pores that are 7 Å in diameter form around icosahedral threefold symmetry axes. We speculate that they serve as channels for the genome release. Our findings provide an atomic-level characterization of the genome release mechanism of iflaviruses. | ||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5lk7.cif.gz | 160.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb5lk7.ent.gz | 123.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5lk7.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5lk7_validation.pdf.gz | 1002.4 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 5lk7_full_validation.pdf.gz | 1017.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | 5lk7_validation.xml.gz | 37.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5lk7_validation.cif.gz | 55.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lk/5lk7 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lk/5lk7 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
| x 60
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 30307.211 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Slow bee paralysis virus (ウイルス) / 参照: UniProt: A7LM73 |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 29824.205 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Slow bee paralysis virus (ウイルス) / 参照: UniProt: A7LM73 |
#3: タンパク質 | 分子量: 47623.910 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Slow bee paralysis virus (ウイルス) / 参照: UniProt: A7LM73 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Slow bee paralysis virus / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
---|---|
分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Slow bee paralysis virus (ウイルス) |
ウイルスについての詳細 | 中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: SPECIES / タイプ: VIRION |
天然宿主 | 生物種: Apis mellifera / 株: 3 |
ウイルス殻 | 名称: icosahedral |
緩衝液 | pH: 5.5 / 詳細: 30 mM Sodium Acetate 50 mM Sodium Chloride |
試料 | 濃度: 1.8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: sample was purifed froim natural source and dialyzed overnight into sodium acetate buffer |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 詳細: blot force 0, blot time 2 s. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.5 sec. / 電子線照射量: 21 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5325 |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 / 動画フレーム数/画像: 7 / 利用したフレーム数/画像: 1-7 |
-解析
EMソフトウェア |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 4712 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.42 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 10350 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 49.7 / プロトコル: OTHER / 空間: RECIPROCAL |