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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5hx2 | ||||||
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タイトル | In vitro assembled star-shaped hubless T4 baseplate | ||||||
要素 |
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キーワード | VIRAL PROTEIN / T4 / baseplate / complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 virus tail, baseplate / viral tail assembly / viral release from host cell / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Enterobacteria phage T4 (ファージ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||
データ登録者 | Yap, M.L. / Klose, T. / Fokine, A. / Rossmann, M.G. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2016 タイトル: Role of bacteriophage T4 baseplate in regulating assembly and infection. 著者: Moh Lan Yap / Thomas Klose / Fumio Arisaka / Jeffrey A Speir / David Veesler / Andrei Fokine / Michael G Rossmann / 要旨: Bacteriophage T4 consists of a head for protecting its genome and a sheathed tail for inserting its genome into a host. The tail terminates with a multiprotein baseplate that changes its conformation ...Bacteriophage T4 consists of a head for protecting its genome and a sheathed tail for inserting its genome into a host. The tail terminates with a multiprotein baseplate that changes its conformation from a "high-energy" dome-shaped to a "low-energy" star-shaped structure during infection. Although these two structures represent different minima in the total energy landscape of the baseplate assembly, as the dome-shaped structure readily changes to the star-shaped structure when the virus infects a host bacterium, the dome-shaped structure must have more energy than the star-shaped structure. Here we describe the electron microscopy structure of a 3.3-MDa in vitro-assembled star-shaped baseplate with a resolution of 3.8 Å. This structure, together with other genetic and structural data, shows why the high-energy baseplate is formed in the presence of the central hub and how the baseplate changes to the low-energy structure, via two steps during infection. Thus, the presence of the central hub is required to initiate the assembly of metastable, high-energy structures. If the high-energy structure is formed and stabilized faster than the low-energy structure, there will be insufficient components to assemble the low-energy structure. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5hx2.cif.gz | 750.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5hx2.ent.gz | 572.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5hx2.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5hx2_validation.pdf.gz | 852.6 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 5hx2_full_validation.pdf.gz | 998.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | 5hx2_validation.xml.gz | 134 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5hx2_validation.cif.gz | 200.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hx/5hx2 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hx/5hx2 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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| x 6
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3 |
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: C6 (6回回転対称)) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 119336.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage T4 (ファージ) 遺伝子: 7 / プラスミド: pET29 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P19061 | ||||||
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#2: タンパク質 | 分子量: 38041.668 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage T4 (ファージ) 遺伝子: 8 / プラスミド: pET29 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P19062 #3: タンパク質 | 分子量: 74492.641 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage T4 (ファージ) 遺伝子: 6 / プラスミド: pET29 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P19060 #4: タンパク質 | | 分子量: 22990.885 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage T4 (ファージ) 遺伝子: 53 / プラスミド: pET29 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P16011 #5: タンパク質 | 分子量: 66281.680 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage T4 (ファージ) 遺伝子: 10 / プラスミド: pET29 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P10928 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: In vitro assembled hubless T4 baseplate / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 3.3 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Enterobacteria phage T4 (ファージ) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / プラスミド: pET29 |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: 400-mesh copper CF-1.2/1.3-4C / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: CF-1.2/1.3-4C |
急速凍結 | 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 80 % / 詳細: Plunged into liquid ethane (GATAN CRYOPLUNGE 3). |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 22500 X / 倍率(補正後): 38168 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Calibrated defocus min: 400 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 3740 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: ZEMLIN TABLEAU |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 7.6 sec. / 電子線照射量: 35 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 1725 |
画像スキャン | 横: 7676 / 縦: 7420 / 動画フレーム数/画像: 38 / 利用したフレーム数/画像: 3-38 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 69920 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C6 (6回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 45607 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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