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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v7c | |||||||||
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| タイトル | Structure of the Ribosome with Elongation Factor G Trapped in the Pre-Translocation State (pre-translocation 70S*tRNA structure) | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSLATION / EF-G / single particle analysis / pre-translocation translation complex / viomycin | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / positive regulation of ribosome biogenesis / RNA-binding transcription regulator activity ...stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / positive regulation of ribosome biogenesis / RNA-binding transcription regulator activity / translational termination / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / response to reactive oxygen species / ribosome assembly / transcription elongation factor complex / DNA endonuclease activity / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / response to radiation / maintenance of translational fidelity / mRNA 5'-UTR binding / regulation of translation / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / transferase activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() Streptomyces (バクテリア) | |||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Brilot, A.F. / Korostelev, A.A. / Ermolenko, D.N. / Grigorieff, N. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2013タイトル: Structure of the ribosome with elongation factor G trapped in the pretranslocation state. 著者: Axel F Brilot / Andrei A Korostelev / Dmitri N Ermolenko / Nikolaus Grigorieff / ![]() 要旨: During protein synthesis, tRNAs and their associated mRNA codons move sequentially on the ribosome from the A (aminoacyl) site to the P (peptidyl) site to the E (exit) site in a process catalyzed by ...During protein synthesis, tRNAs and their associated mRNA codons move sequentially on the ribosome from the A (aminoacyl) site to the P (peptidyl) site to the E (exit) site in a process catalyzed by a universally conserved ribosome-dependent GTPase [elongation factor G (EF-G) in prokaryotes and elongation factor 2 (EF-2) in eukaryotes]. Although the high-resolution structure of EF-G bound to the posttranslocation ribosome has been determined, the pretranslocation conformation of the ribosome bound with EF-G and A-site tRNA has evaded visualization owing to the transient nature of this state. Here we use electron cryomicroscopy to determine the structure of the 70S ribosome with EF-G, which is trapped in the pretranslocation state using antibiotic viomycin. Comparison with the posttranslocation ribosome shows that the small subunit of the pretranslocation ribosome is rotated by ∼12° relative to the large subunit. Domain IV of EF-G is positioned in the cleft between the body and head of the small subunit outwardly of the A site and contacts the A-site tRNA. Our findings suggest a model in which domain IV of EF-G promotes the translocation of tRNA from the A to the P site as the small ribosome subunit spontaneously rotates back from the hybrid, rotated state into the nonrotated posttranslocation state. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 4v7c.cif.gz | 3.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb4v7c.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 | 4v7c.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 4v7c_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 4v7c_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 4v7c_validation.xml.gz | 265.6 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 4v7c_validation.cif.gz | 428.9 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v7/4v7c ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v7/4v7c | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-RNA鎖 , 5種, 6分子 AAAVAWAXBABB
| #1: RNA鎖 | 分子量: 499690.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #22: RNA鎖 | 分子量: 24485.539 Da / 分子数: 2 / Fragment: SEE REMARK 999 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #23: RNA鎖 | | 分子量: 5781.499 Da / 分子数: 1 / Fragment: SEE REMARK 999 / 由来タイプ: 合成 #25: RNA鎖 | | 分子量: 941306.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #26: RNA鎖 | | 分子量: 38483.926 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 ABACADAEAFAGAHAIAJAKALAMANAOAPAQARASATAU
| #2: タンパク質 | 分子量: 26650.475 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #3: タンパク質 | 分子量: 25900.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #4: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #5: タンパク質 | 分子量: 17498.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #6: タンパク質 | 分子量: 15211.058 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #7: タンパク質 | 分子量: 19923.959 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #8: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #9: タンパク質 | 分子量: 14755.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #10: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #11: タンパク質 | 分子量: 13739.778 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #12: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #13: タンパク質 | 分子量: 12997.271 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #14: タンパク質 | 分子量: 11475.364 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #15: タンパク質 | 分子量: 10159.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #16: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #17: タンパク質 | 分子量: 9593.296 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #18: タンパク質 | 分子量: 8874.276 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #19: タンパク質 | 分子量: 10324.160 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #20: タンパク質 | 分子量: 9577.268 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #21: タンパク質 | 分子量: 8392.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
+50S ribosomal protein ... , 31種, 31分子 BCBDBEBFBGBHBIBJBKBLBMBNBOBPBQBRBSBTBUBVBWBXBYBZB1B2B3B4B5B6B7
-タンパク質・ペプチド / 非ポリマー , 2種, 2分子 AY

| #24: タンパク質・ペプチド | |
|---|---|
| #58: 化合物 | ChemComp-ZN / |
-詳細
| Has protein modification | Y |
|---|---|
| 配列の詳細 | THE SEQUENCES OF P/E TRNA (TRNA-MET) AND MRNA (GGCAAGGAGGUAAAAAUGUUUAAACGUAAAUCUACU) USED IN THIS ...THE SEQUENCES OF P/E TRNA (TRNA-MET) AND MRNA (GGCAAGGAGG |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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| 分子量 | 値: 3 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | 名称: Polymix buffer / pH: 7.6 詳細: 10 mM HEPES-KOH, 5 mM MgCl2, 90 mM NH4Cl, 2 mM spermidine, 0.1 mM spermine, 6 mM BME, 0.5 mM viomycin, 0.5 mM GTP, 0.5 mM fusidic acid | |||||||||||||||||||||||||
| 試料 | 濃度: 0.4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | 詳細: C-flat 1.2/1.3 holey carbon 400 mesh copper grid, glow discharged with a current of -20 mA for 45 seconds in an EMITECH K100X glow discharge unit | |||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK II / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % 詳細: Freshly glow-disharged grids were loaded into an FEI Mark II Vitrobot and equilibrated to 95% relative humidity at 22 degrees Celsius. 2 microliters of sample was applied through the side ...詳細: Freshly glow-disharged grids were loaded into an FEI Mark II Vitrobot and equilibrated to 95% relative humidity at 22 degrees Celsius. 2 microliters of sample was applied through the side port, blotted for 7 seconds with a positional offset of 2, and plunged into liquid ethane. 手法: Freshly glow-disharged grids were loaded into an FEI Mark II Vitrobot and equilibrated to 95% relative humidity at 22 degrees Celsius. 2 microliters of sample was applied through the side ...手法: Freshly glow-disharged grids were loaded into an FEI Mark II Vitrobot and equilibrated to 95% relative humidity at 22 degrees Celsius. 2 microliters of sample was applied through the side port, blotted for 7 seconds with a positional offset of 2, and plunged into liquid ethane. |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2012年11月2日 |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 133333 X / 倍率(補正後): 134615 X / 最大 デフォーカス(公称値): 6950 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1150 nm / Cs: 0.01 mm / 非点収差: Automatically corrected using FEI software / カメラ長: 0 mm |
| 試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON I (4k x 4k) |
| 画像スキャン | デジタル画像の数: 13341 |
| 放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
| 放射波長 | 相対比: 1 |
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解析
| EMソフトウェア |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| CTF補正 | 詳細: CTFFIND3, FREALIGN per micrograph | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 手法: Projection Matching / 解像度: 7.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 85115 / ピクセルサイズ(公称値): 1.05 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.04 Å 詳細: Refinement included data to 12 Angstrom resolution to limit FSC bias. See primary citation Supplementary Information for details. (Single particle details: Refinement and 3D classification ...詳細: Refinement included data to 12 Angstrom resolution to limit FSC bias. See primary citation Supplementary Information for details. (Single particle details: Refinement and 3D classification performed by Frealign) (Single particle--Applied symmetry: C1) 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--rigid body DETAILS--Chain Y not used in refinement | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | PDB-ID: 4GD1![]() 4gd1 Accession code: 4GD1 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化ステップ | サイクル: LAST
|
ムービー
コントローラー
万見について






引用
UCSF Chimera

























PDBj

































