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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v69 | |||||||||
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タイトル | Ternary complex-bound E.coli 70S ribosome. | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / ternary complex / flexible fitting / cryo-EM / 30S / 50S / tRNA / mRNA / EF-Tu / 70S / Ribonucleoprotein / Ribosomal protein / RNA-binding / rRNA-binding / Antibiotic resistance / Repressor / Transcription / Transcription regulation / Transcription termination / Translation regulation / tRNA-binding / Methylation / Endonuclease / Hydrolase / Nuclease / Cell membrane / Elongation factor / GTP-binding / Membrane / Nucleotide-binding / Phosphoprotein / Protein biosynthesis | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 guanyl-nucleotide exchange factor complex / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / translational elongation / transcriptional attenuation ...guanyl-nucleotide exchange factor complex / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / translational elongation / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / translation elongation factor activity / four-way junction DNA binding / translational termination / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Villa, E. / Sengupta, J. / Trabuco, L.G. / LeBarron, J. / Baxter, W.T. / Shaikh, T.R. / Grassucci, R.A. / Nissen, P. / Ehrenberg, M. / Schulten, K. / Frank, J. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2009 タイトル: Ribosome-induced changes in elongation factor Tu conformation control GTP hydrolysis. 著者: Elizabeth Villa / Jayati Sengupta / Leonardo G Trabuco / Jamie LeBarron / William T Baxter / Tanvir R Shaikh / Robert A Grassucci / Poul Nissen / Måns Ehrenberg / Klaus Schulten / Joachim Frank / 要旨: In translation, elongation factor Tu (EF-Tu) molecules deliver aminoacyl-tRNAs to the mRNA-programmed ribosome. The GTPase activity of EF-Tu is triggered by ribosome-induced conformational changes of ...In translation, elongation factor Tu (EF-Tu) molecules deliver aminoacyl-tRNAs to the mRNA-programmed ribosome. The GTPase activity of EF-Tu is triggered by ribosome-induced conformational changes of the factor that play a pivotal role in the selection of the cognate aminoacyl-tRNAs. We present a 6.7-A cryo-electron microscopy map of the aminoacyl-tRNA x EF-Tu x GDP x kirromycin-bound Escherichia coli ribosome, together with an atomic model of the complex obtained through molecular dynamics flexible fitting. The model reveals the conformational changes in the conserved GTPase switch regions of EF-Tu that trigger hydrolysis of GTP, along with key interactions, including those between the sarcin-ricin loop and the P loop of EF-Tu, and between the effector loop of EF-Tu and a conserved region of the 16S rRNA. Our data suggest that GTP hydrolysis on EF-Tu is controlled through a hydrophobic gate mechanism. #1: ジャーナル: Structure / 年: 2008 タイトル: Flexible fitting of atomic structures into electron microscopy maps using molecular dynamics. 著者: Trabuco, L. / Villa, E. / Mitra, K. / Frank, J. / Schulten, K. #2: ジャーナル: J.Struct.Biol. / 年: 2008 タイトル: Exploration of parameters in cryo-EM leading to an improved density map of the E. coli ribosome 著者: LeBarron, J. / Grassucci, R.A. / Shaikh, T.R. / Baxter, W.T. / Sengupta, J. / Frank, J. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 4v69.cif.gz | 3.8 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4v69.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 4v69.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 4v69_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4v69_full_validation.pdf.gz | 6.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 4v69_validation.xml.gz | 707.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4v69_validation.cif.gz | 979.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v6/4v69 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v6/4v69 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 AJAKALAMANAOAPAQARASATAUABACADAEAFAGAHAI
#1: タンパク質 | 分子量: 11196.988 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7R5 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 12487.200 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#3: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7S3 |
#4: タンパク質 | 分子量: 12528.639 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#5: タンパク質 | 分子量: 11028.997 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG59 |
#6: タンパク質 | 分子量: 10188.687 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8X9M2 |
#7: タンパク質 | 分子量: 9065.417 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#8: タンパク質 | 分子量: 9263.946 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG63 |
#9: タンパク質 | 分子量: 6466.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#10: タンパク質 | 分子量: 9057.626 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#11: タンパク質 | 分子量: 9506.190 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#12: タンパク質 | 分子量: 6067.081 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P68679 |
#13: タンパク質 | 分子量: 24253.943 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V0 |
#14: タンパク質 | 分子量: 23078.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#15: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#16: タンパク質 | 分子量: 15804.282 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#17: タンパク質 | 分子量: 11669.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02358 |
#18: タンパク質 | 分子量: 16764.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02359 |
#19: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#20: タンパク質 | 分子量: 14554.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7X3 |
-RNA鎖 , 7種, 7分子 AAAYAWAXAVBBBA
#21: RNA鎖 | 分子量: 495927.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 83754040 |
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#22: RNA鎖 | 分子量: 24518.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: This sequence occurs naturally in yeast. |
#23: RNA鎖 | 分子量: 24485.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) |
#24: RNA鎖 | 分子量: 3499.162 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: mRNA was synthetically contstructed |
#26: RNA鎖 | 分子量: 24816.811 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) |
#57: RNA鎖 | 分子量: 941306.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 33357927 |
#58: RNA鎖 | 分子量: 37848.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 33357928 |
+50S ribosomal protein ... , 30種, 30分子 B5BIBJBKBLBMBNBOBPBQBRBSBTBUBVBWBXBYBCBZB0B1B2B3B4BDBEBFBGBH
-タンパク質 / 非ポリマー , 2種, 2分子 AZ
#25: タンパク質 | 分子量: 43239.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A6N1, UniProt: P0CE48*PLUS |
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#59: 化合物 | ChemComp-GDP / |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: E. coli ribosome in complex with the ternary complex EF-Tu aminoacyl-tRNA GDP タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 0.0768 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: Thin carbon on 300 mesh Quantifoil R2/4 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK I / 凍結剤: ETHANE 詳細: Vitrification using FEI Vitrobot; blot 3 seconds before plunging with an offset of -1mm |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI POLARA 300 / 日付: 2006年8月31日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 59000 X / 倍率(補正後): 58279 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 4520 nm |
試料ホルダ | 温度: 84 K |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: Correction of reconstruction of each defocus group | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 6.7 Å / 粒子像の数: 131599 / ピクセルサイズ(実測値): 1.2 Å / 詳細: see LeBarron et al., JSB 164 (2008) 24-32. / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL Target criteria: Cross correlation, root-mean square deviation 詳細: METHOD--See Trabuco et al., Structure 16 (2008) 673-683. REFINEMENT PROTOCOL--Flexible fitting | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化ステップ | サイクル: LAST
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