温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 7.5 詳細: drop: 1 uL 5 mg/mL RNA in 2.5 mM magnesium chloride, 10 mM HEPES-KOH pH 7.5 (heated to 65 C for 3 minutes, cooled at room temperature, 0.5 mM spermidine added, centrifuged for 10 minutes at ...詳細: drop: 1 uL 5 mg/mL RNA in 2.5 mM magnesium chloride, 10 mM HEPES-KOH pH 7.5 (heated to 65 C for 3 minutes, cooled at room temperature, 0.5 mM spermidine added, centrifuged for 10 minutes at 13000 x g) + 2 uL 10% MPD, 40 mM sodium cacodylate, pH 6.0, 12 mM spermine, 80 mM sodium chloride, 20 mM magnesium chloride (Nucleic Acid Mini-Screen kit, Hampton Research), well: 20-35% MPD, crystals appeared within 2-3 days and grew to full size over 1-2 weeks. To obtain derivatized crystals for phasing, 5 uL 4 mM iridium (III) hexammine in RNase-free water was added directly to crystallization drops and well solutions <35% MPD were replaced with 35% MPD. Wells were then re-sealed and allowed to re-equilibrate for at least 2 days, VAPOR DIFFUSION, SITTING DROP, temperature 293K
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データ収集
回折
平均測定温度: 100 K
放射光源
由来: シンクロトロン / サイト: ALS / ビームライン: 4.2.2 / 波長: 1.0972 Å
検出器
タイプ: TAURUS-1 / 検出器: CMOS / 日付: 2013年9月27日
放射
モノクロメーター: Rosenbaum-Rock sagitally focused Si(111) プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長
波長: 1.0972 Å / 相対比: 1
反射
解像度: 2.45→50.14 Å / Num. obs: 9499
反射 シェル
最高解像度: 2.45 Å
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解析
ソフトウェア
名称
バージョン
分類
Blu-Ice
Ice
データ収集
PHENIX
モデル構築
PHENIX
(phenix.refine: 1.8.4_1496)
精密化
d*TREK
データ削減
d*TREK
データスケーリング
PHENIX
位相決定
精密化
構造決定の手法: 単波長異常分散 / 解像度: 2.463→50.14 Å / SU ML: 0.35 / σ(F): 1.39 / 位相誤差: 38.25 / 立体化学のターゲット値: ML
Rfactor
反射数
%反射
Selection details
Rfree
0.2835
824
9.91 %
RANDOM
Rwork
0.2303
-
-
-
obs
0.2357
8418
85.47 %
-
溶媒の処理
減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL