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万見
- PDB-2l1f: Structure of a conserved retroviral RNA packaging element by NMR ... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 2l1f
タイトルStructure of a conserved retroviral RNA packaging element by NMR spectroscopy and cryo-electron tomography
要素
  • RNA (65-MER)
  • RNA (66-MER)
キーワードRNA / retrovirus / packaging / cryo-ET
機能・相同性: / RNA / RNA (> 10)
機能・相同性情報
生物種Moloney Murine Leukemia Virus (ウイルス)
手法溶液NMR / distance geometry
Model detailslowest energy, model 1
データ登録者Summers, M.F. / Irobalieva, R.N. / Tolbert, B. / Smalls-Manty, A. / Iyalla, K. / Loeliger, K. / D'Souza, V. / Khant, H. / Schmid, M. / Garcia, E. ...Summers, M.F. / Irobalieva, R.N. / Tolbert, B. / Smalls-Manty, A. / Iyalla, K. / Loeliger, K. / D'Souza, V. / Khant, H. / Schmid, M. / Garcia, E. / Telesnitsky, A. / Chiu, W. / Miyazaki, Y.
引用ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2010
タイトル: Structure of a conserved retroviral RNA packaging element by NMR spectroscopy and cryo-electron tomography.
著者: Yasuyuki Miyazaki / Rossitza N Irobalieva / Blanton S Tolbert / Adjoa Smalls-Mantey / Kilali Iyalla / Kelsey Loeliger / Victoria D'Souza / Htet Khant / Michael F Schmid / Eric L Garcia / ...著者: Yasuyuki Miyazaki / Rossitza N Irobalieva / Blanton S Tolbert / Adjoa Smalls-Mantey / Kilali Iyalla / Kelsey Loeliger / Victoria D'Souza / Htet Khant / Michael F Schmid / Eric L Garcia / Alice Telesnitsky / Wah Chiu / Michael F Summers /
要旨: The 5'-untranslated regions of all gammaretroviruses contain a conserved "double-hairpin motif" (Ψ(CD)) that is required for genome packaging. Both hairpins (SL-C and SL-D) contain GACG tetraloops ...The 5'-untranslated regions of all gammaretroviruses contain a conserved "double-hairpin motif" (Ψ(CD)) that is required for genome packaging. Both hairpins (SL-C and SL-D) contain GACG tetraloops that, in isolated RNAs, are capable of forming "kissing" interactions stabilized by two intermolecular G-C base pairs. We have determined the three-dimensional structure of the double hairpin from the Moloney murine leukemia virus ([Ψ(CD)](2), 132 nt, 42.8 kDa) using a (2)H-edited NMR-spectroscopy-based approach. This approach enabled the detection of (1)H-(1)H dipolar interactions that were not observed in previous studies of isolated SL-C and SL-D hairpin RNAs using traditional (1)H-(1)H correlated and (1)H-(13)C-edited NMR methods. The hairpins participate in intermolecular cross-kissing interactions (SL-C to SL-D' and SLC' to SL-D) and stack in an end-to-end manner (SL-C to SL-D and SL-C' to SL-D') that gives rise to an elongated overall shape (ca 95 Å×45 Å×25 Å). The global structure was confirmed by cryo-electron tomography (cryo-ET), making [Ψ(CD)](2) simultaneously the smallest RNA to be structurally characterized to date by cryo-ET and among the largest to be determined by NMR. Our findings suggest that, in addition to promoting dimerization, [Ψ(CD)](2) functions as a scaffold that helps initiate virus assembly by exposing a cluster of conserved UCUG elements for binding to the cognate nucleocapsid domains of assembling viral Gag proteins.
履歴
登録2010年7月28日登録サイト: BMRB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02010年10月27日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12011年7月13日Group: Version format compliance
改定 1.22020年2月5日Group: Database references / Other
カテゴリ: database_2 / pdbx_database_status / struct_ref_seq_dif
Item: _pdbx_database_status.status_code_cs / _struct_ref_seq_dif.details
改定 1.32024年5月1日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: RNA (65-MER)
B: RNA (66-MER)


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)42,4882
ポリマ－42,4882
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
NMR アンサンブル
データ基準
コンフォーマー数 (登録 / 計算)20 / 340structures with the lowest energy
代表モデルモデル #1lowest energy

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要素

#1: RNA鎖 RNA (65-MER)


分子量: 21071.635 Da / 分子数: 1 / 変異: U64A A69U / 由来タイプ: 合成
詳細: RNA was prepared by in vitro transcription with T7 RNA polymerase
由来: (合成) Moloney Murine Leukemia Virus (ウイルス)
参照: GenBank: AF033811.1
#2: RNA鎖 RNA (66-MER)


分子量: 21416.840 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
詳細: RNA was prepared by in vitro transcription with T7 RNA polymerase
由来: (合成) Moloney Murine Leukemia Virus (ウイルス)
参照: GenBank: AF033811.1

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実験情報

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実験

実験手法: 溶液NMR
NMR実験
Conditions-IDExperiment-IDSolution-IDタイプ
1112D NOESY
1212D NOESY

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試料調製

詳細内容: 400-800 uM [U-2H] RNA (65-MER), 100% D2O / 溶媒系: 100% D2O
試料単位: uM / 構成要素: RNA (65-MER)-1 / Isotopic labeling: [U-2H] / Conc. range: 400-800
試料状態イオン強度: 80 / pH: 7 / 圧: ambient atm / 温度: 310 K

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NMR測定

NMRスペクトロメーター
タイプ製造業者モデル磁場強度 (MHz)Spectrometer-ID
Bruker DRXBrukerDRX8001
Bruker DRXBrukerDRX6002

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解析

NMR software
名称バージョン開発者分類
CYANA2.1Guntert, Mumenthaler and Wuthrich構造決定
CYANA2.1Guntert, Mumenthaler and Wuthrich精密化
精密化手法: distance geometry / ソフトェア番号: 1
詳細: Structures were calculated and refined with CYANA using the AMBER residue library. Upper-limit distance restraints of 2.7 , 3.3 and 5.0 were employed for direct NOE cross peaks of strong, ...詳細: Structures were calculated and refined with CYANA using the AMBER residue library. Upper-limit distance restraints of 2.7 , 3.3 and 5.0 were employed for direct NOE cross peaks of strong, medium and weak intensities, respectively, for all cross peaks except those associated with the intraresidue H8/6-to-H2 and H3 interactions. For these proton pairs, upper distance limits of 4.2 and 3.2 were therefore employed for NOEs of medium and strong intensity, respectively.43 Cross-helix P-P distance restraints (with 20% weighting coefficient) were employed for A-form helical segments to prevent the generation of structures with collapsed major grooves:43,52,55 P(i)-P(i+2) (cross-helix phosphorus of the i+2 base pair) = 16.1 - 17.1 , P(i)-P(i+3) = 14.2 - 15.2 ; P(i)-P(i+4) = 11.7 -12.7 ; P(i)-P(i+5) = 9.4 -10.4 ; P(i)-P(i+6) = 9.0 -10.0 . Torsion angle restraints for A helical stem residues were centered around published A-form RNA values 112 with allowed deviations of 50 degrees. Four restraints per hydrogen bond were employed to enforce approximately linear NH-N and NH-O bond distances of 1.85 0.05, and two lower limit restraints per base pair were employed to weakly enforce base pair planarity (20% weighting coefficient) (G-C base pairs: G-C4 to C-C6 > 8.3 and G-N9 to C-H6 > 10.75 . A-U base pairs: A-C4 to U-C6 > 8.3 and A-N9 to U-H6 > 10.75 ).
代表構造選択基準: lowest energy
NMRアンサンブルコンフォーマー選択の基準: structures with the lowest energy
計算したコンフォーマーの数: 340 / 登録したコンフォーマーの数: 20

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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