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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9673 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of Mud Crab Dicistrovirus | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 | Mud crab dicistrovirus != Mud crab virus Mud crab dicistrovirus
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キーワード | Dicistrovirus / VIRUS | |||||||||
機能・相同性 | Dicistrovirus, capsid-polyprotein, C-terminal / CRPV capsid protein like / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / Structural polyprotein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Mud crab virus (ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang Q / Gao Y | |||||||||
資金援助 | 中国, 2件
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引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2019 タイトル: Cryo-electron Microscopy Structures of Novel Viruses from Mud Crab with Multiple Infections. 著者: Yuanzhu Gao / Shanshan Liu / Jiamiao Huang / Qianqian Wang / Kunpeng Li / Jian He / Jianguo He / Shaoping Weng / Qinfen Zhang / 要旨: Viruses associated with sleeping disease (SD) in crabs cause great economic losses to aquaculture, and no effective measures are available for their prevention. In this study, to help develop novel ...Viruses associated with sleeping disease (SD) in crabs cause great economic losses to aquaculture, and no effective measures are available for their prevention. In this study, to help develop novel antiviral strategies, single-particle cryo-electron microscopy was applied to investigate viruses associated with SD. The results not only revealed the structure of mud crab dicistrovirus (MCDV) but also identified a novel mud crab tombus-like virus (MCTV) not previously detected using molecular biology methods. The structure of MCDV at a 3.5-Å resolution reveals three major capsid proteins (VP1 to VP3) organized into a pseudo-T=3 icosahedral capsid, and affirms the existence of VP4. Unusually, MCDV VP3 contains a long C-terminal region and forms a novel protrusion that has not been observed in other dicistrovirus. Our results also reveal that MCDV can release its genome via conformation changes of the protrusions when viral mixtures are heated. The structure of MCTV at a 3.3-Å resolution reveals a T= 3 icosahedral capsid with common features of both tombusviruses and nodaviruses. Furthermore, MCTV has a novel hydrophobic tunnel beneath the 5-fold vertex and 30 dimeric protrusions composed of the P-domains of the capsid protein at the 2-fold axes that are exposed on the virion surface. The structural features of MCTV are consistent with a novel type of virus. Pathogen identification is vital for unknown infectious outbreaks, especially for dual or multiple infections. Sleeping disease (SD) in crabs causes great economic losses to aquaculture worldwide. Here we report the discovery and identification of a novel virus in mud crabs with multiple infections that was not previously detected by molecular, immune, or traditional electron microscopy (EM) methods. High-resolution structures of pathogenic viruses are essential for a molecular understanding and developing new disease prevention methods. The three-dimensional (3D) structure of the mud crab tombus-like virus (MCTV) and mud crab dicistrovirus (MCDV) determined in this study could assist the development of antiviral inhibitors. The identification of a novel virus in multiple infections previously missed using other methods demonstrates the usefulness of this strategy for investigating multiple infectious outbreaks, even in humans and other animals. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_9673.map.gz | 397.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-9673-v30.xml emd-9673.xml | 16 KB 16 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_9673_fsc.xml | 15.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_9673.png | 334.8 KB | ||
Filedesc metadata | emd-9673.cif.gz | 6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9673 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9673 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_9673_validation.pdf.gz | 751.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_9673_full_validation.pdf.gz | 751 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_9673_validation.xml.gz | 15.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_9673_validation.cif.gz | 21.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9673 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9673 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_9673.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.933 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Mud crab dicistrovirus
全体 | 名称: Mud crab dicistrovirus (ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: Mud crab virus
超分子 | 名称: Mud crab virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / NCBI-ID: 932662 / 生物種: Mud crab virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: Scylla paramamosain (甲殻類) |
-分子 #1: VP1 of Mud crab dicistrovirus
分子 | 名称: VP1 of Mud crab dicistrovirus / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mud crab virus (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 20.691158 KDa |
配列 | 文字列: GGGMDYAKSD SSSLVTTMGE QFRSLRMLTR RSSPTDVLTG TSVTLPGITI GTDSSLRQSV LNIISYMYRF TKGSISYKII PKIKGDLYI TTSSADNIEL NSNAYSFDVN RALHYQNTAL NPVVQVSLPY YCPSENLVID STSFPNLSNL VLTNLERSSN T YTVLVSAG ...文字列: GGGMDYAKSD SSSLVTTMGE QFRSLRMLTR RSSPTDVLTG TSVTLPGITI GTDSSLRQSV LNIISYMYRF TKGSISYKII PKIKGDLYI TTSSADNIEL NSNAYSFDVN RALHYQNTAL NPVVQVSLPY YCPSENLVID STSFPNLSNL VLTNLERSSN T YTVLVSAG DDHTFSQLAG CPAFTIGPSR SAA UniProtKB: Structural polyprotein |
-分子 #2: VP2 of Mud crab dicistrovirus
分子 | 名称: VP2 of Mud crab dicistrovirus / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mud crab virus (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 28.074658 KDa |
配列 | 文字列: MDSSVTNTGG LMPSATISNS EGATMLLNDI PDPTQNVFLS RNVTDNLFEV QDQNLIESLS REVLLGTGTW QSGQAEISTT LTEQQLITN YEQPSIRQIS LPDDIVKGSS FIASKLANIA YMRCDYELYL RVQGSPFLQG LLLLWNKMNA DQTSKIRSSI T EHLRSITS ...文字列: MDSSVTNTGG LMPSATISNS EGATMLLNDI PDPTQNVFLS RNVTDNLFEV QDQNLIESLS REVLLGTGTW QSGQAEISTT LTEQQLITN YEQPSIRQIS LPDDIVKGSS FIASKLANIA YMRCDYELYL RVQGSPFLQG LLLLWNKMNA DQTSKIRSSI T EHLRSITS FPGVTLNMQS DSRSVKLVIP YTSEFQVFNP RNENKLNSVR LSILSALRGP STSEKATYSI MGRMTNIKLY GH APSIVSL SYPQTE UniProtKB: Structural polyprotein |
-分子 #3: VP3 of Mud crab dicistrovirus
分子 | 名称: VP3 of Mud crab dicistrovirus / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mud crab virus (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 48.24968 KDa |
配列 | 文字列: SKDRDLSKVS PYENIPAKGF THGVGFDYGV PLSLFPDNAI DPTIANPESI DEMSIQYLAS RPYMLDRYTI KGGNTPSPSG TVVADIPIS PVNYSLYGSI IRDYRTIFGA PVSLAVAMAS WWRAKIHLNL QFAKTQYHQC RLLVQYLPYG SDVQSLENVL S QIIDISHV ...文字列: SKDRDLSKVS PYENIPAKGF THGVGFDYGV PLSLFPDNAI DPTIANPESI DEMSIQYLAS RPYMLDRYTI KGGNTPSPSG TVVADIPIS PVNYSLYGSI IRDYRTIFGA PVSLAVAMAS WWRAKIHLNL QFAKTQYHQC RLLVQYLPYG SDVQSLENVL S QIIDISHV DESGIDLCFP SIFTNKWMRS YDPATEGYTA GCAPGRILIS VLNPLISAST VNDDIVMMPW LTWENLELAE PG SLAKAAI GFDYPADAVD EKWTSRELPV TGSSFNLFRD TTIVLGASTN ISNLVLTNDD TGGDYQIVST TPTGSYVSAV TCP QGTYTI THDGVGATII SNFPILGAGE GPSFQISALR HGDKVTITED PTKINVSGVS FLTGTNSWKA SLKDSSGTLL GRLE YDGTS FSSDSPASLI PGKYNVELDP ADNSAVVTIV ANNSFGTASL DTH UniProtKB: Structural polyprotein |
-分子 #4: VP4 of Mud crab dicistrovirus
分子 | 名称: VP4 of Mud crab dicistrovirus / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mud crab virus (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 5.792425 KDa |
配列 | 文字列: GGDDATASQR GIVTQVADTV SSISNVVDGL GVPLLSSISK PIGWVSNVVS NVASIFGF UniProtKB: Structural polyprotein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.2 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 気圧: 101.325 kPa |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 80.0 K / 最高: 100.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 3 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 20.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 最大 デフォーカス(補正後): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 96000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-6iic: |