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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7292 | |||||||||
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タイトル | Drosophila Dicer-2 (apo, intact helicase density) | |||||||||
マップデータ | Drosophila Dicer-2 (intact helicase density) | |||||||||
試料 |
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生物種 | Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Shen PS / Sinha NK / Bass BL | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2018 タイトル: Dicer uses distinct modules for recognizing dsRNA termini. 著者: Niladri K Sinha / Janet Iwasa / Peter S Shen / Brenda L Bass / 要旨: Invertebrates rely on Dicer to cleave viral double-stranded RNA (dsRNA), and Dicer-2 distinguishes dsRNA substrates by their termini. Blunt termini promote processive cleavage, while 3' overhanging ...Invertebrates rely on Dicer to cleave viral double-stranded RNA (dsRNA), and Dicer-2 distinguishes dsRNA substrates by their termini. Blunt termini promote processive cleavage, while 3' overhanging termini are cleaved distributively. To understand this discrimination, we used cryo-electron microscopy to solve structures of Dicer-2 alone and in complex with blunt dsRNA. Whereas the Platform-PAZ domains have been considered the only Dicer domains that bind dsRNA termini, unexpectedly, we found that the helicase domain is required for binding blunt, but not 3' overhanging, termini. We further showed that blunt dsRNA is locally unwound and threaded through the helicase domain in an adenosine triphosphate-dependent manner. Our studies reveal a previously unrecognized mechanism for optimizing antiviral defense and set the stage for the discovery of helicase-dependent functions in other Dicers. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7292.map.gz | 8.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7292-v30.xml emd-7292.xml | 10.4 KB 10.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7292.png | 39.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7292 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7292 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7292_validation.pdf.gz | 77.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7292_full_validation.pdf.gz | 76.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7292_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7292 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7292 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7292.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Drosophila Dicer-2 (intact helicase density) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.193 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Drosophila Dicer-2 (apo)
全体 | 名称: Drosophila Dicer-2 (apo) |
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要素 |
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-超分子 #1: Drosophila Dicer-2 (apo)
超分子 | 名称: Drosophila Dicer-2 (apo) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
-分子 #1: Dicer-2
分子 | 名称: Dicer-2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: GPMEDVEIKP RGYQLRLVDH LTKSNGIVYL PTGSGKTFVA ILVLKRFSQD FDKPIESGGK RALFMCNTVE LARQQAMAVR RCTNFKVGFY VGEQGVDDWT RGMWSDEIKK NQVLVGTAQV FLDMVTQTYV ALSSLSVVII DECHHGTGHH PFREFMRLFT IANQTKLPRV ...文字列: GPMEDVEIKP RGYQLRLVDH LTKSNGIVYL PTGSGKTFVA ILVLKRFSQD FDKPIESGGK RALFMCNTVE LARQQAMAVR RCTNFKVGFY VGEQGVDDWT RGMWSDEIKK NQVLVGTAQV FLDMVTQTYV ALSSLSVVII DECHHGTGHH PFREFMRLFT IANQTKLPRV VGLTGVLIKG NEITNVATKL KELEITYRGN IITVSDTKEM ENVMLYATKP TEVMVSFPHQ EQVLTVTRLI SAEIEKFYVS LDLMNIGVQP IRRSKSLQCL RDPSKKSFVK QLFNDFLYQM KEYGIYAASI AIISLIVEFD IKRRQAETLS VKLMHRTALT LCEKIRHLLV QKLQDMTYDD DDDNVNTEEV IMNFSTPKVQ RFLMSLKVSF ADKDPKDICC LVFVERRYTC KCIYGLLLNY IQSTPELRNV LTPQFMVGRN NISPDFESVL ERKWQKSAIQ QFRDGNANLM ICSSVLEEGI DVQACNHVFI LDPVKTFNMY VQSKGRARTT EAKFVLFTAD KEREKTIQQI YQYRKAHNDI AEYLKDRVLE KTEPELYEIK GHFQDDIDPF TNENGAVLLP NNALAILHRY CQTIPTDAFG FVIPWFHVLQ EDERDRIFGV SAKGKHVISI NMPVNCMLRD TIYSDPMDNV KTAKISAAFK ACKVLYSLGE LNERFVPKTL KERVASIADV HFEHWNKYGD SVTATVNKAD KSKDRTYKTE CPLEFYDALP RVGEICYAYE IFLEPQFESC EYTEHMYLNL QTPRNYAILL RNKLPRLAEM PLFSNQGKLH VRVANAPLEV IIQNSEQLEL LHQFHGMVFR DILKIWHPFF VLDRRSKENS YLVVPLILGA GEQKCFDWEL MTNFRRLPQS HGSNVQQREQ QPAPRPEDFE GKIVTQWYAN YDKPMLVTKV HRELTPLSYM EKNQQDKTYY EFTMSKYGNR IGDVVHKDKF MIEVRDLTEQ LTFYVHNRGK FNAKSKAKMK VILIPELCFN FNFPGDLWLK LIFLPSILNR MYFLLHAEAL RKRFNTYLNL HLLPFNGTDY MPRPLEIDYS LKRNVDPLGN VIPTEDIEEP KSLLEPMPTK SIEASVANLE ITEFENPWQK YMEPVDLSRN LLSTYPVELD YYYHFSVGNV CEMNEMDFED KEYWAKNQFH MPTGNIYGNR TPAKTNANVP ALMPSKPTVR GKVKPLLILQ KTVSKEHITP AEQGEFLAAI TASSAADVFD MERLEILGAS FLKLSATLYL ASKYSDWNEG TLTEVKSKLV SNRNLLFCLI DADIPKTLNT IQFTPRYTWL PPGISLPHNV LALWRENPEF AKIIGPHNLR DLALGDEESL VKGNCSDINY NRFVEGCRAN GQSFYAGADF SSEVNFCVGL VTIPNKVIAD TLEALLGVIV KNYGLQHAFK MLEYFKICRA DIDKPLTQLL NLELGGKKMR ANVNTTEIDG FLINHYYLEK NLGYTFKDRR YLLQALTHPS YPTNRITGSY QELEFIGAAI LDFLISAYIF ENNTKMNPGA LTDLRSALVN NTTLACICVR HRLHFFILAE NAKLSEIISK FVNFQESQGH RVTNYVRILL EEADVQPTPL DLDDELDMTE LPHANKCISQ EAEKGVPPKG EFNMSTNVDV PKALGDVLEA LIAAVYLDCR DLQRTWEVIF NLFEPELQEF TRKVPINHIR QLVEHKHAKP VFSSPIVEGE TVMVSCQFTC MEKTIKVYGF GSNKDQAKLS AAKHALQQLS KCDA |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 1.2 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 8.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 9730 |
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初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |