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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6676 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of type II secretion system secretin GspD in Vibrio cholerae | |||||||||
マップデータ | VC_GspD post-processing map | |||||||||
試料 |
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キーワード | Secretin / C15 symmetry / T2SS / PROTEIN TRANSPORT | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein secretion by the type II secretion system / type II protein secretion system complex / protein secretion / cell outer membrane / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Vibrio cholerae O1 (コレラ菌) / Vibrio cholerae O1 biovar El Tor str. N16961 (コレラ菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.26 Å | |||||||||
データ登録者 | Yan Z / Yin M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2017 タイトル: Structural insights into the secretin translocation channel in the type II secretion system. 著者: Zhaofeng Yan / Meng Yin / Dandan Xu / Yongqun Zhu / Xueming Li / 要旨: The secretin GspD of the type II secretion system (T2SS) forms a channel across the outer membrane in Gram-negative bacteria to transport substrates from the periplasm to the extracellular milieu. ...The secretin GspD of the type II secretion system (T2SS) forms a channel across the outer membrane in Gram-negative bacteria to transport substrates from the periplasm to the extracellular milieu. The lack of an atomic-resolution structure of the GspD channel hinders the investigation of substrate translocation mechanism of T2SS. Here we report cryo-EM structures of two GspD channels (∼1 MDa), from Escherichia coli K12 and Vibrio cholerae, at ∼3 Å resolution. The structures reveal a pentadecameric channel architecture, wherein three rings of GspD N domains form the periplasmic channel. The secretin domain constitutes a novel double β-barrel channel, with at least 60 β-strands in each barrel, and is stabilized by S domains. The outer membrane channel is sealed by β-strand-enriched gates. On the basis of the partially open state captured, we proposed a detailed gate-opening mechanism. Our structures provide a structural basis for understanding the secretin superfamily and the mechanism of substrate translocation in T2SS. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6676.map.gz | 192.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6676-v30.xml emd-6676.xml | 11.9 KB 11.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_6676.png | 259.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-6676.cif.gz | 5.1 KB | ||
その他 | emd_6676_additional.map.gz | 183.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6676 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6676 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6676_validation.pdf.gz | 355.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6676_full_validation.pdf.gz | 354.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6676_validation.xml.gz | 7.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_6676_validation.cif.gz | 8.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6676 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6676 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6676.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 209.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | VC_GspD post-processing map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.32 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: VC GspD unpost-processing map
ファイル | emd_6676_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | VC_GspD unpost-processing map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Full length T2SS secretin GspD in Vibrio cholerae
全体 | 名称: Full length T2SS secretin GspD in Vibrio cholerae |
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要素 |
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-超分子 #1: Full length T2SS secretin GspD in Vibrio cholerae
超分子 | 名称: Full length T2SS secretin GspD in Vibrio cholerae / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio cholerae O1 (コレラ菌) |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-超分子 #2: Type II secretion system protein D
超分子 | 名称: Type II secretion system protein D / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: all |
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-分子 #1: Type II secretion system protein D
分子 | 名称: Type II secretion system protein D / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 15 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio cholerae O1 biovar El Tor str. N16961 (コレラ菌) 株: N16961 |
分子量 | 理論値: 70.863078 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
配列 | 文字列: NEFSASFKGT DIQEFINIVG RNLEKTIIVD PSVRGKVDVR SFDTLNEEQY YSFFLSVLEV YGFAVVEMDN GVLKVIKSKD AKTSAIPVL SGEERANGDE VITQVVAVKN VSVRELSPLL RQLIDNAGAG NVVHYDPANI ILITGRAAVV NRLAEIIRRV D QAGDKEIE ...文字列: NEFSASFKGT DIQEFINIVG RNLEKTIIVD PSVRGKVDVR SFDTLNEEQY YSFFLSVLEV YGFAVVEMDN GVLKVIKSKD AKTSAIPVL SGEERANGDE VITQVVAVKN VSVRELSPLL RQLIDNAGAG NVVHYDPANI ILITGRAAVV NRLAEIIRRV D QAGDKEIE VVELNNASAA EMVRIVEALN KTTDAQNTPE FLKPKFVADE RTNSILISGD PKVRERLKRL IKQLDVEMAA KG NNRVVYL KYAKAEDLVE VLKGVSENLQ AEKGTGQPTT SKRNEVMIAA HADTNSLVLT APQDIMNAML EVIGQLDIRR AQV LIEALI VEMAEGDGIN LGVQWGSLES GSVIQYGNTG ASIGNVMIGL EEAKDTTQTK AVYDTNNNFL RNETTTTKGD YTKL ASALS SIQGAAVSIA MGDWTALINA VSNDSSSNIL SSPSITVMDN GEASFIVGEE VPVITGSTAG SNNDNPFQTV DRKEV GIKL KVVPQINEGN SVQLNIEQEV SNVLGANGAV DVRFAKRQLN TSVMVQDGQM LVLGGLIDER ALESESKVPL LGDIPL LGQ LFRSTSSQVE KKNLMVFIKP TIIRDGVTAD GITQRKYNYI RAEQLFRAEK GLRLLDDASV PVLPKFGDDR RHSPEIQ AF IEQMEAKQ UniProtKB: Secretin GspD |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 1.6 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C15 (15回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.26 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 41579 |
初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |