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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6252 | |||||||||
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タイトル | VRC01 Fab in complex with BG505 SOSIP.664 Trimer | |||||||||
![]() | VRC01 Fab in complex with BG505 SOSIP.664 Trimer | |||||||||
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![]() | HIV-1 / Fab / Env trimer | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 22.0 Å | |||||||||
![]() | Torres JL / Ozorowski G / Derking R / Sanders RW / Ward AB | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Comprehensive antigenic map of a cleaved soluble HIV-1 envelope trimer. 著者: Ronald Derking / Gabriel Ozorowski / Kwinten Sliepen / Anila Yasmeen / Albert Cupo / Jonathan L Torres / Jean-Philippe Julien / Jeong Hyun Lee / Thijs van Montfort / Steven W de Taeye / Mark ...著者: Ronald Derking / Gabriel Ozorowski / Kwinten Sliepen / Anila Yasmeen / Albert Cupo / Jonathan L Torres / Jean-Philippe Julien / Jeong Hyun Lee / Thijs van Montfort / Steven W de Taeye / Mark Connors / Dennis R Burton / Ian A Wilson / Per-Johan Klasse / Andrew B Ward / John P Moore / Rogier W Sanders / ![]() ![]() ![]() 要旨: The trimeric envelope (Env) spike is the focus of vaccine design efforts aimed at generating broadly neutralizing antibodies (bNAbs) to protect against HIV-1 infection. Three recent developments have ...The trimeric envelope (Env) spike is the focus of vaccine design efforts aimed at generating broadly neutralizing antibodies (bNAbs) to protect against HIV-1 infection. Three recent developments have facilitated a thorough investigation of the antigenic structure of the Env trimer: 1) the isolation of many bNAbs against multiple different epitopes; 2) the generation of a soluble trimer mimic, BG505 SOSIP.664 gp140, that expresses most bNAb epitopes; 3) facile binding assays involving the oriented immobilization of tagged trimers. Using these tools, we generated an antigenic map of the trimer by antibody cross-competition. Our analysis delineates three well-defined epitope clusters (CD4 binding site, quaternary V1V2 and Asn332-centered oligomannose patch) and new epitopes at the gp120-gp41 interface. It also identifies the relationships among these clusters. In addition to epitope overlap, we defined three more ways in which antibodies can cross-compete: steric competition from binding to proximal but non-overlapping epitopes (e.g., PGT151 inhibition of 8ANC195 binding); allosteric inhibition (e.g., PGT145 inhibition of 1NC9, 8ANC195, PGT151 and CD4 binding); and competition by reorientation of glycans (e.g., PGT135 inhibition of CD4bs bNAbs, and CD4bs bNAb inhibition of 8ANC195). We further demonstrate that bNAb binding can be complex, often affecting several other areas of the trimer surface beyond the epitope. This extensive analysis of the antigenic structure and the epitope interrelationships of the Env trimer should aid in design of both bNAb-based therapies and vaccines intended to induce bNAbs. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
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-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 13.6 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 11.3 KB 11.3 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() ![]() | 12.7 KB 1.6 KB | ||
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-関連構造データ
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リンク
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マップ
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注釈 | VRC01 Fab in complex with BG505 SOSIP.664 Trimer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Fab of VRC01 human monoclonal antibody bound to HIV-1 Env gp140 B...
全体 | 名称: Fab of VRC01 human monoclonal antibody bound to HIV-1 Env gp140 BG505 SOSIP.664 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Fab of VRC01 human monoclonal antibody bound to HIV-1 Env gp140 B...
超分子 | 名称: Fab of VRC01 human monoclonal antibody bound to HIV-1 Env gp140 BG505 SOSIP.664 タイプ: sample / ID: 1000 詳細: Size-exclusion-chromatography-purified gp140 trimers were used. 集合状態: One Fab molecule binds to one BG505 SOSIP.664 gp140 monomer Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 570 KDa |
-分子 #1: Soluble HIV-1 Envelope glycoprotein
分子 | 名称: Soluble HIV-1 Envelope glycoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: SOSIP / コピー数: 1 / 集合状態: Trimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 株: BG505 / 別称: HIV-1 |
分子量 | 理論値: 420 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #2: Fab of VRC01 human monoclonal antibody
分子 | 名称: Fab of VRC01 human monoclonal antibody / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 3 / 集合状態: dimer (heavy chain + light chain) / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 50 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.01 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 150 mM NaCl |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: 3 uL of protein was applied and blotted; then 2% w/v uranyl formate was applied for 45 seconds. |
グリッド | 詳細: 400 Cu mesh grid with carbon support, plasma-cleaned |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 12 |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 52,000x magnification. |
日付 | 2014年10月27日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 実像数: 174 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 倍率(補正後): 52000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 52000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt angle min: -50 |
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画像解析
詳細 | The particles were selected using an automatic selection program. Class averages with 3 Fabs bound to one gp140 trimer were placed into a substack and used for 3D reconstruction. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 22.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, SPARX / 使用した粒子像数: 7861 |