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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6230 | |||||||||
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タイトル | AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold | |||||||||
マップデータ | AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold | |||||||||
試料 |
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キーワード | eukaryotic chaperonin | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 26.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Roh SH / Kasembeli M / Montoya JG / Trnka M / Lau WC / Burlingame A / Chiu W / Tweardy DJ | |||||||||
引用 | ジャーナル: Biophys J / 年: 2016 タイトル: Chaperonin TRiC/CCT Recognizes Fusion Oncoprotein AML1-ETO through Subunit-Specific Interactions. 著者: Soung-Hun Roh / Moses M Kasembeli / Jesús G Galaz-Montoya / Wah Chiu / David J Tweardy / 要旨: AML1-ETO is the translational product of a chimeric gene created by the stable chromosome translocation t (8;21)(q22;q22). It causes acute myeloid leukemia (AML) by dysregulating the expression of ...AML1-ETO is the translational product of a chimeric gene created by the stable chromosome translocation t (8;21)(q22;q22). It causes acute myeloid leukemia (AML) by dysregulating the expression of genes critical for myeloid cell development and differentiation and recently has been reported to bind multiple subunits of the mammalian cytosolic chaperonin TRiC (or CCT), primarily through its DNA binding domain (AML1-175). Through these interactions, TRiC plays an important role in the synthesis, folding, and activity of AML1-ETO. Using single-particle cryo-electron microscopy, we demonstrate here that a folding intermediate of AML1-ETO's DNA-binding domain (AML1-175) forms a stable complex with apo-TRiC. Our structure reveals that AML1-175 associates directly with a specific subset of TRiC subunits in the open conformation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6230.map.gz | 25.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6230-v30.xml emd-6230.xml | 9.5 KB 9.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6230.gif 80_6230.gif | 43.9 KB 4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6230 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6230 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6230_validation.pdf.gz | 78.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6230_full_validation.pdf.gz | 77.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6230_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6230 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6230 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6230.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 28.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.17 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold
全体 | 名称: AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold |
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要素 |
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-超分子 #1000: AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold
超分子 | 名称: AML1-175 + TRiC + Ni-nano-gold / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 16 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 1 MDa |
-分子 #1: TCP-1 Ring Complex
分子 | 名称: TCP-1 Ring Complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: TRiC, CCT 詳細: Ni-1.4 nanometer gold particles were applied to the AML1-175-TRiC complex. 集合状態: 16 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human / 細胞: HeLa |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-分子 #2: AML1-175
分子 | 名称: AML1-175 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: domain of AML1-ETO protein / 詳細: related to Acute Myeloid Leukemia / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 20 mM HEPES, pH 7.4, 5 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 2% glycerol, 1% PEG8000, 0.05% OG, 0.02% BSA, 2% MeOH, 60 mM imidazole |
グリッド | 詳細: 200 mesh Quantifoil holey carbon grid (1.2/1.3), acetone-washed and glow-discharged |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / 装置: LEICA EM GP / 手法: Blot for 10 seconds from copper side of grid. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2010F |
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日付 | 2013年11月24日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 2.17 µm / 実像数: 99 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 69124 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: particle-based |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 26.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, Relion1.2 / 使用した粒子像数: 8346 |