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万見
- EMDB-6154: Detailed Structural and biochemical characterization of the nexin... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6154
タイトルDetailed Structural and biochemical characterization of the nexin-dynein regulatory complex
マップデータWild-type N-DRC
試料
  • 試料: Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme
  • 細胞器官・細胞要素: axoneme
キーワードcilia and flagella / axoneme / dynein regulatory complex
生物種Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 45.0 Å
データ登録者Oda T / Yanagisawa H / Kikkawa M
引用ジャーナル: Mol Biol Cell / 年: 2015
タイトル: Detailed structural and biochemical characterization of the nexin-dynein regulatory complex.
著者: Toshiyuki Oda / Haruaki Yanagisawa / Masahide Kikkawa /
要旨: The nexin-dynein regulatory complex (N-DRC) forms a cross-bridge between the outer doublet microtubules of the axoneme and regulates dynein motor activity in cilia/flagella. Although the molecular ...The nexin-dynein regulatory complex (N-DRC) forms a cross-bridge between the outer doublet microtubules of the axoneme and regulates dynein motor activity in cilia/flagella. Although the molecular composition and the three-dimensional structure of N-DRC have been studied using mutant strains lacking N-DRC subunits, more accurate approaches are necessary to characterize the structure and function of N-DRC. In this study, we precisely localized DRC1, DRC2, and DRC4 using cryo-electron tomography and structural labeling. All three N-DRC subunits had elongated conformations and spanned the length of N-DRC. Furthermore, we purified N-DRC and characterized its microtubule-binding properties. Purified N-DRC bound to the microtubule and partially inhibited microtubule sliding driven by the outer dynein arms (ODAs). Of interest, microtubule sliding was observed even in the presence of fourfold molar excess of N-DRC relative to ODA. These results provide insights into the role of N-DRC in generating the beating motions of cilia/flagella.
履歴
登録2014年10月25日-
ヘッダ(付随情報) 公開2014年12月3日-
マップ公開2014年12月3日-
更新2016年5月25日-
現状2016年5月25日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 45.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 45.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

400_6154.gif

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6154.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Wild-type N-DRC
ボクセルのサイズX=Y=Z: 6.07 Å
密度
表面レベル登録者による: 45.299999999999997 / ムービー #1: 45.3
最小 - 最大-141.849517819999988 - 194.671997070000003
平均 (標準偏差)0.00270544 (±65.675430300000002)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ8011090
Spacing8011090
セルA: 667.7 Å / B: 485.6 Å / C: 546.3 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z6.076.076.07
M x/y/z1108090
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z667.700485.600546.300
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS1108090
D min/max/mean-141.850194.6720.003

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme

全体名称: Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme
要素
  • 試料: Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme
  • 細胞器官・細胞要素: axoneme

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超分子 #1000: Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme

超分子名称: Wild-type N-DRC structure from Chlamydomonas axoneme
タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1

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超分子 #1: axoneme

超分子名称: axoneme / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス)
Organelle: flagella

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

濃度0.01 mg/mL
緩衝液pH: 7.2
詳細: 30 mM Hepes-NaOH pH 7.2, 5 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol, 1 mM EGTA, 50 mM NaCl
グリッド詳細: 300 mesh copper grid, holey carbon
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 98 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: LEICA EM GP / 手法: Blot for 5 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡JEOL 3100FFC
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: Omega
エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV
エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV
日付2014年6月1日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k)
平均電子線量: 100 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.2 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 7.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 6.0 µm / 倍率（公称値）: 25700
試料ステージ試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -65 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 65 °

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画像解析

詳細Number of tilts (projections) used in 3D reconstruction: 65 Tomographic tilt angle increment: 2
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 45.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, PEET

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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