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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5548 | |||||||||
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タイトル | Signaling in Chemoreceptor Arrays Through Mobility Control of Kinase Domains - high kinase activity state - tsr mutant QEQE | |||||||||
マップデータ | Subvolume average of chemoreceptor wild-type tsr QEQE/CheA/CheW | |||||||||
試料 |
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キーワード | chemotaxis / E.coli / CheA | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 25.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Briegel A / Ames P / Gumbart JC / Oikonomou CM / Parkinson JS / Jensen GJ | |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Microbiol / 年: 2013 タイトル: The mobility of two kinase domains in the Escherichia coli chemoreceptor array varies with signalling state. 著者: Ariane Briegel / Peter Ames / James C Gumbart / Catherine M Oikonomou / John S Parkinson / Grant J Jensen / 要旨: Motile bacteria sense their physical and chemical environment through highly cooperative, ordered arrays of chemoreceptors. These signalling complexes phosphorylate a response regulator which in turn ...Motile bacteria sense their physical and chemical environment through highly cooperative, ordered arrays of chemoreceptors. These signalling complexes phosphorylate a response regulator which in turn governs flagellar motor reversals, driving cells towards favourable environments. The structural changes that translate chemoeffector binding into the appropriate kinase output are not known. Here, we apply high-resolution electron cryotomography to visualize mutant chemoreceptor signalling arrays in well-defined kinase activity states. The arrays were well ordered in all signalling states, with no discernible differences in receptor conformation at 2-3 nm resolution. Differences were observed, however, in a keel-like density that we identify here as CheA kinase domains P1 and P2, the phosphorylation site domain and the binding domain for response regulator target proteins. Mutant receptor arrays with high kinase activities all exhibited small keels and high proteolysis susceptibility, indicative of mobile P1 and P2 domains. In contrast, arrays in kinase-off signalling states exhibited a range of keel sizes. These findings confirm that chemoreceptor arrays do not undergo large structural changes during signalling, and suggest instead that kinase activity is modulated at least in part by changes in the mobility of key domains. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5548.map.gz | 631.6 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5548-v30.xml emd-5548.xml | 11.2 KB 11.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5548_1.jpg emd_5548_2.tif | 164.4 KB 172.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5548 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5548 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5548_validation.pdf.gz | 78.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5548_full_validation.pdf.gz | 77.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5548_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5548 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5548 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5548.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 825.2 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Subvolume average of chemoreceptor wild-type tsr QEQE/CheA/CheW | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 6.6 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : chemoreceptor array with mutant receptor tsr QEQE
全体 | 名称: chemoreceptor array with mutant receptor tsr QEQE |
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要素 |
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-超分子 #1000: chemoreceptor array with mutant receptor tsr QEQE
超分子 | 名称: chemoreceptor array with mutant receptor tsr QEQE / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 3 |
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-分子 #1: tsr QEQE
分子 | 名称: tsr QEQE / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #2: CheW
分子 | 名称: CheW / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #3: CheA
分子 | 名称: CheA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 集合状態: dimer / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
-試料調製
緩衝液 | 詳細: Tryptone Broth (10 g/L Tryptone, 5 g/L NaCl). Cells were incubated with penicillin for 1 hour prior to freezing. |
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グリッド | 詳細: R 2/2 copper/rhodium grids, glow discharged |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE MIXTURE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: FEI エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
日付 | 2012年10月1日 |
撮影 | 平均電子線量: 150 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.2 mm / 最小 デフォーカス(公称値): 10.0 µm / 倍率(公称値): 34000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: OTHER / Tilt series - Axis1 - Min angle: -62.4 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 63.8 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | CTF-corrected. Average number of tilts used in the 3D reconstructions: 128. Average tomographic tilt angle increment: 1. |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 25.0 Å / ソフトウェア - 名称: IMOD, tomo3D |
CTF補正 | 詳細: IMOD |