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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5476 | |||||||||
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タイトル | Structure of the vacuolar-type ATPase from Saccharomyces cerevisiae at 11 Angstrom resolution | |||||||||
![]() | 3D map of V-type ATPase | |||||||||
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![]() | membrane protein / proton pump / ATPase / vacuole / endosome / lysosome / plasma membrane / Golgi | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 11.0 Å | |||||||||
![]() | Benlekbir S / Bueler SA / Rubinstein JL | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structure of the vacuolar-type ATPase from Saccharomyces cerevisiae at 11-Å resolution. 著者: Samir Benlekbir / Stephanie A Bueler / John L Rubinstein / ![]() 要旨: Vacuolar-type ATPases (V-type ATPases) in eukaryotic cells are large membrane protein complexes that acidify various intracellular compartments. The enzymes are regulated by dissociation of the V(1) ...Vacuolar-type ATPases (V-type ATPases) in eukaryotic cells are large membrane protein complexes that acidify various intracellular compartments. The enzymes are regulated by dissociation of the V(1) and V(O) regions of the complex. Here we present the structure of the Saccharomyces cerevisiae V-type ATPase at 11-Å resolution by cryo-EM of protein particles in ice. The structure explains many cross-linking and protein interaction studies. Docking of crystal structures suggests that inhibition of ATPase activity by the dissociated V(1) region involves rearrangement of the N- and C-terminal domains of subunit H and also suggests how this inhibition is triggered upon dissociation. We provide support for this model by demonstrating that mutation of subunit H to increase the rigidity of the linker between its two domains decreases its ability to inhibit ATPase activity. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 31.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 50.3 KB 50.3 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 43.4 KB | ||
マスクデータ | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB 64 MB | ![]() | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 77.6 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 76.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 3D map of V-type ATPase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
+セグメンテーションマップ: A subunit 2
+セグメンテーションマップ: E subunit 3
+セグメンテーションマップ: G subunit 1
+セグメンテーションマップ: G subunit 2
+セグメンテーションマップ: G subunit 3
+セグメンテーションマップ: H subunit
+セグメンテーションマップ: a subunit
+セグメンテーションマップ: c-ring
+セグメンテーションマップ: d subunit
+セグメンテーションマップ: detergent/lipid plug
+セグメンテーションマップ: A subunit 1
+セグメンテーションマップ: A subunit 3
+セグメンテーションマップ: B subunit 1
+セグメンテーションマップ: B subunit 2
+セグメンテーションマップ: B subunit 3
+セグメンテーションマップ: C subunit
+セグメンテーションマップ: DF subcomplex
+セグメンテーションマップ: E subunit 1
+セグメンテーションマップ: E subunit 2
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試料の構成要素
-全体 : vacuolar-type ATPases
全体 | 名称: vacuolar-type ATPases |
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要素 |
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-超分子 #1000: vacuolar-type ATPases
超分子 | 名称: vacuolar-type ATPases / タイプ: sample / ID: 1000 集合状態: A3B3CDE3FG3HadcXc'Yc''Z complex where X, Y, and Z indicate unknown stoichiometry Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 900 KDa / 理論値: 900 KDa / 手法: Gel filtration |
-分子 #1: vacuolar-type ATPases
分子 | 名称: vacuolar-type ATPases / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: V-ATPase / 詳細: Detergent solubilized protein complex / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 実験値: 900 KDa / 理論値: 900 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 2.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 0.03% w/v dodecylmaltoside |
グリッド | 詳細: Quantifoil R2/2 glow discharged in air |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 手法: Blot for 20 seconds before freezing |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Manually corrected by inspecting FFT |
日付 | 2011年1月1日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 1000 / 平均電子線量: 12 e/Å2 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | particles selected manually with Ximdisp |
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CTF補正 | 詳細: Each particle |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 11.0 Å / 解像度の算出法: OTHER ソフトウェア - 名称: Search_Fspace, Refine_Fspace, Build_Fspace 使用した粒子像数: 34448 |