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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5357 | |||||||||
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タイトル | Expansion Intermediates of the Bacteriophage phi6 Procapsid | |||||||||
マップデータ | This is an expansion intermediate of the bacteriophage phi6 procapsid that was obtained by partial release of RNA from already packaged capsids. | |||||||||
試料 |
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キーワード | dsRNA virus / Cystoviridae / capsid / expansion intermediate / segmented genome | |||||||||
生物種 | Bacteriophage phi6 (ファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 20.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Nemecek D / Cheng N / Qiao J / Mindich L / Steven AC / Heymann JB | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2011 タイトル: Stepwise expansion of the bacteriophage ϕ6 procapsid: possible packaging intermediates. 著者: Daniel Nemecek / Naiqian Cheng / Jian Qiao / Leonard Mindich / Alasdair C Steven / J Bernard Heymann / 要旨: The initial assembly product of bacteriophage ϕ6, the procapsid, undergoes major structural transformation during the sequential packaging of its three segments of single-stranded RNA. The ...The initial assembly product of bacteriophage ϕ6, the procapsid, undergoes major structural transformation during the sequential packaging of its three segments of single-stranded RNA. The procapsid, a compact icosahedrally symmetric particle with deeply recessed vertices, expands to the spherical mature capsid, increasing the volume available to accommodate the genome by 2.5-fold. It has been proposed that expansion and packaging are linked, with each stage in expansion presenting a binding site for a particular RNA segment. To investigate procapsid transformability, we induced expansion by acidification, heating, and elevated salt concentration. Cryo-electron microscopy reconstructions after all three treatments yielded the same partially expanded particle. Analysis by cryo-electron tomography showed that all vertices of a given capsid were either in a compact or an expanded state, indicating a highly cooperative transition. To benchmark the mature capsid, we analyzed filled (in vivo packaged) capsids. When these particles were induced to release their RNA, they reverted to the same intermediate state as expanded procapsids (intermediate 1) or to a second, further expanded state (intermediate 2). This partial reversibility of expansion suggests that the mature spherical capsid conformation is obtained only when sufficient outward pressure is exerted by packaged RNA. The observation of two intermediates is consistent with the proposed three-step packaging process. The model is further supported by the observation that a mutant capable of packaging the second RNA segment without previously packaging the first segment has enhanced susceptibility for switching spontaneously from the procapsid to the first intermediate state. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5357.map.gz | 62 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5357-v30.xml emd-5357.xml | 10.4 KB 10.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_5357_fsc.xml | 4.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_5357_1.jpg | 58 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5357 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5357 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5357_validation.pdf.gz | 79.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5357_full_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5357_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5357 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5357 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5357.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 65.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is an expansion intermediate of the bacteriophage phi6 procapsid that was obtained by partial release of RNA from already packaged capsids. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.62792 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Expansion Intermediate 2 of the P1247 Procapsid of Bacteriophage phi6
全体 | 名称: Expansion Intermediate 2 of the P1247 Procapsid of Bacteriophage phi6 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Expansion Intermediate 2 of the P1247 Procapsid of Bacteriophage phi6
超分子 | 名称: Expansion Intermediate 2 of the P1247 Procapsid of Bacteriophage phi6 タイプ: sample / ID: 1000 集合状態: Icosahedral shell of P1 dimers with P2, P4 and P7 subunits Number unique components: 4 |
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分子量 | 理論値: 12.6 MDa |
-超分子 #1: Bacteriophage phi6
超分子 | 名称: Bacteriophage phi6 / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: Bacteriophage phi6 / 生物種: Bacteriophage phi6 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: OTHER / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: Bacteriophage phi6 |
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宿主 | 生物種: Pseudomonas syringae (バクテリア) / 別称: BACTERIA(EUBACTERIA) |
分子量 | 理論値: 12.6 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: P1 / 直径: 420 Å / T番号(三角分割数): 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 10 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 10 mM potassium phosphate, 1 mM MgCl2, 100 mM NaCl |
グリッド | 詳細: Quantifoil 2/2/400 mesh grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: LEICA KF80 / 詳細: Vitrification instrument: Reichert - Jung KF80 |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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温度 | 平均: 93 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 100,000 times magnification |
日付 | 2008年9月23日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM デジタル化 - スキャナー: NIKON SUPER COOLSCAN 9000 デジタル化 - サンプリング間隔: 6.35 µm / 実像数: 52 / 平均電子線量: 15 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 48327 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.7 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan 626 / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |