+
データを開く
-
基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | OCCM maturation intermediate stalled with an Arginine Finger mutation in Mcm2. Composite map. | |||||||||
マップデータ | composite map | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | AAA+ ATPase / DNA translocase / ATPase switch / DNA replication / REPLICATION | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / Assembly of the ORC complex at the origin of replication ...CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / replication fork protection complex / nuclear origin of replication recognition complex / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / Activation of the pre-replicative complex / mitotic DNA replication / CMG complex / nuclear pre-replicative complex / nucleosome organization / DNA replication preinitiation complex / Activation of ATR in response to replication stress / MCM complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / silent mating-type cassette heterochromatin formation / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / Orc1 removal from chromatin / nuclear replication fork / regulation of DNA replication / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / subtelomeric heterochromatin formation / nucleosome binding / DNA helicase activity / transcription elongation by RNA polymerase II / helicase activity / heterochromatin formation / single-stranded DNA binding / DNA helicase / DNA replication / chromosome, telomeric region / cell division / DNA damage response / chromatin binding / ATP hydrolysis activity / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / metal ion binding / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Butryn A / Costa A | |||||||||
| 資金援助 | European Union, 英国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025タイトル: Unidirectional MCM translocation away from ORC drives origin licensing. 著者: Agata Butryn / Julia F Greiwe / Alessandro Costa / ![]() 要旨: The MCM motor of the eukaryotic replicative helicase is loaded as a double hexamer onto DNA by the Origin Recognition Complex (ORC), Cdc6, and Cdt1. ATP binding supports formation of the ORC-Cdc6- ...The MCM motor of the eukaryotic replicative helicase is loaded as a double hexamer onto DNA by the Origin Recognition Complex (ORC), Cdc6, and Cdt1. ATP binding supports formation of the ORC-Cdc6-Cdt1-MCM (OCCM) helicase-recruitment complex where ORC-Cdc6 and one MCM hexamer form two juxtaposed rings around duplex DNA. ATP hydrolysis by MCM completes MCM loading but the mechanism is unknown. Here, we used cryo-EM to characterise helicase loading with ATPase-dead Arginine Finger variants of the six MCM subunits. We report the structure of two MCM complexes with different DNA grips, stalled as they mature to loaded MCM. The Mcm2 Arginine Finger-variant stabilises DNA binding by Mcm2 away from ORC/Cdc6. The Arginine Finger-variant of the neighbouring Mcm5 subunit stabilises DNA engagement by Mcm5 downstream of the Mcm2 binding site. Cdc6 and Orc1 progressively disengage from ORC as MCM translocates along DNA. We observe that duplex DNA translocation by MCM involves a set of leading-strand contacts by the pre-sensor 1 ATPase hairpins and lagging-strand contacts by the helix-2-insert hairpins. Mutating any of the MCM residues involved impairs high-salt resistant DNA binding in vitro and double-hexamer formation assessed by electron microscopy. Thus, ATPase-powered duplex DNA translocation away from ORC underlies MCM loading. | |||||||||
| 履歴 |
|
-
構造の表示
| 添付画像 |
|---|
-
ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_51407.map.gz | 162.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-51407-v30.xml emd-51407.xml | 37.5 KB 37.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_51407.png | 97.2 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-51407.cif.gz | 12.9 KB | ||
| その他 | emd_51407_additional_1.map.gz | 207.1 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51407 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51407 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_51407_validation.pdf.gz | 503.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_51407_full_validation.pdf.gz | 502.9 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_51407_validation.xml.gz | 7.4 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_51407_validation.cif.gz | 8.6 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51407 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51407 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 9gjwMC ![]() 9gjpC ![]() 9gm5C C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
-
マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_51407.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 325 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | composite map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.95 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-追加マップ: composite map density-modified with EMReady
| ファイル | emd_51407_additional_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | composite map density-modified with EMReady | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-
試料の構成要素
+全体 : ORC-Cdt1-MCM complex
+超分子 #1: ORC-Cdt1-MCM complex
+分子 #1: DNA replication licensing factor MCM2
+分子 #2: DNA replication licensing factor MCM3
+分子 #3: DNA replication licensing factor MCM4
+分子 #4: Minichromosome maintenance protein 5
+分子 #5: DNA replication licensing factor MCM6
+分子 #6: DNA replication licensing factor MCM7
+分子 #7: Cell division cycle protein CDT1
+分子 #8: Origin recognition complex subunit 1
+分子 #9: Origin recognition complex subunit 2
+分子 #10: Origin recognition complex subunit 3
+分子 #11: Origin recognition complex subunit 4
+分子 #12: Origin recognition complex subunit 5
+分子 #13: Origin recognition complex subunit 6
+分子 #14: DNA (42-MER)
+分子 #15: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #16: ZINC ION
+分子 #17: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.6 |
|---|---|
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 30.34 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.7 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-
画像解析
| 初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
|---|---|
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 178450 |
| 初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
| 最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
データ登録者
英国, 2件
引用















Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)






























FIELD EMISSION GUN
