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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Augmin/V junction(open) | |||||||||
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![]() | Augmin complex / PLANT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() megagametogenesis / microgametogenesis / cytokinesis by cell plate formation / phragmoplast microtubule organization / HAUS complex / phragmoplast / microtubule minus-end binding / microtubule organizing center organization / microtubule nucleation / spindle assembly ...megagametogenesis / microgametogenesis / cytokinesis by cell plate formation / phragmoplast microtubule organization / HAUS complex / phragmoplast / microtubule minus-end binding / microtubule organizing center organization / microtubule nucleation / spindle assembly / spindle microtubule / microtubule cytoskeleton organization / spindle / mitotic cell cycle / microtubule / cell division / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.6 Å | |||||||||
![]() | Ashaduzzaman M / Al-Bassam J / Taheri A | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structures of the Plant Augmin reveal its intertwined coiled-coil assembly, antiparallel dimerization and NEDD1 binding mechanisms. 著者: Md Ashaduzzaman / Aryan Taheri / Yuh-Ru Julie Lee / Yuqi Tang / Fei Guo / Stephen D Fried / Bo Liu / Jawdat Al-Bassam / ![]() 要旨: Microtubule (MT) branch nucleation is fundamental for building parallel MT networks in eukaryotic cells. In plants and metazoans, MT branch nucleation requires Augmin and NEDD1 proteins which bind ...Microtubule (MT) branch nucleation is fundamental for building parallel MT networks in eukaryotic cells. In plants and metazoans, MT branch nucleation requires Augmin and NEDD1 proteins which bind along MTs and then recruit and activate the gamma-tubulin ring complex (γ-TuRC). Augmin is a fork-shaped assembly composed of eight coiled-coil subunits, while NEDD1 is a WD40 β-propellor protein that bridges across MTs, Augmin, and γ-TuRC during MT branch nucleation. Here, we reconstitute hetero-tetrameric and hetero-octameric Arabidopsis thaliana Augmin assemblies, resolve their subunit interactions using crosslinking mass spectrometry and determine 3.7 to 7.3-Å cryo-EM structures for the V-junction and extended regions of Augmin. These structures allowed us to generate a complete de novo plant Augmin model that reveals the long-range multi coiled-coil interfaces that stabilize its 40-nm hetero-octameric fork-shaped organization. We discovered the dual calponin homology (CH) domain forming its MT binding site at the end of its V-junction undertake open and closed conformations. We determined a 12-Å dimeric Augmin cryo-EM structure revealing Augmin undergoes anti-parallel dimerization through two conserved surfaces along Augmin's extended region. We reconstituted the NEDD1 WD40 β-propellor with Augmin revealing it directly binds on top its V-junction and enhances Augmin dimerization. Our studies suggest that cooperativity between the Augmin dual CH domains and NEDD1 WD40 binding site may regulate Augmin V-junction dual binding to MT lattices. This unique V-shaped dual binding and organization anchors Augmins along MTs generating a platform to recruit γ-TuRC and activate branched MT nucleation. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 27.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 21.2 KB 21.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 7.5 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 29.1 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 7.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 28.3 MB 28.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 591 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 590.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 13.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 18 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.76 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_49224_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_49224_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : AUGMIN, V-junction(open)
全体 | 名称: AUGMIN, V-junction(open) |
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要素 |
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-超分子 #1: AUGMIN, V-junction(open)
超分子 | 名称: AUGMIN, V-junction(open) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 400 KDa |
-分子 #1: AUGMIN subunit 2
分子 | 名称: AUGMIN subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 33.057941 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSMGGDTTWV GKKPIRRIGG LSDALSIASD LGFAVAPPPS QEELQSFASS NGERGDDLIR VLRELSVVQR KIADLQVELQ GRKDDKNVA HLTHVGEMQK KIETLSRITQ ILKDVIQNKD RIIARLQQPY SLDCIPVEAE YQKQFSELLM KAASDYGALT A SVSDFQWS ...文字列: MSMGGDTTWV GKKPIRRIGG LSDALSIASD LGFAVAPPPS QEELQSFASS NGERGDDLIR VLRELSVVQR KIADLQVELQ GRKDDKNVA HLTHVGEMQK KIETLSRITQ ILKDVIQNKD RIIARLQQPY SLDCIPVEAE YQKQFSELLM KAASDYGALT A SVSDFQWS QNFKEPPSVW GEMLRPIPVA LASCTRFFEA MSAMRESFAT LQELRVGNSA VSLPTTPGGN EMTHRDSDCV TP PQGRIES SFDDLAVHKT RRQNNDQNEE EEEEEEEEDG NNNGNRRLSW PPSVKKSSV UniProtKB: AUGMIN subunit 2 |
-分子 #2: AUGMIN subunit 3
分子 | 名称: AUGMIN subunit 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 69.809453 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSSARLCSLV AELGYEGAGK LDPDSFEWPF QYDDARPILD WICSSLRPSN VLSLAELSLY EQFQRDGKLL EGDDLDQAYD SISAFSSRR NNQEAVFGAE ESIKEVRDAT LAHKAEALEL QRQLRRLQTQ YDLLTGQSSA LIQGRRARVA ATSAVSGQIT A IEDSLSAR ...文字列: MSSARLCSLV AELGYEGAGK LDPDSFEWPF QYDDARPILD WICSSLRPSN VLSLAELSLY EQFQRDGKLL EGDDLDQAYD SISAFSSRR NNQEAVFGAE ESIKEVRDAT LAHKAEALEL QRQLRRLQTQ YDLLTGQSSA LIQGRRARVA ATSAVSGQIT A IEDSLSAR NLQMNGVLGR LASTSQELAH YHSGEEDGIY LAYSDFHAYL AGDSACTKEL NQWFAKQLDT GPYRLVAEEG KS KCSWVSL DDTSNMLRDL EKSQHQRVAE LQRLRSIFGT SERQWIEAQV ENAKQQAILL TLKSQVTSVE AHIHFDLHSL RRK HADLVE EISTLYQKEE KLLSETIPEL CWELAQLQDT YILQGDYDLK VMRQELYISK QKVFINHLVN QLARHQFLKL ACQL EKKNM LGAFSLLKVI ESELQGYLSA TRSRVGRCSA LIQAASDVQE QGAVDDRDSF LHGVRDLLSI HSNTQAGLST YVSAP AIIQ QIVALQSDLS SLQSDLENSL PDDRNRCINE LCTHIQNLQQ LLFASSTTAQ PILTPWPLMK ELDEMGKINS KLSTAV EEV TLEHRNKREI VKHHAKDVEL QRRVFVDFFC NPERLRNQVR ELNALVRARQ ASSS UniProtKB: AUGMIN subunit 3 |
-分子 #3: AUGMIN subunit 5
分子 | 名称: AUGMIN subunit 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 84.325758 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MQSLSSSAPT PEAILEWLQK EMGYRQLGPY NGSSKSHVPS IDAIRKICRG NMIPIWNFLI NRVKSEKTVE RIRRNITVHG GSSNASIGS SVNPGKEESK SKGRRKDKTV TGESSSYAED REAALQEREL AAKEVERLRN IVRRQRKDLK ARMLEVSREE A ERKRMLDE ...文字列: MQSLSSSAPT PEAILEWLQK EMGYRQLGPY NGSSKSHVPS IDAIRKICRG NMIPIWNFLI NRVKSEKTVE RIRRNITVHG GSSNASIGS SVNPGKEESK SKGRRKDKTV TGESSSYAED REAALQEREL AAKEVERLRN IVRRQRKDLK ARMLEVSREE A ERKRMLDE RANYRHKQAL LEAYDQQCDE ATRIFAEYHK RLQVYVNQAN DAQRSVNSSN EVLSSLSANS EREAVYSTVK GT KSADDVI LMETTRERNI RIVCDLLASR MIERIRNSFP AYEGNGICSL PELETAKLGF EYDGEITDEM KTVIVNSLRG PPL LLQAIA AYTLRIKTLI SREMEKIDVR ADAEMLRYKF ENNRVTDNSS SDVSSPSNNQ LLERQKAHVQ QFLATEDALN KAAE ARDLC HKFINRLHGS ADTATHSFVG GTTQSGSNLR QFELDVWGKE REAAGLRASL NTLLSEIQRL NKLCAERKEA EDSLK KKWK KIEEFDARRS ELETIYTTLL KANMDAVAFW NQQPLAAREY ASATVIPASE VVVDISNSAK DFIEKEVSAF FQSPDN SLY MLPATPQGLA RDPSAIPSIC RISAALQYPA GLEGSDASLA SVLESLEFCL RVRGSEACVL EDLAKAIDLV HIRQDLV ES GHSLLDHAFR AQQKYERTTN YCLDLASEQE NTISDQWLPE LRTAVQNAQA SSEHCKYVRG LLDEWWEQPA STVVDWVT V DGQSVAAWQN HVKQLLAFYD KESLRT UniProtKB: AUGMIN subunit 5 |
-分子 #4: AUGMIN subunit 6
分子 | 名称: AUGMIN subunit 6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 43.303605 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MTMDREKERE LELESAMYTN CLLLGLDPNV IGLGASNGTP RVGLFRHSNP KLGEQLLYFI LSSLRGPAQS SKDFDKVWPI FDSAQSRDF RKVVQAIISE LESQGALPRS NSRVSSLATC CGPRFVELLW QLSLHALREV HRRTFPADVA SNPLPSSLTD V SFSHAATL ...文字列: MTMDREKERE LELESAMYTN CLLLGLDPNV IGLGASNGTP RVGLFRHSNP KLGEQLLYFI LSSLRGPAQS SKDFDKVWPI FDSAQSRDF RKVVQAIISE LESQGALPRS NSRVSSLATC CGPRFVELLW QLSLHALREV HRRTFPADVA SNPLPSSLTD V SFSHAATL LPVTKARIVL ERRRFLKNAE TAVQRQAMWS NLAHEMTAEF RGLCAEEAYL QQELEKLNDL RNKVKQEGEV WD DLVSSSS QNSHLVSKAT RLWDSIMARK GQHEVLASGP IEDLIAHREH RYRISGSALL AAMDQSSQVP RAELLSAHSD DSA SLADDK ELSDGSYTNM HDHSLVDSFE TASSQASDET LSRVDDRGGK INQTVDVAEV IRRWTHALQR I UniProtKB: AUGMIN subunit 6 |
-分子 #5: AUGMIN subunit 7
分子 | 名称: AUGMIN subunit 7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 37.046961 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MAAKQMEEIQ KKLRLLSYPR ANAPAQSLLF AGMERYALLE WLFFKLLGDK SPFSQQNLQG DAGVRDEETV RIQYLAEIAK FLGITPTVD IEAIQGHGTY EDRMEMLRNI VDLVEASLFS DNQEWSIDEQ VAKDIQLIDA IAERQSLIFS EECKLFPADV Q IQSIYPLP ...文字列: MAAKQMEEIQ KKLRLLSYPR ANAPAQSLLF AGMERYALLE WLFFKLLGDK SPFSQQNLQG DAGVRDEETV RIQYLAEIAK FLGITPTVD IEAIQGHGTY EDRMEMLRNI VDLVEASLFS DNQEWSIDEQ VAKDIQLIDA IAERQSLIFS EECKLFPADV Q IQSIYPLP DVSELETKLS EQAKILSNLQ QKVDDLAAKH AYNPDEEYTE VESQLRARLE SFLETARAFN TIYTKEIRPW TH MMEVPQL HGFGPAANRL LEAYNMLLKF LGNLKNLRDS HAALSIGSSG TVAGEPSSVT RIVSDCEAAL TVLNRDLGIL SAS IAREQG ERL UniProtKB: AUGMIN subunit 7 |
-分子 #6: AUGMIN subunit 8
分子 | 名称: AUGMIN subunit 8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 31.372709 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MKSSEDQVDP RLIDGKGSGR PSTPPSRGIS PSRIRQTTTS TQSSTTTSVL SFITDVKKGK KASYIEDVHQ LRLLHNRYLQ WRFAIARAE SVMYIQRLTS EETLFNVWHA ISELQDHVTR QRIGLQQLKL EIKLNSLLND QMVSLEDWAT LERDHVSSLV G AISDLEAN ...文字列: MKSSEDQVDP RLIDGKGSGR PSTPPSRGIS PSRIRQTTTS TQSSTTTSVL SFITDVKKGK KASYIEDVHQ LRLLHNRYLQ WRFAIARAE SVMYIQRLTS EETLFNVWHA ISELQDHVTR QRIGLQQLKL EIKLNSLLND QMVSLEDWAT LERDHVSSLV G AISDLEAN TLRLPATGGT KADTESLKAA MSSALDVMQA MGSSIWSLLS KVEEMNIMVT ELAVVVTKES SMQGKCEDLL AS TAIMQIE ECSLRTHLIQ TRREEGEDAE TPPPLLPLSK FPWP UniProtKB: AUGMIN subunit 8 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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ソフトウェア | 名称: SerialEM |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |