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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM Structure of Human Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in Complex with Fc-MFSD6(L3) | |||||||||
![]() | Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc | |||||||||
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![]() | Virus / Glycan / MFSD6 / Receptor | |||||||||
機能・相同性 | ![]() symbiont-mediated suppression of cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / protein sequestering activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane ...symbiont-mediated suppression of cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / protein sequestering activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / nucleoside-triphosphate phosphatase / channel activity / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / monoatomic ion transmembrane transport / symbiont-mediated suppression of host NF-kappaB cascade / RNA helicase activity / symbiont-mediated suppression of host innate immune response / endocytosis involved in viral entry into host cell / symbiont-mediated activation of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / cysteine-type endopeptidase activity / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / virion attachment to host cell / host cell nucleus / structural molecule activity / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.1 Å | |||||||||
![]() | Xu L / Pintilie G / Varanese L / Carette JE / Chiu W | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: MFSD6 is an entry receptor for enterovirus D68. 著者: Lauren Varanese / Lily Xu / Christine E Peters / Grigore Pintilie / David S Roberts / Suyash Raj / Mengying Liu / Yaw Shin Ooi / Jonathan Diep / Wenjie Qiao / Christopher M Richards / Jeremy ...著者: Lauren Varanese / Lily Xu / Christine E Peters / Grigore Pintilie / David S Roberts / Suyash Raj / Mengying Liu / Yaw Shin Ooi / Jonathan Diep / Wenjie Qiao / Christopher M Richards / Jeremy Callaway / Carolyn R Bertozzi / Sabrina Jabs / Erik de Vries / Frank J M van Kuppeveld / Claude M Nagamine / Wah Chiu / Jan E Carette / ![]() ![]() ![]() ![]() 要旨: With the near eradication of poliovirus due to global vaccination campaigns, attention has shifted to other enteroviruses that can cause polio-like paralysis syndrome (now termed acute flaccid ...With the near eradication of poliovirus due to global vaccination campaigns, attention has shifted to other enteroviruses that can cause polio-like paralysis syndrome (now termed acute flaccid myelitis). In particular, enterovirus D68 (EV-D68) is believed to be the main driver of epidemic outbreaks of acute flaccid myelitis in recent years, yet not much is known about EV-D68 host interactions. EV-D68 is a respiratory virus but, in rare cases, can spread to the central nervous system to cause severe neuropathogenesis. Here we use genome-scale CRISPR screens to identify the poorly characterized multipass membrane transporter MFSD6 as a host entry factor for EV-D68. Knockout of MFSD6 expression abrogated EV-D68 infection in cell lines and primary cells corresponding to respiratory and neural cells. MFSD6 localized to the plasma membrane and was required for viral entry into host cells. MFSD6 bound directly to EV-D68 particles through its extracellular, third loop (L3). We determined the cryo-electron microscopy structure of EV-D68 in a complex with MFSD6 L3, revealing the interaction interface. A decoy receptor, engineered by fusing MFSD6 L3 to Fc, blocked EV-D68 infection of human primary lung epithelial cells and provided near-complete protection in a lethal mouse model of EV-D68 infection. Collectively, our results reveal MFSD6 as an entry receptor for EV-D68, and support the targeting of MFSD6 as a potential mechanism to combat infections by this emerging pathogen with pandemic potential. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 856.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 35.9 KB 35.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 23.6 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 250.8 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 8.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 1.3 GB 1.3 GB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 34.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 45.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9mxcMC ![]() 9mwzC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.743 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc half...
ファイル | emd_48713_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc half...
ファイル | emd_48713_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Enterovirus D68 USA/IL/14-18952 in complex with MFSD6(L3)-Fc half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : enterovirus D68
+超分子 #1: enterovirus D68
+超分子 #2: MFSD6(L3)-Fc residues 200-208 with N-linked glycosylation site at N207
+超分子 #3: Enterovirus D68
+分子 #1: viral protein 1
+分子 #2: viral protein 2
+分子 #3: viral protein 3
+分子 #4: viral protein 4
+分子 #5: Major facilitator superfamily domain-containing protein 6
+分子 #7: SODIUM ION
+分子 #8: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製 #1
Preparation ID | 1 | ||||||||||||
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濃度 | 0.089 mg/mL | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 120 mM NaCl, and 1 mM EDTA (pH 8.0) | ||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - Film type ID: 1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 支持フィルム - Film thickness: 3 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: Freezing carried out with 4 s blot time, 1 s wait time.. |
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試料調製 #2
Preparation ID | 2 | ||||||||||||
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濃度 | 0.505 mg/mL | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 120 mM NaCl, and 1 mM EDTA (pH 8.0) | ||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - Film type ID: 1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 支持フィルム - Film thickness: 3 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: Freezing carried out with 4 s blot time, 1 s wait time.. |
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試料調製 #3
Preparation ID | 3 | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 120 mM NaCl, and 1 mM EDTA (pH 8.0) | ||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - Film type ID: 1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 支持フィルム - Film thickness: 3 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: Freezing carried out with 4 s blot time, 1 s wait time.. | ||||||||||||
詳細 | Purified virus samples with ligand, MFSD6(L3)-Fc generated from HEK293T GALE/GALK2 KO, were incubated in molar excess for 1 hr at 34C before freezing. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris / エネルギーフィルター - スリット幅: 15 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11869 / 平均露光時間: 3.28 sec. / 平均電子線量: 49.99 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: DARK FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 165000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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詳細 | Initial rigid fitting was done using Chimera and then ISOLDE was used for flexible fitting. |
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-9mxc: |