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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4728 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of a poly(A) RNP bound to the Pan2-Pan3 deadenylase | |||||||||
マップデータ | in publication (see figure S4): Map1, "full/complete map" | |||||||||
試料 |
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キーワード | poly(A)-tail / mRNA / RNP / PABP / Pab1 / Pan2-Pan3 / Ccr4-Not / deadenylase / RRM / cryoEM / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / ribonuclease inhibitor activity / PAN complex / Deadenylation of mRNA / poly(A)-specific ribonuclease / poly(A)-specific ribonuclease activity / nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / poly(A) binding / mRNA 3'-end processing / poly(U) RNA binding ...regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / ribonuclease inhibitor activity / PAN complex / Deadenylation of mRNA / poly(A)-specific ribonuclease / poly(A)-specific ribonuclease activity / nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / poly(A) binding / mRNA 3'-end processing / poly(U) RNA binding / postreplication repair / regulation of translational initiation / intracellular membraneless organelle / mRNA transport / mRNA 3'-UTR binding / promoter-specific chromatin binding / molecular condensate scaffold activity / P-body / cytoplasmic stress granule / mRNA processing / nucleic acid binding / protein kinase activity / ribosome / ribonucleoprotein complex / DNA repair / mRNA binding / RNA binding / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Schaefer IB / Conti E | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2019 タイトル: Molecular Basis for poly(A) RNP Architecture and Recognition by the Pan2-Pan3 Deadenylase. 著者: Ingmar B Schäfer / Masami Yamashita / Jan Michael Schuller / Steffen Schüssler / Peter Reichelt / Mike Strauss / Elena Conti / 要旨: The stability of eukaryotic mRNAs is dependent on a ribonucleoprotein (RNP) complex of poly(A)-binding proteins (PABPC1/Pab1) organized on the poly(A) tail. This poly(A) RNP not only protects mRNAs ...The stability of eukaryotic mRNAs is dependent on a ribonucleoprotein (RNP) complex of poly(A)-binding proteins (PABPC1/Pab1) organized on the poly(A) tail. This poly(A) RNP not only protects mRNAs from premature degradation but also stimulates the Pan2-Pan3 deadenylase complex to catalyze the first step of poly(A) tail shortening. We reconstituted this process in vitro using recombinant proteins and show that Pan2-Pan3 associates with and degrades poly(A) RNPs containing two or more Pab1 molecules. The cryo-EM structure of Pan2-Pan3 in complex with a poly(A) RNP composed of 90 adenosines and three Pab1 protomers shows how the oligomerization interfaces of Pab1 are recognized by conserved features of the deadenylase and thread the poly(A) RNA substrate into the nuclease active site. The structure reveals the basis for the periodic repeating architecture at the 3' end of cytoplasmic mRNAs. This illustrates mechanistically how RNA-bound Pab1 oligomers act as rulers for poly(A) tail length over the mRNAs' lifetime. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4728.map.gz | 84.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4728-v30.xml emd-4728.xml | 29.3 KB 29.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_4728.png | 159.7 KB | ||
マスクデータ | emd_4728_msk_1.map | 91.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-4728.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_4728_additional_1.map.gz emd_4728_additional_2.map.gz emd_4728_half_map_1.map.gz emd_4728_half_map_2.map.gz | 61.5 MB 7.1 MB 71.3 MB 71.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4728 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4728 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4728_validation.pdf.gz | 436.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4728_full_validation.pdf.gz | 435.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4728_validation.xml.gz | 11.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4728 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4728 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4728.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | in publication (see figure S4): Map1, "full/complete map" | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.056 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_4728_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: in publication (see figure S4): Map3, "map focused...
ファイル | emd_4728_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | in publication (see figure S4): Map3, "map focused on RNase/RRM1 - RRM2 interaction" | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: in publication (see figure S4): Map2, "map focused...
ファイル | emd_4728_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | in publication (see figure S4): Map2, "map focused on recognition of Pab1 - Pab1 oligomerisation" | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: independent halfmap 1 used for postprocessing of Map1
ファイル | emd_4728_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | independent halfmap_1 used for postprocessing of Map1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: independent halfmap 2 used for postprocessing of Map1
ファイル | emd_4728_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | independent halfmap_2 used for postprocessing of Map1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Ternary Complex of Pan2-Pan3, Pab1 and poly(A) RNA
+超分子 #1: Ternary Complex of Pan2-Pan3, Pab1 and poly(A) RNA
+超分子 #2: Pan2-Pan3
+超分子 #3: Polyadenylate-binding protein, cytoplasmic and nuclear
+超分子 #4: RNA
+分子 #1: PAN2-PAN3 deadenylation complex catalytic subunit PAN2
+分子 #2: Polyadenylate-binding protein, cytoplasmic and nuclear
+分子 #4: PAN2-PAN3 deadenylation complex subunit PAN3
+分子 #5: PAN2-PAN3 deadenylation complex subunit PAN3
+分子 #3: poly(A) RNA
+分子 #6: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 40 sec. / 前処理 - 気圧: 0.022 kPa |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-40 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6463 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 51.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 温度因子: 45.7 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
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得られたモデル | PDB-6r5k: |