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万見
- EMDB-45108: Local refinement map of mink RyR3 in closed conformation using ma... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-45108
タイトルLocal refinement map of mink RyR3 in closed conformation using mask 2 (Jsol/Csol/Bsol)
マップデータauto-sharpened map with B-factor=74.2
試料
  • 複合体: mink RyR3 + FKBP12.6
キーワードRyR3 / Ryanodine Receptor / calcium channel / ion channel / MEMBRANE PROTEIN
生物種Neogale vison (哺乳類)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.71 Å
データ登録者Chen YS / Van Petegem F
資金援助 カナダ, 3件
OrganizationGrant number国
Canadian Institutes of Health Research (CIHR)PJT-159601 カナダ
Fonds de Recherche du Quebec - Sante (FRQS)BF7-310936 カナダ
Other governmentRT-2023-3133
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Cryo-EM investigation of ryanodine receptor type 3.
著者: Yu Seby Chen / Maricela Garcia-Castañeda / Maria Charalambous / Daniela Rossi / Vincenzo Sorrentino / Filip Van Petegem /
要旨: Ryanodine Receptor isoform 3 (RyR3) is a large ion channel found in the endoplasmic reticulum membrane of many different cell types. Within the hippocampal region of the brain, it is found in ...Ryanodine Receptor isoform 3 (RyR3) is a large ion channel found in the endoplasmic reticulum membrane of many different cell types. Within the hippocampal region of the brain, it is found in dendritic spines and regulates synaptic plasticity. It controls myogenic tone in arteries and is upregulated in skeletal muscle in early development. RyR3 has a unique functional profile with a very high sensitivity to activating ligands, enabling high gain in Ca-induced Ca release. Here we solve high-resolution cryo-EM structures of RyR3 in non-activating and activating conditions, revealing structural transitions that occur during channel opening. Addition of activating ligands yields only open channels, indicating an intrinsically high open probability under these conditions. RyR3 has reduced binding affinity to the auxiliary protein FKBP12.6 due to several sequence variations in the binding interface. We map disease-associated sequence variants and binding sites for known pharmacological agents. The N-terminal region contains ligand binding sites for a putative chloride anion and ATP, both of which are targeted by sequence variants linked to epileptic encephalopathy.
履歴
登録2024年5月29日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年10月16日-
マップ公開2024年10月16日-
更新2024年10月16日-
現状2024年10月16日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_45108.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_45108.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈auto-sharpened map with B-factor=74.2
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.94 Å/pix.
x 512 pix.
= 478.72 Å		0.94 Å/pix.
x 512 pix.
= 478.72 Å		0.94 Å/pix.
x 512 pix.
= 478.72 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.935 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.0768
最小 - 最大-0.4597751 - 0.7211116
平均 (標準偏差)0.0005542269 (±0.012392798)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ512512512
Spacing512512512
セルA=B=C: 478.72 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_45108_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: unsharpened raw map

ファイルemd_45108_additional_1.map
注釈unsharpened raw map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half-map 2

ファイルemd_45108_half_map_1.map
注釈half-map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half-map 1

ファイルemd_45108_half_map_2.map
注釈half-map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : mink RyR3 + FKBP12.6

全体名称: mink RyR3 + FKBP12.6
要素
  • 複合体: mink RyR3 + FKBP12.6

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超分子 #1: mink RyR3 + FKBP12.6

超分子名称: mink RyR3 + FKBP12.6 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2
由来(天然)生物種: Neogale vison (哺乳類)
分子量理論値: 2.25 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度5 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
詳細: 20 mM HEPES pH 7.5, 250 mM NaCl, 2 mM DTT, 0.02% GDN, 5 mM EGTA, 1:1000 diluted protease inhibitor cocktail
グリッドモデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.038 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細: blotted for 3 s (blot force of 7 to 10) using ashless blotting paper (Whatman).

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 10545 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 201998
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
In silico モデル: Generated by stochastic gradient descent using ab initio reconstruction job type in cryoSPARC
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.71 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.4.1) / 詳細: using C4 symmetry expanded particles / 使用した粒子像数: 438472
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.3.0)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.3.0)
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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