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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | SARS-CoV-2 DMV nsp3-4 pore complex (consensus-pore, C6 symmetry) | |||||||||
![]() | local resolution map | |||||||||
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![]() | Double membrane vesicle / pore complex / nsp3 / nsp4 / RNA transport / VIRAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs ...protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs / TRAF3-dependent IRF activation pathway / Translation of Replicase and Assembly of the Replication Transcription Complex / Replication of the SARS-CoV-2 genome / snRNP Assembly / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エキソリボヌクレアーゼ / double membrane vesicle viral factory outer membrane / host cell endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment / SARS coronavirus main proteinase / 3'-5'-RNA exonuclease activity / 5'-3' DNA helicase activity / host cell endosome / symbiont-mediated degradation of host mRNA / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / mRNA guanylyltransferase / symbiont-mediated suppression of host ISG15-protein conjugation / G-quadruplex RNA binding / omega peptidase activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of IRF3 activity / symbiont-mediated suppression of host NF-kappaB cascade / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / mRNA (guanine-N7)-methyltransferase / host cell Golgi apparatus / methyltransferase cap1 / symbiont-mediated perturbation of host ubiquitin-like protein modification / DNA helicase / mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase activity / ubiquitinyl hydrolase 1 / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / cysteine-type deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; システインプロテアーゼ / single-stranded RNA binding / host cell perinuclear region of cytoplasm / viral protein processing / lyase activity / host cell endoplasmic reticulum membrane / RNA helicase / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway / symbiont-mediated activation of host autophagy / copper ion binding / viral translational frameshifting / RNA-directed RNA polymerase / cysteine-type endopeptidase activity / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / : / DNA-templated transcription / lipid binding / host cell nucleus / SARS-CoV-2 activates/modulates innate and adaptive immune responses / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.2 Å | |||||||||
![]() | Huang YX / Zhong LJ / Zhang WX / Ni T | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Molecular architecture of coronavirus double-membrane vesicle pore complex. 著者: Yixin Huang / Tongyun Wang / Lijie Zhong / Wenxin Zhang / Yu Zhang / Xiulian Yu / Shuofeng Yuan / Tao Ni / ![]() 要旨: Coronaviruses remodel the intracellular host membranes during replication, forming double-membrane vesicles (DMVs) to accommodate viral RNA synthesis and modifications. SARS-CoV-2 non-structural ...Coronaviruses remodel the intracellular host membranes during replication, forming double-membrane vesicles (DMVs) to accommodate viral RNA synthesis and modifications. SARS-CoV-2 non-structural protein 3 (nsp3) and nsp4 are the minimal viral components required to induce DMV formation and to form a double-membrane-spanning pore, essential for the transport of newly synthesized viral RNAs. The mechanism of DMV pore complex formation remains unknown. Here we describe the molecular architecture of the SARS-CoV-2 nsp3-nsp4 pore complex, as resolved by cryogenic electron tomography and subtomogram averaging in isolated DMVs. The structures uncover an unexpected stoichiometry and topology of the nsp3-nsp4 pore complex comprising 12 copies each of nsp3 and nsp4, organized in 4 concentric stacking hexamer rings, mimicking a miniature nuclear pore complex. The transmembrane domains are interdigitated to create a high local curvature at the double-membrane junction, coupling double-membrane reorganization with pore formation. The ectodomains form extensive contacts in a pseudo-12-fold symmetry, belting the pore complex from the intermembrane space. A central positively charged ring of arginine residues coordinates the putative RNA translocation, essential for virus replication. Our work establishes a framework for understanding DMV pore formation and RNA translocation, providing a structural basis for the development of new antiviral strategies to combat coronavirus infection. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 51.7 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 21.2 KB 21.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 10.2 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 117.9 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 91.1 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 7.8 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 43.4 MB 43.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 846.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 846 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 17.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 23.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8yb5MC ![]() 8yaxC ![]() 8yb7C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | local resolution map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.571 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_39109_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_39109_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : SARS-CoV-2 DMV nsp3-4 pore complex
全体 | 名称: SARS-CoV-2 DMV nsp3-4 pore complex |
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要素 |
|
-超分子 #1: SARS-CoV-2 DMV nsp3-4 pore complex
超分子 | 名称: SARS-CoV-2 DMV nsp3-4 pore complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: Papain-like protease nsp3
分子 | 名称: Papain-like protease nsp3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ubiquitinyl hydrolase 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 217.471188 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: APTKVTFGDD TVIEVQGYKS VNITFELDER IDKVLNEKCS AYTVELGTEV NEFACVVADA VIKTLQPVSE LLTPLGIDLD EWSMATYYL FDESGEFKLA SHMYCSFYPP DEDEEEGDCE EEEFEPSTQY EYGTEDDYQG KPLEFGATSA ALQPEEEQEE D WLDDDSQQ ...文字列: APTKVTFGDD TVIEVQGYKS VNITFELDER IDKVLNEKCS AYTVELGTEV NEFACVVADA VIKTLQPVSE LLTPLGIDLD EWSMATYYL FDESGEFKLA SHMYCSFYPP DEDEEEGDCE EEEFEPSTQY EYGTEDDYQG KPLEFGATSA ALQPEEEQEE D WLDDDSQQ TVGQQDGSED NQTTTIQTIV EVQPQLEMEL TPVVQTIEVN SFSGYLKLTD NVYIKNADIV EEAKKVKPTV VV NAANVYL KHGGGVAGAL NKATNNAMQV ESDDYIATNG PLKVGGSCVL SGHNLAKHCL HVVGPNVNKG EDIQLLKSAY ENF NQHEVL LAPLLSAGIF GADPIHSLRV CVDTVRTNVY LAVFDKNLYD KLVSSFLEMK SEKQVEQKIA EIPKEEVKPF ITES KPSVE QRKQDDKKIK ACVEEVTTTL EETKFLTENL LLYIDINGNL HPDSATLVSD IDITFLKKDA PYIVGDVVQE GVLTA VVIP TKKAGGTTEM LAKALRKVPT DNYITTYPGQ GLNGYTVEEA KTVLKKCKSA FYILPSIISN EKQEILGTVS WNLREM LAH AEETRKLMPV CVETKAIVST IQRKYKGIKI QEGVVDYGAR FYFYTSKTTV ASLINTLNDL NETLVTMPLG YVTHGLN LE EAARYMRSLK VPATVSVSSP DAVTAYNGYL TSSSKTPEEH FIETISLAGS YKDWSYSGQS TQLGIEFLKR GDKSVYYT S NPTTFHLDGE VITFDNLKTL LSLREVRTIK VFTTVDNINL HTQVVDMSMT YGQQFGPTYL DGADVTKIKP HNSHEGKTF YVLPNDDTLR VEAFEYYHTT DPSFLGRYMS ALNHTKKWKY PQVNGLTSIK WADNNCYLAT ALLTLQQIEL KFNPPALQDA YYRARAGEA ANFCALILAY CNKTVGELGD VRETMSYLFQ HANLDSCKRV LNVVCKTCGQ QQTTLKGVEA VMYMGTLSYE Q FKKGVQIP CTCGKQATKY LVQQESPFVM MSAPPAQYEL KHGTFTCASE YTGNYQCGHY KHITSKETLY CIDGALLTKS SE YKGPITD VFYKENSYTT TIKPVTYKLD GVVCTEIDPK LDNYYKKDNS YFTEQPIDLV PNQPYPNASF DNFKFVCDNI KFA DDLNQL TGYKKPASRE LKVTFFPDLN GDVVAIDYKH YTPSFKKGAK LLHKPIVWHV NNATNKATYK PNTWCIRCLW STKP VETSN SFDVLKSEDA QGMDNLACED LKPVSEEVVE NPTIQKDVLE CNVKTTEVVG DIILKPANNS LKITEEVGHT DLMAA YVDN SSLTIKKPNE LSRVLGLKTL ATHGLAAVNS VPWDTIANYA KPFLNKVVST TTNIVTRCLN RVCTNYMPYF FTLLLQ LCT FTRSTNSRIK ASMPTTIAKN TVKSVGKFCL EASFNYLKSP NFSKLINIII WFLLLSVCLG SLIYSTAALG VLMSNLG MP SYCTGYREGY LNSTNVTIAT YCTGSIPCSV CLSGLDSLDT YPSLETIQIT ISSFKWDLTA FGLVAEWFLA YILFTRFF Y VLGLAAIMQL FFSYFAVHFI SNSWLMWLII NLVQMAPISA MVRMYIFFAS FYYVWKSYVH VVDGCNSSTC MMCYKRNRA TRVECTTIVN GVRRSFYVYA NGGKGFCKLH NWNCVNCDTF CAGSTFISDE VARDLSLQFK RPINPTDQSS YIVDSVTVKN GSIHLYFDK AGQKTYERHS LSHFVNLDNL RANNTKGSLP INVIVFDGKS KCEESSAKSA SVYYSQLMCQ PILLLDQALV S DVGDSAEV AVKMFDAYVN TFSSTFNVPM EKLKTLVATA EAELAKNVSL DNVLSTFISA ARQGFVDSDV ETKDVVECLK LS HQSDIEV TGDSCNNYML TYNKVENMTP RDLGACIDCS ARHINAQVAK SHNIALIWNV KDFMSLSEQL RKQIRSAAKK NNL PFKLTC ATTRQVVNVV TTKIALKGG UniProtKB: Replicase polyprotein 1ab |
-分子 #2: Non-structural protein 4
分子 | 名称: Non-structural protein 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 56.229582 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: KIVNNWLKQL IKVTLVFLFV AAIFYLITPV HVMSKHTDFS SEIIGYKAID GGVTRDIAST DTCFANKHAD FDTWFSQRGG SYTNDKACP LIAAVITREV GFVVPGLPGT ILRTTNGDFL HFLPRVFSAV GNICYTPSKL IEYTDFATSA CVLAAECTIF K DASGKPVP ...文字列: KIVNNWLKQL IKVTLVFLFV AAIFYLITPV HVMSKHTDFS SEIIGYKAID GGVTRDIAST DTCFANKHAD FDTWFSQRGG SYTNDKACP LIAAVITREV GFVVPGLPGT ILRTTNGDFL HFLPRVFSAV GNICYTPSKL IEYTDFATSA CVLAAECTIF K DASGKPVP YCYDTNVLEG SVAYESLRPD TRYVLMDGSI IQFPNTYLEG SVRVVTTFDS EYCRHGTCER SEAGVCVSTS GR WVLNNDY YRSLPGVFCG VDAVNLLTNM FTPLIQPIGA LDISASIVAG GIVAIVVTCL AYYFMRFRRA FGEYSHVVAF NTL LFLMSF TVLCLTPVYS FLPGVYSVIY LYLTFYLTND VSFLAHIQWM VMFTPLVPFW ITIAYIICIS TKHFYWFFSN YLKR RVVFN GVSFSTFEEA ALCTFLLNKE MYLKLRSDVL LPLTQYNRYL ALYNKYKYFS GAMDTTSYRE AACCHLAKAL NDFSN SGSD VLYQPPQTSI TSAVLQ UniProtKB: Replicase polyprotein 1ab |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 150mM NaCl, 10mM Tris-HCl, 1mM EDTA | ||||||||||||
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グリッド | モデル: EMS Lacey Carbon / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 45 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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ソフトウェア | 名称: SerialEM |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) 平均電子線量: 3.0 e/Å2 詳細: The tilt-series were acquired using Thermofisher Krios equipped with a Falcon 4i camera and Selectris energy filter. A dose-symmetric scheme (group of 2) was used, with a tilt range of -51 ...詳細: The tilt-series were acquired using Thermofisher Krios equipped with a Falcon 4i camera and Selectris energy filter. A dose-symmetric scheme (group of 2) was used, with a tilt range of -51 degree to 51 degree (or -60 to 60) at 3 degree increments and an exposure dose of 3 e-/A2 per image. The total dose was 105 or 123 e-/A2. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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ソフトウェア | 名称: ![]() |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-8yb5: |