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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-37564 | |||||||||
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タイトル | Cryo- EM structure of Mycobacterium smegmatis 30S ribosomal subunit (body 2) of 70S ribosome, E- tRNA and RafH. | |||||||||
マップデータ | Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S ribosome, E t-RNA and RafH. | |||||||||
試料 |
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キーワード | Ribosome / protein synthesis / Mycobacterium smegmatis / hibernation promotion factor / HPF / RafH / hypoxia stress / Cryo- EM / Single particle reconstruction | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 small ribosomal subunit rRNA binding / regulation of translation / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation ...small ribosomal subunit rRNA binding / regulation of translation / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / mRNA binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Kumar N / Sharma S / Kaushal PS | |||||||||
資金援助 | インド, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Cryo- EM structure of the mycobacterial 70S ribosome in complex with ribosome hibernation promotion factor RafH. 著者: Niraj Kumar / Shivani Sharma / Prem S Kaushal / 要旨: Ribosome hibernation is a key survival strategy bacteria adopt under environmental stress, where a protein, hibernation promotion factor (HPF), transitorily inactivates the ribosome. Mycobacterium ...Ribosome hibernation is a key survival strategy bacteria adopt under environmental stress, where a protein, hibernation promotion factor (HPF), transitorily inactivates the ribosome. Mycobacterium tuberculosis encounters hypoxia (low oxygen) as a major stress in the host macrophages, and upregulates the expression of RafH protein, which is crucial for its survival. The RafH, a dual domain HPF, an orthologue of bacterial long HPF (HPF), hibernates ribosome in 70S monosome form, whereas in other bacteria, the HPF induces 70S ribosome dimerization and hibernates its ribosome in 100S disome form. Here, we report the cryo- EM structure of M. smegmatis, a close homolog of M. tuberculosis, 70S ribosome in complex with the RafH factor at an overall 2.8 Å resolution. The N- terminus domain (NTD) of RafH binds to the decoding center, similarly to HPF NTD. In contrast, the C- terminus domain (CTD) of RafH, which is larger than the HPF CTD, binds to a distinct site at the platform binding center of the ribosomal small subunit. The two domain-connecting linker regions, which remain mostly disordered in earlier reported HPF structures, interact mainly with the anti-Shine Dalgarno sequence of the 16S rRNA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_37564.map.gz | 29.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-37564-v30.xml emd-37564.xml | 42.4 KB 42.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_37564_fsc.xml | 13.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_37564.png | 78.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-37564.cif.gz | 9.5 KB | ||
その他 | emd_37564_half_map_1.map.gz emd_37564_half_map_2.map.gz | 140 MB 140 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-37564 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-37564 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_37564_validation.pdf.gz | 772.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_37564_full_validation.pdf.gz | 772.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_37564_validation.xml.gz | 21.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_37564_validation.cif.gz | 28 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-37564 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-37564 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8widMC 8whxC 8whyC 8wi7C 8wi8C 8wi9C 8wibC 8wicC 8wifC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_37564.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 209.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S ribosome, E t-RNA and RafH. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S...
ファイル | emd_37564_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S ribosome, E t-RNA and RafH, half 1. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S...
ファイル | emd_37564_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Mycobacterium smegmatis 30S ribosome (body 2) of 70S ribosome, E t-RNA and RafH, half 2. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : 70S Ribosome + RafH protein
+超分子 #1: 70S Ribosome + RafH protein
+超分子 #2: 70S Ribosome
+超分子 #3: RafH
+分子 #1: 16S rRNA
+分子 #2: E -tRNA
+分子 #3: 30S ribosomal protein S22
+分子 #4: 30S ribosomal protein S3
+分子 #5: 30S ribosomal protein S4
+分子 #6: 30S ribosomal protein S5
+分子 #7: 30S ribosomal protein S6
+分子 #8: 30S ribosomal protein S7
+分子 #9: 30S ribosomal protein S8
+分子 #10: 30S ribosomal protein S9
+分子 #11: 30S ribosomal protein S10
+分子 #12: 30S ribosomal protein S11
+分子 #13: 30S ribosomal protein S12
+分子 #14: 30S ribosomal protein S13
+分子 #15: 30S ribosomal protein S14A
+分子 #16: 30S ribosomal protein S15
+分子 #17: 30S ribosomal protein S16
+分子 #18: 30S ribosomal protein S17
+分子 #19: 30S ribosomal protein S18B
+分子 #20: 30S ribosomal protein S19
+分子 #21: 30S ribosomal protein S20
+分子 #22: 50S ribosomal protein L31
+分子 #23: Ribosome hibernation promotion factor RafH
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 20mM HEPES, 100mM NH4Cl, 20mM MgCl2, 3mM DTT, |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 12343 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 1.34 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.8 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |