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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3613 | |||||||||
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タイトル | DyP Encapsulin particle with imposed C3 symmetry | |||||||||
マップデータ | DyP Encapsulin particle with imposed C3 symmetry | |||||||||
試料 |
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生物種 | Brevibacterium linens (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 24.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Putri RM / Allende-Ballestero C / Luque D / Klem R / Rousou AA / Liu A / Traulsen CH / Rurup WF / Koay MST / Caston JR / Cornelissen JJLM | |||||||||
引用 | ジャーナル: ACS Nano / 年: 2017 タイトル: Structural Characterization of Native and Modified Encapsulins as Nanoplatforms for in Vitro Catalysis and Cellular Uptake. 著者: Rindia M Putri / Carolina Allende-Ballestero / Daniel Luque / Robin Klem / Katerina-Asteria Rousou / Aijie Liu / Christoph H-H Traulsen / W Frederik Rurup / Melissa S T Koay / José R Castón ...著者: Rindia M Putri / Carolina Allende-Ballestero / Daniel Luque / Robin Klem / Katerina-Asteria Rousou / Aijie Liu / Christoph H-H Traulsen / W Frederik Rurup / Melissa S T Koay / José R Castón / Jeroen J L M Cornelissen / 要旨: Recent years have witnessed the emergence of bacterial semiorganelle encapsulins as promising platforms for bio-nanotechnology. To advance the development of encapsulins as nanoplatforms, a ...Recent years have witnessed the emergence of bacterial semiorganelle encapsulins as promising platforms for bio-nanotechnology. To advance the development of encapsulins as nanoplatforms, a functional and structural basis of these assemblies is required. Encapsulin from Brevibacterium linens is known to be a protein-based vessel for an enzyme cargo in its cavity, which could be replaced with a foreign cargo, resulting in a modified encapsulin. Here, we characterize the native structure of B. linens encapsulins with both native and foreign cargo using cryo-electron microscopy (cryo-EM). Furthermore, by harnessing the confined enzyme (i.e., a peroxidase), we demonstrate the functionality of the encapsulin for an in vitro surface-immobilized catalysis in a cascade pathway with an additional enzyme, glucose oxidase. We also demonstrate the in vivo functionality of the encapsulin for cellular uptake using mammalian macrophages. Unraveling both the structure and functionality of the encapsulins allows transforming biological nanocompartments into functional systems. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3613.map.gz | 1.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3613-v30.xml emd-3613.xml | 11.8 KB 11.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3613.png | 110.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3613 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3613 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3613.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | DyP Encapsulin particle with imposed C3 symmetry | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.32 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : DyP encapsulin
全体 | 名称: DyP encapsulin |
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要素 |
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-超分子 #1: DyP encapsulin
超分子 | 名称: DyP encapsulin / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 詳細: Brevibacterium linens encapsulin loaded with DyP |
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由来(天然) | 生物種: Brevibacterium linens (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 2 MDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM Tris-Cl pH 7.5, 150 mM NH4Cl, 1 mM betamercaptoethanol |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER/RHODIUM / メッシュ: 300 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: LEICA EM CPC |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (4k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 15.0 µm / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 141 / 平均電子線量: 10.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 最大 デフォーカス(補正後): 4.2 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.2 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.26 mm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN 626 SINGLE TILT LIQUID NITROGEN CRYO TRANSFER HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |