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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3411 | |||||||||
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タイトル | cryo-EM of nanoscale DNA assemblies | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of a DNA cuboctahedron object | |||||||||
試料 |
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キーワード | Scaffolded DNA origami | |||||||||
生物種 | Enterobacteria phage M13 (ファージ) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 29.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang K / Chiu W / Veneziano R / Ratanalert S / Zhang F / Yan H / Bathe M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2016 タイトル: Designer nanoscale DNA assemblies programmed from the top down. 著者: Rémi Veneziano / Sakul Ratanalert / Kaiming Zhang / Fei Zhang / Hao Yan / Wah Chiu / Mark Bathe / 要旨: Scaffolded DNA origami is a versatile means of synthesizing complex molecular architectures. However, the approach is limited by the need to forward-design specific Watson-Crick base pairing manually ...Scaffolded DNA origami is a versatile means of synthesizing complex molecular architectures. However, the approach is limited by the need to forward-design specific Watson-Crick base pairing manually for any given target structure. Here, we report a general, top-down strategy to design nearly arbitrary DNA architectures autonomously based only on target shape. Objects are represented as closed surfaces rendered as polyhedral networks of parallel DNA duplexes, which enables complete DNA scaffold routing with a spanning tree algorithm. The asymmetric polymerase chain reaction is applied to produce stable, monodisperse assemblies with custom scaffold length and sequence that are verified structurally in three dimensions to be high fidelity by single-particle cryo-electron microscopy. Their long-term stability in serum and low-salt buffer confirms their utility for biological as well as nonbiological applications. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3411.map.gz | 54.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3411-v30.xml emd-3411.xml | 15.7 KB 15.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | EMD-3411.png | 170 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3411 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3411 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3411_validation.pdf.gz | 207.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3411_full_validation.pdf.gz | 206.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3411_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3411 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3411 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3411.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of a DNA cuboctahedron object | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.51 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : DNA cuboctahedron, 52-bp edge length
全体 | 名称: DNA cuboctahedron, 52-bp edge length |
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要素 |
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-超分子 #1000: DNA cuboctahedron, 52-bp edge length
超分子 | 名称: DNA cuboctahedron, 52-bp edge length / タイプ: sample / ID: 1000 詳細: Monodisperse and pure sample were prepared by overnight folding reaction and purified using centrifugal filter (MWCO 100KDa) 集合状態: monomer / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 1.85 MDa / 理論値: 1.85 MDa / 手法: Calculation |
-分子 #1: M13mp18 phage genome segment
分子 | 名称: M13mp18 phage genome segment / タイプ: dna / ID: 1 / Name.synonym: Scaffold strand / 詳細: amplified using assymetric PCR / 分類: DNA / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: Enterobacteria phage M13 (ファージ) / 株: M13mp18 / 別称: M13 phage |
分子量 | 実験値: 1.01 MDa / 理論値: 1.01 MDa |
配列 | 文字列: TCTTTGCCTT GCCTGTATGA TTTATTGGAT GTTAATGCTA CTACTATTAG TAGAATTGAT GCCACCTTTT CAGCTCGCGC CCCAAATGAA AATATAGCTA AACAGGTTAT TGACCATTTG CGAAATGTAT CTAATGGTCA AACTAAATCT ACTCGTTCGC AGAATTGGGA ...文字列: TCTTTGCCTT GCCTGTATGA TTTATTGGAT GTTAATGCTA CTACTATTAG TAGAATTGAT GCCACCTTTT CAGCTCGCGC CCCAAATGAA AATATAGCTA AACAGGTTAT TGACCATTTG CGAAATGTAT CTAATGGTCA AACTAAATCT ACTCGTTCGC AGAATTGGGA ATCAACTGTT ACATGGAATG AAACTTCCAG ACACCGTACT TTAGTTGCAT ATTTAAAACA TGTTGAGCTA CAGCACCAGA TTCAGCAATT AAGCTCTAAG CCATCCGCAA AAATGACCTC TTATCAAAAG GAGCAATTAA AGGTACTCTC TAATCCTGAC CTGTTGGAGT TTGCTTCCGG TCTGGTTCGC TTTGAAGCTC GAATTAAAAC GCGATATTTG AAGTCTTTCG GGCTTCCTCT TAATCTTTTT GATGCAATCC GCTTTGCTTC TGACTATAAT AGTCAGGGTA AAGACCTGAT TTTTGATTTA TGGTCATTCT CGTTTTCTGA ACTGTTTAAA GCATTTGAGG GGGATTCAAT GAATATTTAT GACGATTCCG CAGTATTGGA CGCTATCCAG TCTAAACATT TTACTATTAC CCCCTCTGGC AAAACTTCTT TTGCAAAAGC CTCTCGCTAT TTTGGTTTTT ATCGTCGTCT GGTAAACGAG GGTTATGATA GTGTTGCTCT TACTATGCCT CGTAATTCCT TTTGGCGTTA TGTATCTGCA TTAGTTGAAT GTGGTATTCC TAAATCTCAA CTGATGAATC TTTCTACCTG TAATAATGTT GTTCCGTTAG TTCGTTTTAT TAACGTAGAT TTTTCTTCCC AACGTCCTGA CTGGTATAAT GAGCCAGTTC TTAAAATCGC ATAAGGTAAT TCACAATGAT TAAAGTTGAA ATTAAACCAT CTCAAGCCCA ATTTACTACT CGTTCTGGTG TTCTCGTCAG GGCAAGCCTT ATTCACTGAA TGAGCAGCTT TGTTACGTTG ATTTGGGTAA TGAATATCCG GTTCTTGTCA AGATTACTCT TGATGAAGGT CAGCCAGCCT ATGCGCCTGG TCTGTACACC GTTCATCTGT CCTCTTTCAA AGTTGGTCAG TTCGGTTCCC TTATGATTGA CCGTCTGCGC CTCGTTCCGG CTAAGTAACA TGGAGCAGGT CGCGGATTTC GACACAATTT ATCAGGCGAT GATACAAATC TCCGTTGTAC TTTGTTTCGC GCTTGGTATA ATCGCTGGGG GTCAAAGATG AGTGTTTTAG TGTATTCTTT CGCCTCTTTC GTTTTAGGTT GGTGCCTTCG TAGTGGCATT ACGTATTTTA CCCGTTTAAT GGAAACTTCC TCATGAAAAA GTCTTTAGTC CTCAAAGCCT CTGTAGCCGT TGCTACCCTC GTTCCGATGC TGTCTTTCGC TGCTGAGGGT GACGATCCCG CAAAAGCGGC CTTTAACTCC CTGCAAGCCT CAGCGACCGA ATATATCGGT TATGCGTGGG CGATGGTTGT TGTCATTGTC GGCGCAACTA TCGGTATCAA GCTGTTTAAG AAATTCACCT CGAAAGCAAG CTGATAAACC GATACAATTA AAGGCTCCTT TTGGAGCCTT TTTTTTTGGA GATTTTCAAC GTGAAAAAAT TATTATTCGC AATTCCTTTA GTTGTTCCTT TCTATTCTCA CTCCGCTGAA ACTGTTGAAA GTTGTTTAGC AAAACCCCAT ACAGAAAATT CATTTACTAA CGTCTGGAAA GACGACAAAA CTTTAGATCG TTACGCTAAC TATGAGGGTT GTCTGTGGAA TGCTACAGGC GTTGTAGTTT GTACTGGTGA CGAAACTCAG TGTTACGGTA CATGGGTTCC TATTGGGCTT GCTATCCCTG AAAATGAGGG TGGTGGCTCT GAGGGTGGCG GTTCTGAGGG TGGCGGTTCT GAGGGTGGCG GTACTAAACC TCCTGAGTAC GGTGATACAC CTATTCCGGG CTATACTTAT ATCAACCCTC TCGACGGCAC TTATCCGCCT GGTACTGAGC AAAACCCCGC TAATCCTAAT CCTTCTCTTG AGGAGTCTCA GCCTCTTAAT ACTTTCATGT TTCAGAATAA TAGGTTCCGA AATAGGCAGG GGGCATTAAC TGTTTATACG GGCACTGTTA CTCAAGGCAC TGACCCCGTT AAAACTTATT ACCAGTACAC TCCTGTATCA TCAAAAGCCA TGTATGACGC TTACTGGAAC GGTAAATTCA GAGACTGCGC TTTCCATTCT GGCTTTAATG AAGATCCATT CGTTTGTGAA TATCAAGGCC AATCGTCTGA CCTGCCTCAA CCTCCTGTCA ATGCTGGCGG CGGCTCTGGT GGTGGTTCTG GTGGCGGCTC TGAGGGTGGT GGCTCTGAGG GTGGCGGTTC TGAGGGTGGC GGCTCTGAGG GAGGCGGTTC CGGTGGTGGC TCTGGTTCCG GTGATTTTGA TTATGAAAAG ATGGCAAACG CTAATAAGGG GGCTATGACC GAAAATGCCG ATGAAAACGC GCTACAGTCT GACGCTAAAG GCAAACTTGA TTCTGTCGCT ACTGATTACG GTGCTGCTAT CGATGGTTTC ATTGGTGACG TTTCCGGCCT TGCTAATGGT AATGGTGCTA CTGGTGATTT TGCTGGCTCT AATTCCCAAA TGGCTCAAGT CGGTGACGGT GATAATTCAC CTTTAATGAA TAATTTCCGT CAATATTTAC CTTCCCTCCC TCAATCGGTT GAATGTCGCC CTTTTGTCTT TAGCGCTGGT AAACCATATG AATTTTCTAT TGATTGTGAC AAAATAAACT TATTCCGTGG TGTCTTTGCG TTTCTTTTAT ATGTTGCCAC CTTTATGTAT GTATTTTCTA CGTTTGCTAA CATACTGCGT AATAAGGAGT CTTAATCATG CCAGTTCTTT TGGGTATTCC GTTATTATTG CGTTTCCTCG GTTTCCTTCT GGTAACTTTG TTCGGCTATC TGCTTACTTT TCTTAAAAAG GGCTTCGGTA AGATAGCTAT TGCTATTTCA TTGTTTCTTG CTCTTATTAT TGGGCTTAAC TCAATTCTTG TGGGTTATCT CTCTGATATT AGCGCTCAAT TACCCTCTGA CTTTGTTCAG GGTGTTCAGT TAATTCTCCC GTCTAATGCG CTTCCCTGTT TTTATGTTAT TCTCTCTGTA AAGGCTGCTA TTTTCATTTT TGACGTTAAA CAAAAAATCG TTTCTTATTT GGATTGGGAT AAATAATATG GCTGTTTATT TTGTAACTGG CAAATTAGGC TCTGGAAAGA CGCTCGTTAG C |
-分子 #2: Synthetic DNA oligonucleotides
分子 | 名称: Synthetic DNA oligonucleotides / タイプ: dna / ID: 2 / Name.synonym: Staple strand 詳細: CGAGCTGAAAATTTTTGGTGGCATCAGAAAGAGGCGATTTTTAAGAATACAC CGAAGGCACCTAGTAGTAGCATTCAAGTTTGTAATGCCACTA AACCTAAAACATTCTACTAA TACATTTCGCATTTTTAATGGTCAATATTTTTGCGGATTTTTTGGCTTAGAG ...詳細: CGAGCTGAAAATTTTTGGTGGCATCAGAAAGAGGCGATTTTTAAGAATACAC CGAAGGCACCTAGTAGTAGCATTCAAGTTTGTAATGCCACTA AACCTAAAACATTCTACTAA TACATTTCGCATTTTTAATGGTCAATATTTTTGCGGATTTTTTGGCTTAGAG GCTCCTTTTGGCTATATTTTCATTTGGGGCGTACCTTTAATT ATAAGAGGTCAACCTGTTTA ACCAGGCGGATTTTTTAAGTGCCGTCCCATTAAACGGTTTTTGTAAAATACG TATAAGTATAGACTTTTTCATGAGGAAGTTTGAGAGGGTTGA GCCCGGAATAGAGGACTAAA ATACCAAGCGCTTTTTGAAACAAAGTCAACAGGTCAGTTTTTGATTAGAGAG TTGTATCATCAACCAGACCGGAAGCAAACTCACAACGGAGAT GCCTGATAAACTTCAAAGCG CCATTAGATGCGAACGAGTAGATTCACCGGA ACCAGAGCTTTCATAATCAAAATTAGTTTGA ACATGTTTTAATTTTTATATGCAACTGTAACAGTTGATTTTTTTCCCAATTC CTGCGGAAGTTTAGACTGGATAGCGAAGTTT CATTCCATAAAGTACGGTGTCTGGTCCAATA CCTTTAGCGTCTTTTTAGACTGTAGCAACGAATGGATTTTTTCTTCATTAAA CAGCATTGACATTTTTGGAGGTTGAGCCTTATTAGCGTTTTTTTTGCCATCT GGCATTTTCGCGATTGGCCTTGATATTCACAGCGTTTTCATC GTCATAGCCCGCAGGTCAGA TACTGGTAATGGCTTTTGATGATACACCAGA GCCGCCGCCGCCACCAGAACCACCAGGAGTG AGAAGCAAAGCTTTTTGGATTGCATCAATATCGCGTTTTTTTTTAATTCGAG AGACTTCAAAAAAGATTAAGAGGATGGTGCT GTAGCTCACTTAATTGCTGAATCAGCCCGAA ACGAGAATGACTTTTTCATAAATCAAGAACGGTGTACTTTTTAGACCAGGCG AACTTTGAAATTTACCCTGACTATTATAGTCCCGAACTGACC GAGGACAGATAAATCAGGTC TCGTCATAAATTTTTTATTCATTGAAAAAGGAATTACTTTTTGAGGCATAGT AATGCAGATAATGCTTTAAACAGTTCAGAAACACATTCAACT CATAACGCCATCCCCCTCAA TTGTGTCGAAATTTTTTCCGCGACCTAGACGGTCAATTTTTTCATAAGGGAA ACCATCGCATAGTTGCGCCGACAAGCCGGAA CGAGGCGCGCTCCATGTTACTTATGACAACA TCTTGACAAGATTTTTACCGGATATTTCAGTTGAGATTTTTTTTAGGAATAC TCAACGTAACTATTACAGGTAGAAAGATTCACATTACCCAAA AAAGCTGCTCGGAACAACAT CACCACCGGAATTTTTCCGCCTCCCTCAGAGCCACCATTTTTCCCTCAGAGC CAGACGACGATTTTTTAAAAACCAAACAGAGGGGGTATTTTTATAGTAAAAT AGTTTTGCATAGCGAGAGGCTTTTCAGAACC GCCACCCTCAGAGCCGCCACCCTGCAAAAGA CGATTTTAAGATTTTTACTGGCTCATACGTTAATAAATTTTTACGAACTAAC AAAAATCTTATACCAGTCAGGACGATAACCC TCGTTTACAAGAGCAACACTATCTTGGGAAG ATAAGTTTTAATTTTTCGGGGTCAGTATGCCCCCTGCTTTTTCTATTTCGGA AACAGTTAGCCTTGAGTAACAGTGGTGAATT ACCTTATGTCAACTTTAATCATTCCCGTATA ATTCAGTGAATTTTTTAAGGCTTGCCTGGGCTTGAGATTTTTTGGTTTAATT CAAACTACTAACACTGAGTTTCGTGAACGAG TAGTAAATCTGACGAGAACACCACACCAGTA GAGGCTGAGACTTTTTTCCTCAAGAGCCGTTCCAGTATTTTTAGCGTCATAC AAGCGCAGTCATTAGCGGGGTTTTGCTCAGTGCCAGAATGGA TCTGAATTTAAAGGATTAGG CCTCAGAACCGTTTTTCCACCCTCAGCCAATAGGAACTTTTTCCATGTACCG TAGCAAGCAGCCACCACCCTCATTACATGAA AGTATTAAACCTATTATTCTGAATTCAGGGA GGTGTATCACCTTTTTGTACTCAGGAGCTAAACAACTTTTTTTTCAACAGTT AATTTTCTGTCGCCACCCTCAGAACCGCCACGTTAGTAAATG ATGGGGTTTTGGTTTAGTAC AACGCCTGTAGTTTTTCATTCCACAGAGTTTTGTCGTTTTTTCTTTCCAGAC AAAAAGGCTTTTCACGTTGAAAATAGCGTAA CGATCTAAACAACCCTCATAGTTCTCCAAAA GCTTTTGCGGGTTTTTATCGTCACCCAGCAACGGCTATTTTTCAGAGGCTTT ACGAGGGTTCAGCAGCGAAAGACATGACCCC CAGCGATTTAAAACACTCATCTTGCATCGGA CCACGCATAACTTTTTCGATATATTCAAGGAATTGCGTTTTTAATAATAATT AGAATAGAAAGCTTGCAGGGAGTTAAAGGCCTCAGCGGAGTG GGAACAACTAGGTCGCTGAG TCCAAAAGGAGTTTTTCCTTTAATTGTTCTTAAACAGTTTTTCTTGATACCG AGGTGAATTATCGGTTTATCAGCTCTTCATC AAGAGTAACATAGGCTGGCTGACTGCTTTCG 分類: DNA / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: Yes |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 実験値: 840 KDa / 理論値: 840 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.93 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 40 mM Tris-HCl, 20 mM acetic acid, 2 mM EDTA |
グリッド | 詳細: glow-discharged 200-mesh R1.2/1.3 Quantifoil grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: Blot for 1.5 second before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2200FS |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 80,000 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: JEOL |
詳細 | 5k * 4k |
日付 | 2015年9月19日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON DE-20 (5k x 3k) 実像数: 101 / 平均電子線量: 63 e/Å2 詳細: Every image is the average of 60 frames recorded by the direct electron detecto |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 25000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
詳細 | The particles were selected manually using EMAN2 |
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CTF補正 | 詳細: each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: O (正8面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 29.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2 / 使用した粒子像数: 1758 |