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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-33439 | |||||||||
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タイトル | Structure of Craspase-NTR | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | IMMUNE SYSTEM-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | CHAT domain / CHAT domain / : / CRISPR type III-associated protein / RAMP superfamily / defense response to virus / RNA binding / RAMP superfamily protein / CHAT domain protein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.08 Å | |||||||||
データ登録者 | Feng Y / Zhang L | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2022 タイトル: Target RNA activates the protease activity of Craspase to confer antiviral defense. 著者: Xi Liu / Laixing Zhang / Hao Wang / Yu Xiu / Ling Huang / Zhengyu Gao / Ningning Li / Feixue Li / Weijia Xiong / Teng Gao / Yi Zhang / Maojun Yang / Yue Feng / 要旨: In the type III-E CRISPR-Cas system, a Cas effector (gRAMP) is associated with a TPR-CHAT to form Craspase (CRISPR-guided caspase). However, both the structural features of gRAMP and the immunity ...In the type III-E CRISPR-Cas system, a Cas effector (gRAMP) is associated with a TPR-CHAT to form Craspase (CRISPR-guided caspase). However, both the structural features of gRAMP and the immunity mechanism remain unknown for this system. Here, we report structures of gRAMP-crRNA and gRAMP:cRNA:target RNA as well as structures of Craspase and Craspase complexed with cognate target RNA (CTR) or non-cognate target RNA (NTR). Importantly, the 3' anti-tag region of NTR and CTR binds at two distinct channels in Craspase, and CTR with a non-complementary 3' anti-tag induces a marked conformational change of the TPR-CHAT, which allosterically activates its protease activity to cleave an ancillary protein Csx30. This cleavage then triggers an abortive infection as the antiviral strategy of the type III-E system. Together, our study provides crucial insights into both the catalytic mechanism of the gRAMP and the immunity mechanism of the type III-E system. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_33439.map.gz | 69.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-33439-v30.xml emd-33439.xml | 22.1 KB 22.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_33439_fsc.xml | 10 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_33439.png | 27.5 KB | ||
マスクデータ | emd_33439_msk_1.map | 83.7 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-33439.cif.gz | 7.3 KB | ||
その他 | emd_33439_additional_1.map.gz emd_33439_half_map_1.map.gz emd_33439_half_map_2.map.gz | 6.4 MB 65.4 MB 65.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-33439 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-33439 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_33439_validation.pdf.gz | 829.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_33439_full_validation.pdf.gz | 829.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_33439_validation.xml.gz | 16.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_33439_validation.cif.gz | 22.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-33439 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-33439 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_33439.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.97 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_33439_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: #1
ファイル | emd_33439_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_33439_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_33439_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Craspase-NTR complex
全体 | 名称: Craspase-NTR complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Craspase-NTR complex
超分子 | 名称: Craspase-NTR complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
-超分子 #2: RAMP superfamily protein, CHAT domain protein
超分子 | 名称: RAMP superfamily protein, CHAT domain protein / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1, #3 |
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-超分子 #3: RNA
超分子 | 名称: RNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2 |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) / Synthetically produced: Yes |
-超分子 #4: RNA (34-MER)
超分子 | 名称: RNA (34-MER) / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #4 |
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-分子 #1: CHAT domain protein
分子 | 名称: CHAT domain protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: Using a different transcription start point, the protein has additional five residues in its N-terminus. コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 82.549992 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MNNTEENIDR IQEPTREDID RKEAERLLDE AFNPRTKPVD RKKIINSALK ILIGLYKEKK DDLTSASFIS IARAYYLVSI TILPKGTTI PEKKKEALRK GIEFIDRAIN KFNGSILDSQ RAFRIKSVLS IEFNRIDREK CDNIKLKNLL NEAVDKGCTD F DTYEWDIQ ...文字列: MNNTEENIDR IQEPTREDID RKEAERLLDE AFNPRTKPVD RKKIINSALK ILIGLYKEKK DDLTSASFIS IARAYYLVSI TILPKGTTI PEKKKEALRK GIEFIDRAIN KFNGSILDSQ RAFRIKSVLS IEFNRIDREK CDNIKLKNLL NEAVDKGCTD F DTYEWDIQ IAIRLCELGV DMEGHFDNLI KSNKANDLQK AKAYYFIKKD DHKAKEHMDK CTASLKYTPC SHRLWDETVG FI ERLKGDS STLWRDFAIK TYRSCRVQEK ETGTLRLRWY WSRHRVLYDM AFLAVKEQAD DEEPDVNVKQ AKIKKLAEIS DSL KSRFSL RLSDMEKMPK SDDESNHEFK KFLDKCVTAY QDGYVINRSE DKEGQGENKS TTSKQPEPRP QAKLLELTQV PEGW VVVHF YLNKLEGMGN AIVFDKCANS WQYKEFQYKE LFEVFLTWQA NYNLYKENAA EHLVTLCKKI GETMPFLFCD NFIPN GKDV LFVPHDFLHR LPLHGSIENK TNGKLFLENH SCCYLPAWSF ASEKEASTSD EYVLLKNFDQ GHFETLQNNQ IWGTQS VKD GASSDDLENI RNNPRLLTIL CHGEANMSNP FRSMLKLANG GITYLEILNS VKGLKGSQVI LGACETDLVP PLSDVMD EH YSVATALLLI GAAGVVGTMW KVRSNKTKSL IEWKLENIEY KLNEWQKETG GAAYKDHPPT FYRSIAFRSI GFPL UniProtKB: CHAT domain protein |
-分子 #3: RAMP superfamily protein
分子 | 名称: RAMP superfamily protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 197.823797 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MKSNDMNITV ELTFFEPYRL VEWFDWDARK KSHSAMRGQA FAQWTWKGKG RTAGKSFITG TLVRSAVIKA VEELLSLNNG KWEGVPCCN GSFQTDESKG KKPSFLRKRH TLQWQANNKN ICDKEEACPF CILLGRFDNA GKVHERNKDY DIHFSNFDLD H KQEKNDLR ...文字列: MKSNDMNITV ELTFFEPYRL VEWFDWDARK KSHSAMRGQA FAQWTWKGKG RTAGKSFITG TLVRSAVIKA VEELLSLNNG KWEGVPCCN GSFQTDESKG KKPSFLRKRH TLQWQANNKN ICDKEEACPF CILLGRFDNA GKVHERNKDY DIHFSNFDLD H KQEKNDLR LVDIASGRIL NRVDFDTGKA KDYFRTWEAD YETYGTYTGR ITLRNEHAKK LLLASLGFVD KLCGALCRIE VI KKSESPL PSDTKEQSYT KDDTVEVLSE DHNDELRKQA EVIVEAFKQN DKLEKIRILA DAIRTLRLHG EGVIEKDELP DGK EERDKG HHLWDIKVQG TALRTKLKEL WQSNKDIGWR KFTEMLGSNL YLIYKKETGG VSTRFRILGD TEYYSKAHDS EGSD LFIPV TPPEGIETKE WIIVGRLKAA TPFYFGVQQP SDSIPGKEKK SEDSLVINEH TSFNILLDKE NRYRIPRSAL RGALR RDLR TAFGSGCNVS LGGQILCNCK VCIEMRRITL KDSVSDFSEP PEIRYRIAKN PGTATVEDGS LFDIEVGPEG LTFPFV LRY RGHKFPEQLS SVIRYWEEND GKNGMAWLGG LDSTGKGRFA LKDIKIFEWD LNQKINEYIK ERGMRGKEKE LLEMGES SL PDGLIPYKFF EERECLFPYK ENLKPQWSEV QYTIEVGSPL LTADTISALT EPGNRDAIAY KKRVYNDGNN AIEPEPRF A VKSETHRGIF RTAVGRRTGD LGKEDHEDCT CDMCIIFGNE HESSKIRFED LELINGNEFE KLEKHIDHVA IDRFTGGAL DKAKFDTYPL AGSPKKPLKL KGRFWIKKGF SGDHKLLITT ALSDIRDGLY PLGSKGGVGY GWVAGISIDD NVPDDFKEMI NKTEMPLPE EVEESNNGPI NNDYVHPGHQ SPKQDHKNKN IYYPHYFLDS GSKVYREKDI ITHEEFTEEL LSGKINCKLE T LTPLIIPD TSDENGLKLQ GNKPGHKNYK FFNINGELMI PGSELRGMLR THFEALTKSC FAIFGEDSTL SWRMNADEKD YK IDSNSIR KMESQRNPKY RIPDELQKEL RNSGNGLFNR LYTSERRFWS DVSNKFENSI DYKREILRCA GRPKNYKGGI IRQ RKDSLM AEELKVHRLP LYDNFDIPDS AYKANDHCRK SATCSTSRGC RERFTCGIKV RDKNRVFLNA ANNNRQYLNN IKKS NHDLY LQYLKGEKKI RFNSKVITGS ERSPIDVIAE LNERGRQTGF IKLSGLNNSN KSQGNTGTTF NSGWDRFELN ILLDD LETR PSKSDYPRPR LLFTKDQYEY NITKRCERVF EIDKGNKTGY PVDDQIKKNY EDILDSYDGI KDQEVAERFD TFTRGS KLK VGDLVYFHID GDNKIDSLIP VRISRKCASK TLGGKLDKAL HPCTGLSDGL CPGCHLFGTT DYKGRVKFGF AKYENGP EW LITRGNNPER SLTLGVLESP RPAFSIPDDE SEIPGRKFYL HHNGWRIIRQ KQLEIRETVQ PERNVTTEVM DKGNVFSF D VRFENLREWE LGLLLQSLDP GKNIAHKLGK GKPYGFGSVK IKIDSLHTFK INSNNDKIKR VPQSDIREYI NKGYQKLIE WSGNNSIQKG NVLPQWHVIP HIDKLYKLLW VPFLNDSKLE PDVRYPVLNE ESKGYIEGSD YTYKKLGDKD NLPYKTRVKG LTTPWSPWN PFQVIAEHEE QEVNVTGSRP SVTDKIERDG KMV UniProtKB: RAMP superfamily protein |
-分子 #2: RNA (5'-R(P*GP*GP*GP*GP*CP*AP*GP*AP*AP*AP*AP*UP*UP*GP*GP*GP*UP*AP...
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*GP*GP*GP*GP*CP*AP*GP*AP*AP*AP*AP*UP*UP*GP*GP*GP*UP*AP*CP*CP*G)-3') タイプ: rna / ID: 2 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 14.906905 KDa |
配列 | 文字列: CUCUAGUAAC AGCCGUGGAG UCCGGGGCAG AAAAUUGGGU ACCGUG |
-分子 #4: RNA (34-MER)
分子 | 名称: RNA (34-MER) / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 17.828559 KDa |
配列 | 文字列: GACUUAAUGU CACGGUACCC AAUUUUCUGC CCCGGACUCC ACGGCUGUUA CUAGAG |
-分子 #5: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 4 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.7 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |