+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-28971 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | CryoEM map of de novo designed oligomeric protein C8-71_6x | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | Synthetic / Self-assembling / Oligomeric / Helical repeats / DE NOVO PROTEIN | |||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Redler RL / Edman NI / Baker D / Ekiert DC / Bhabha G | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2024 タイトル: Modulation of FGF pathway signaling and vascular differentiation using designed oligomeric assemblies. 著者: Natasha I Edman / Ashish Phal / Rachel L Redler / Thomas Schlichthaerle / Sanjay R Srivatsan / Devon Duron Ehnes / Ali Etemadi / Seong J An / Andrew Favor / Zhe Li / Florian Praetorius / Max ...著者: Natasha I Edman / Ashish Phal / Rachel L Redler / Thomas Schlichthaerle / Sanjay R Srivatsan / Devon Duron Ehnes / Ali Etemadi / Seong J An / Andrew Favor / Zhe Li / Florian Praetorius / Max Gordon / Thomas Vincent / Silvia Marchiano / Leslie Blakely / Chuwei Lin / Wei Yang / Brian Coventry / Derrick R Hicks / Longxing Cao / Neville Bethel / Piper Heine / Analisa Murray / Stacey Gerben / Lauren Carter / Marcos Miranda / Babak Negahdari / Sangwon Lee / Cole Trapnell / Ying Zheng / Charles E Murry / Devin K Schweppe / Benjamin S Freedman / Lance Stewart / Damian C Ekiert / Joseph Schlessinger / Jay Shendure / Gira Bhabha / Hannele Ruohola-Baker / David Baker / 要旨: Many growth factors and cytokines signal by binding to the extracellular domains of their receptors and driving association and transphosphorylation of the receptor intracellular tyrosine kinase ...Many growth factors and cytokines signal by binding to the extracellular domains of their receptors and driving association and transphosphorylation of the receptor intracellular tyrosine kinase domains, initiating downstream signaling cascades. To enable systematic exploration of how receptor valency and geometry affect signaling outcomes, we designed cyclic homo-oligomers with up to 8 subunits using repeat protein building blocks that can be modularly extended. By incorporating a de novo-designed fibroblast growth factor receptor (FGFR)-binding module into these scaffolds, we generated a series of synthetic signaling ligands that exhibit potent valency- and geometry-dependent Ca release and mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway activation. The high specificity of the designed agonists reveals distinct roles for two FGFR splice variants in driving arterial endothelium and perivascular cell fates during early vascular development. Our designed modular assemblies should be broadly useful for unraveling the complexities of signaling in key developmental transitions and for developing future therapeutic applications. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_28971.map.gz | 31.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-28971-v30.xml emd-28971.xml | 17.1 KB 17.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_28971.png | 95.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-28971.cif.gz | 5.3 KB | ||
その他 | emd_28971_half_map_1.map.gz emd_28971_half_map_2.map.gz | 59.1 MB 59.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28971 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28971 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_28971_validation.pdf.gz | 1008.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_28971_full_validation.pdf.gz | 1008.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_28971_validation.xml.gz | 12.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_28971_validation.cif.gz | 14.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28971 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28971 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28971.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.096 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_28971_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_28971_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71_6x
全体 | 名称: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71_6x |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71_6x
超分子 | 名称: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71_6x タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
-分子 #1: C8-71_6x
分子 | 名称: C8-71_6x / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGPEEILERA KESLERAREA SERGDEEEFR KAAEKALELA KRLVEQAKKE GDPELVLEAA KVALRVAELA AKNGDKEVFK KAAESALEVA KRLVEVASKE GDPELVLEAA KVALEVARLA AENGDKEVFK KAAESALEVA KRLVEVASKE GDPELVLEAA RVALWVAELA ...文字列: MGPEEILERA KESLERAREA SERGDEEEFR KAAEKALELA KRLVEQAKKE GDPELVLEAA KVALRVAELA AKNGDKEVFK KAAESALEVA KRLVEVASKE GDPELVLEAA KVALEVARLA AENGDKEVFK KAAESALEVA KRLVEVASKE GDPELVLEAA RVALWVAELA AKNGDKEVFK KAAESALEVA KRLVEVASKE GDPDLVAWAA LVALWVAFLA FLNGDKEVFK KAAESALEVA KALMEVAMKV GAPWLVELAI AVARAVWLLA ELFGDEEVRR RAEAFEIILR IAAIAVKAWL GGGGSLEHHH HHH |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 5 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot time = 4s; blot force = 0. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 263 / 平均露光時間: 2.4 sec. / 平均電子線量: 52.54 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 36000 |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE / 詳細: Ab initio model generated in Cryosparc |
---|---|
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C8 (8回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3) / 使用した粒子像数: 9092 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3) |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3) |