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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-25688 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of 2x HCMV Pentamer gH/gL/UL128/UL130/UL131A in complex with NRP2 and 2x neutralizing fabs 8I21 and 13H11 | |||||||||
マップデータ | Full map of overall pentamer-NRP2-dimer | |||||||||
試料 |
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キーワード | Human Cytomegalovirus / glycoprotein complex / antibody complex / Neuropilin 2 / VIRAL PROTEIN | |||||||||
生物種 | Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.84 Å | |||||||||
データ登録者 | Kschonsak M / Johnson MC / Schelling R / Green EM / Rouge L / Ho H / Patel N / Kilic C / Kraft E / Arthur CP ...Kschonsak M / Johnson MC / Schelling R / Green EM / Rouge L / Ho H / Patel N / Kilic C / Kraft E / Arthur CP / Rohou AL / Comps-Agrar L / Martinez-Martin N / Perez L / Payandeh J / Ciferri C | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022 タイトル: Structural basis for HCMV Pentamer receptor recognition and antibody neutralization. 著者: Marc Kschonsak / Matthew C Johnson / Rachel Schelling / Evan M Green / Lionel Rougé / Hoangdung Ho / Nidhi Patel / Cem Kilic / Edward Kraft / Christopher P Arthur / Alexis L Rohou / Laetitia ...著者: Marc Kschonsak / Matthew C Johnson / Rachel Schelling / Evan M Green / Lionel Rougé / Hoangdung Ho / Nidhi Patel / Cem Kilic / Edward Kraft / Christopher P Arthur / Alexis L Rohou / Laetitia Comps-Agrar / Nadia Martinez-Martin / Laurent Perez / Jian Payandeh / Claudio Ciferri / 要旨: Human cytomegalovirus (HCMV) represents the viral leading cause of congenital birth defects and uses the gH/gL/UL128-130-131A complex (Pentamer) to enter different cell types, including epithelial ...Human cytomegalovirus (HCMV) represents the viral leading cause of congenital birth defects and uses the gH/gL/UL128-130-131A complex (Pentamer) to enter different cell types, including epithelial and endothelial cells. Upon infection, Pentamer elicits the most potent neutralizing response against HCMV, representing a key vaccine candidate. Despite its relevance, the structural basis for Pentamer receptor recognition and antibody neutralization is largely unknown. Here, we determine the structures of Pentamer bound to neuropilin 2 (NRP2) and a set of potent neutralizing antibodies against HCMV. Moreover, we identify thrombomodulin (THBD) as a functional HCMV receptor and determine the structures of the Pentamer-THBD complex. Unexpectedly, both NRP2 and THBD also promote dimerization of Pentamer. Our results provide a framework for understanding HCMV receptor engagement, cell entry, antibody neutralization, and outline strategies for antiviral therapies against HCMV. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_25688.map.gz | 226.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-25688-v30.xml emd-25688.xml | 34.4 KB 34.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_25688.png | 83.8 KB | ||
Filedesc metadata | emd-25688.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_25688_additional_1.map.gz emd_25688_additional_2.map.gz emd_25688_additional_3.map.gz emd_25688_half_map_1.map.gz emd_25688_half_map_2.map.gz | 149.2 MB 226.2 MB 149.2 MB 149 MB 149 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25688 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25688 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_25688_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_25688_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_25688_validation.xml.gz | 16.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_25688_validation.cif.gz | 19.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25688 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25688 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_25688.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Full map of overall pentamer-NRP2-dimer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.0712 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Half map 1 of focused refinement on NRP2-UL region
ファイル | emd_25688_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 1 of focused refinement on NRP2-UL region | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Full map of focused refinement on NRP2-UL region
ファイル | emd_25688_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Full map of focused refinement on NRP2-UL region | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Half map 2 of focused refinement on NRP2-UL region
ファイル | emd_25688_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 2 of focused refinement on NRP2-UL region | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 2 of overall pentamer-NRP2-dimer
ファイル | emd_25688_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 2 of overall pentamer-NRP2-dimer | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 1 of overall pentamer-NRP2-dimer
ファイル | emd_25688_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 1 of overall pentamer-NRP2-dimer | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Complex of 2x HCMV Pentamer proteins gH, gL, UL128, UL130, UL131A...
+超分子 #1: Complex of 2x HCMV Pentamer proteins gH, gL, UL128, UL130, UL131A...
+分子 #1: HCMV envelope glycoprotein H
+分子 #2: HCMV envelope glycoprotein L
+分子 #3: HCMV envelope glycoprotein UL128
+分子 #4: HCMV envelope glycoprotein UL130
+分子 #5: HCMV envelope glycoprotein UL131A
+分子 #6: Neuropilin-2
+分子 #7: Fab 8I21 heavy chain
+分子 #8: Fab 8I21 light chain
+分子 #9: Fab 13H11 heavy chain
+分子 #10: Fab 13H11 light chain
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: blot for 3.5 seconds before plunging. | |||||||||
詳細 | Sample was mildly crosslinked with 0.025% glutaraldehyde, incubated for 10 min at room temperature and quenched with 9 mM TRIS pH 7.5 |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 4 / 実像数: 21357 / 平均露光時間: 10.0 sec. / 平均電子線量: 52.0 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode at 4 frames/second. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 165000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |