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- EMDB-25686: CryoEM structure of the HCMV Pentamer gH/gL/UL128/UL130/UL131A in... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-25686
タイトルCryoEM structure of the HCMV Pentamer gH/gL/UL128/UL130/UL131A in complex with THBD and neutralizing fabs MSL-109 and 13H11
マップデータComposite map obtained by combining focused, sharpened maps. Map used for model building and refinements.
試料
  • 複合体: Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to 1x THBD and 2x fabs of human neutralizing antibodies MSL-109 and 13H11
    • タンパク質・ペプチド: x 10種
  • リガンド: x 1種
機能・相同性
機能・相同性情報


blood coagulation, common pathway / apicolateral plasma membrane / negative regulation of blood coagulation / serine-type endopeptidase complex / zymogen activation / vacuolar membrane / response to X-ray / negative regulation of platelet activation / negative regulation of fibrinolysis / Common Pathway of Fibrin Clot Formation ...blood coagulation, common pathway / apicolateral plasma membrane / negative regulation of blood coagulation / serine-type endopeptidase complex / zymogen activation / vacuolar membrane / response to X-ray / negative regulation of platelet activation / negative regulation of fibrinolysis / Common Pathway of Fibrin Clot Formation / response to cAMP / female pregnancy / Cell surface interactions at the vascular wall / transmembrane signaling receptor activity / blood coagulation / signaling receptor activity / host cell endosome / host cell Golgi apparatus / response to lipopolysaccharide / entry receptor-mediated virion attachment to host cell / symbiont entry into host cell / fusion of virus membrane with host plasma membrane / external side of plasma membrane / viral envelope / calcium ion binding / host cell plasma membrane / virion membrane / cell surface / proteolysis / extracellular space / membrane / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Thrombomodulin-like, EGF-like / Thrombomodulin like fifth domain, EGF-like / Betaherpesvirus glycoprotein L (gL) domain profile. / Herpesvirus UL130, cytomegalovirus / HCMV glycoprotein pUL130 / Cytomegalovirus glycoprotein L / Cytomegalovirus glycoprotein L / Herpesvirus glycoprotein H main domain / Herpesvirus glycoprotein H / Herpesvirus glycoprotein H, C-terminal ...Thrombomodulin-like, EGF-like / Thrombomodulin like fifth domain, EGF-like / Betaherpesvirus glycoprotein L (gL) domain profile. / Herpesvirus UL130, cytomegalovirus / HCMV glycoprotein pUL130 / Cytomegalovirus glycoprotein L / Cytomegalovirus glycoprotein L / Herpesvirus glycoprotein H main domain / Herpesvirus glycoprotein H / Herpesvirus glycoprotein H, C-terminal / Herpesvirus glycoprotein H, C-terminal domain superfamily / Herpesvirus glycoprotein H C-terminal domain / Complement Clr-like EGF domain / Complement Clr-like EGF-like / : / Calcium-binding EGF domain / Lectin C-type domain / C-type lectin domain profile. / C-type lectin-like / C-type lectin (CTL) or carbohydrate-recognition domain (CRD) / Coagulation Factor Xa inhibitory site / C-type lectin-like/link domain superfamily / C-type lectin fold / EGF-type aspartate/asparagine hydroxylation site / EGF-like calcium-binding, conserved site / Calcium-binding EGF-like domain signature. / Aspartic acid and asparagine hydroxylation site. / EGF-like calcium-binding domain / Calcium-binding EGF-like domain / Epidermal growth factor-like domain. / EGF-like domain profile. / Growth factor receptor cysteine-rich domain superfamily / EGF-like domain signature 2. / EGF-like domain
類似検索 - ドメイン・相同性
Envelope glycoprotein H / Thrombomodulin / UL128 / UL130 / Envelope glycoprotein L / UL131A
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト) / Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å
データ登録者Kschonsak M / Johnson MC / Schelling R / Green EM / Rouge L / Ho H / Patel N / Kilic C / Kraft E / Arthur CP ...Kschonsak M / Johnson MC / Schelling R / Green EM / Rouge L / Ho H / Patel N / Kilic C / Kraft E / Arthur CP / Rohou AL / Comps-Agrar L / Martinez-Martin N / Perez L / Payandeh J / Ciferri C
資金援助1件
OrganizationGrant number国
Not funded
引用ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022
タイトル: Structural basis for HCMV Pentamer receptor recognition and antibody neutralization.
著者: Marc Kschonsak / Matthew C Johnson / Rachel Schelling / Evan M Green / Lionel Rougé / Hoangdung Ho / Nidhi Patel / Cem Kilic / Edward Kraft / Christopher P Arthur / Alexis L Rohou / Laetitia ...著者: Marc Kschonsak / Matthew C Johnson / Rachel Schelling / Evan M Green / Lionel Rougé / Hoangdung Ho / Nidhi Patel / Cem Kilic / Edward Kraft / Christopher P Arthur / Alexis L Rohou / Laetitia Comps-Agrar / Nadia Martinez-Martin / Laurent Perez / Jian Payandeh / Claudio Ciferri /
要旨: Human cytomegalovirus (HCMV) represents the viral leading cause of congenital birth defects and uses the gH/gL/UL128-130-131A complex (Pentamer) to enter different cell types, including epithelial ...Human cytomegalovirus (HCMV) represents the viral leading cause of congenital birth defects and uses the gH/gL/UL128-130-131A complex (Pentamer) to enter different cell types, including epithelial and endothelial cells. Upon infection, Pentamer elicits the most potent neutralizing response against HCMV, representing a key vaccine candidate. Despite its relevance, the structural basis for Pentamer receptor recognition and antibody neutralization is largely unknown. Here, we determine the structures of Pentamer bound to neuropilin 2 (NRP2) and a set of potent neutralizing antibodies against HCMV. Moreover, we identify thrombomodulin (THBD) as a functional HCMV receptor and determine the structures of the Pentamer-THBD complex. Unexpectedly, both NRP2 and THBD also promote dimerization of Pentamer. Our results provide a framework for understanding HCMV receptor engagement, cell entry, antibody neutralization, and outline strategies for antiviral therapies against HCMV.
履歴
登録2021年12月10日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年3月23日-
マップ公開2022年3月23日-
更新2022年3月23日-
現状2022年3月23日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_25686.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_25686.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Composite map obtained by combining focused, sharpened maps. Map used for model building and refinements.
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.0726 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.15
最小 - 最大-0.47399116 - 3.5848255
平均 (標準偏差)0.0028422892 (±0.03619096)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 429.04 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Non-sharpened, full map of overall map (not focused).

ファイルemd_25686_additional_1.map
注釈Non-sharpened, full map of overall map (not focused).
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注釈Half map 1 of focused gH-gL (A) region.
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ファイルemd_25686_additional_11.map
注釈Half map 2 of focused gH-gL (A) region.
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追加マップ: Density modified map of focused gH-gL (A) map...

ファイルemd_25686_additional_12.map
注釈Density modified map of focused gH-gL (A) map used for generation of composite map.
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注釈Density modified map of focused THBD-ULs map used for generation of composite map.
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注釈Half map 1 of focused THBD-ULs region.
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ファイルemd_25686_additional_7.map
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追加マップ: Density modified map of focused gH-gL (B) map...

ファイルemd_25686_additional_8.map
注釈Density modified map of focused gH-gL (B) map used for generation of composite map.
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ファイルemd_25686_additional_9.map
注釈Non-sharpened, full map of focused gH-gL (A) region.
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試料の構成要素

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全体 : Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to...

全体名称: Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to 1x THBD and 2x fabs of human neutralizing antibodies MSL-109 and 13H11
要素
  • 複合体: Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to 1x THBD and 2x fabs of human neutralizing antibodies MSL-109 and 13H11
    • タンパク質・ペプチド: Thrombomodulin
    • タンパク質・ペプチド: Envelope glycoprotein H
    • タンパク質・ペプチド: Envelope glycoprotein L
    • タンパク質・ペプチド: Envelope protein UL128
    • タンパク質・ペプチド: Envelope glycoprotein UL130
    • タンパク質・ペプチド: Envelope protein UL131A
    • タンパク質・ペプチド: Fab 13H11 heavy chain
    • タンパク質・ペプチド: Fab 13H11 light chain
    • タンパク質・ペプチド: Fab MSL-109 light chain
    • タンパク質・ペプチド: Fab MSL-109 heavy chain
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

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超分子 #1: Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to...

超分子名称: Complex of 2x HCMV Pentamer gH, gL, UL128, UL130, UL131A bound to 1x THBD and 2x fabs of human neutralizing antibodies MSL-109 and 13H11
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#10
分子量理論値: 590 KDa

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分子 #1: Thrombomodulin

分子名称: Thrombomodulin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 55.128371 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MLGVLVLGAL ALAGLGFPAP AEPQPGGSQC VEHDCFALYP GPATFLNASQ ICDGLRGHLM TVRSSVAADV ISLLLNGDGG VGRRRLWIG LQLPPGCGDP KRLGPLRGFQ WVTGDNNTSY SRWARLDLNG APLCGPLCVA VSAAEATVPS EPIWEEQQCE V KADGFLCE ...文字列:
MLGVLVLGAL ALAGLGFPAP AEPQPGGSQC VEHDCFALYP GPATFLNASQ ICDGLRGHLM TVRSSVAADV ISLLLNGDGG VGRRRLWIG LQLPPGCGDP KRLGPLRGFQ WVTGDNNTSY SRWARLDLNG APLCGPLCVA VSAAEATVPS EPIWEEQQCE V KADGFLCE FHFPATCRPL AVEPGAAAAA VSITYGTPFA ARGADFQALP VGSSAAVAPL GLQLMCTAPP GAVQGHWARE AP GAWDCSV ENGGCEHACN AIPGAPRCQC PAGAALQADG RSCTASATQS CNDLCEHFCV PNPDQPGSYS CMCETGYRLA ADQ HRCEDV DDCILEPSPC PQRCVNTQGG FECHCYPNYD LVDGECVEPV DPCFRANCEY QCQPLNQTSY LCVCAEGFAP IPHE PHRCQ MFCNQTACPA DCDPNTQASC ECPEGYILDD GFICTDIDEC ENGGFCSGVC HNLPGTFECI CGPDSALARH IGTDC DSGK VDGGDSGSGE PPPSPTPGST LTPPAVGLVH SGGNSDYKDD DDK

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分子 #2: Envelope glycoprotein H

分子名称: Envelope glycoprotein H / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
分子量理論値: 87.311273 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MRPGLPSYLI ILAVCLFSHL LSSRYGAEAV SEPLDKAFHL LLNTYGRPIR FLRENTTQCT YNSSLRNSTV VRENAISFNF FQSYNQYYV FHMPRCLFAG PLAEQFLNQV DLTETLERYQ QRLNTYALVS KDLASYRSFS QQLKAQDSLG EQPTTVPPPI D LSIPHVWM ...文字列:
MRPGLPSYLI ILAVCLFSHL LSSRYGAEAV SEPLDKAFHL LLNTYGRPIR FLRENTTQCT YNSSLRNSTV VRENAISFNF FQSYNQYYV FHMPRCLFAG PLAEQFLNQV DLTETLERYQ QRLNTYALVS KDLASYRSFS QQLKAQDSLG EQPTTVPPPI D LSIPHVWM PPQTTPHGWT ESHTTSGLHR PHFNQTCILF DGHDLLFSTV TPCLHQGFYL IDELRYVKIT LTEDFFVVTV SI DDDTPML LIFGHLPRVL FKAPYQRDNF ILRQTEKHEL LVLVKKDQLN RHSYLKDPDF LDAALDFNYL DLSALLRNSF HRY AVDVLK SGRCQMLDRR TVEMAFAYAL ALFAAARQEE AGAQVSVPRA LDRQAALLQI QEFMITCLSQ TPPRTTLLLY PTAV DLAKR ALWTPNQITD ITSLVRLVYI LSKQNQQHLI PQWALRQIAD FALKLHKTHL ASFLSAFARQ ELYLMGSLVH SMLVH TTER REIFIVETGL CSLAELSHFT QLLAHPHHEY LSDLYTPCSS SGRRDHSLER LTRLFPDATV PATVPAALSI LSTMQP STL ETFPDLFCLP LGESFSALTV SEHVSYIVTN QYLIKGISYP VSTTVVGQSL IITQTDSQTK CELTRNMHTT HSITVAL NI SLENCAFCQS ALLEYDDTQG VINIMYMHDS DDVLFALDPY NEVVVSSPRT HYLMLLKNGT VLEVTDVVVD ATDGTKLG P EQKLISEEDL NSAVDGSGLN DIFEAQKIEW HENLYFQGHH HHHHHH

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分子 #3: Envelope glycoprotein L

分子名称: Envelope glycoprotein L / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
分子量理論値: 30.846492 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MCRRPDCGFS FSPGPVILLW CCLLLPIVSS AAVSVAPTAA EKVPAECPEL TRRCLLGEVF EGDKYESWLR PLVNVTGRDG PLSQLIRYR PVTPEAANSV LLDEAFLDTL ALLYNNPDQL RALLTLLSSD TAPRWMTVMR GYSECGDGSP AVYTCVDDLC R GYDLTRLS ...文字列:
MCRRPDCGFS FSPGPVILLW CCLLLPIVSS AAVSVAPTAA EKVPAECPEL TRRCLLGEVF EGDKYESWLR PLVNVTGRDG PLSQLIRYR PVTPEAANSV LLDEAFLDTL ALLYNNPDQL RALLTLLSSD TAPRWMTVMR GYSECGDGSP AVYTCVDDLC R GYDLTRLS YGRSIFTEHV LGFELVPPSL FNVVVAIRNE ATRTNRAVRL PVSTAAAPEG ITLFYGLYNA VKEFCLRHQL DP PLLRHLD KYYAGLPPEL KQTRVNLPAH SRYGPQAVDA R

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分子 #4: Envelope protein UL128

分子名称: Envelope protein UL128 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
分子量理論値: 19.746023 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
MSPKNLTPFL TALWLLLGHS RVPRVRAEEC CEFINVNHPP ERCYDFKMCN RFTVALRCPD GEVCYSPEKT AEIRGIVTTM THSLTRQVV HNKLTSCNYN PLYLEADGRI RCGKVNDKAQ YLLGAAGSVP YRWINLEYDK ITRIVGLDQY LESVKKHKRL D VCRAKMGY MLQ

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分子 #5: Envelope glycoprotein UL130

分子名称: Envelope glycoprotein UL130 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
分子量理論値: 28.866811 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MLRLLLRHHF HCLLLCAVWA TPCLASPWFT LTANQNPSPP WSKLTYPKPH DAATFYCPFL YPSPPRSPSQ FSGFQRVSTG PECRNETLY LLYNREGQTL VERSSTWVKK VIWYLSGRNQ TILQRMPRTA SKPSDGNVQI SVEDAKIFGA HMVPKQTKLL R FVVNDGTR ...文字列:
MLRLLLRHHF HCLLLCAVWA TPCLASPWFT LTANQNPSPP WSKLTYPKPH DAATFYCPFL YPSPPRSPSQ FSGFQRVSTG PECRNETLY LLYNREGQTL VERSSTWVKK VIWYLSGRNQ TILQRMPRTA SKPSDGNVQI SVEDAKIFGA HMVPKQTKLL R FVVNDGTR YQMCVMKLES WAHVFRDYSV SFQVRLTFTE ANNQTYTFCT HPNLIVGSEN LYFQGSAWSH PQFEKGGGSG GG SGGGSAW SHPQFEK

+
分子 #6: Envelope protein UL131A

分子名称: Envelope protein UL131A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス)
分子量理論値: 15.011043 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
MRLCRVWLSV CLCAVVLGQC QRETAEKNDY YRVPHYWDAC SRALPDQTRY KYVEQLVDLT LNYHYDASHG LDNFDVLKRI NVTEVSLLI SDFRRQNRRG GTNKRTTFNA AGSLAPHARS LEFSVRLFAN

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分子 #7: Fab 13H11 heavy chain

分子名称: Fab 13H11 heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 26.600086 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAQVQLVQS GAEVKKPGAS VKVSCKASGY TFTNYYIHWV RQAPGQGLEW MGIIHPSSGG TSYAQKFQG RVTMTRDTST STVSMDLSSL RSEDTAVYYC GRAFRILGLS DVFVNDWGQG TVVTVSSAST KGPSVFPLAP S SKSTSGGT ...文字列:
MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAQVQLVQS GAEVKKPGAS VKVSCKASGY TFTNYYIHWV RQAPGQGLEW MGIIHPSSGG TSYAQKFQG RVTMTRDTST STVSMDLSSL RSEDTAVYYC GRAFRILGLS DVFVNDWGQG TVVTVSSAST KGPSVFPLAP S SKSTSGGT AALGCLVKDY FPEPVTVSWN SGALTSGVHT FPAVLQSSGL YSLSSVVTVP SSSLGTQTYI CNVNHKPSNT KV DKKVEPK SCD

+
分子 #8: Fab 13H11 light chain

分子名称: Fab 13H11 light chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 8 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 25.78002 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYADIQMTQS PSSLSASVGD RVTITCRASQ GINNYLAWYQ QKPGKVPKLL IYAASTLQSG VPSRFSGSG SGTAFTLTIL SLQPEDVATY YCQKYNSAPF TFGPGTKVDI KRTVAAPSVF IFPPSDEQLK SGTASVVCLL N NFYPREAK ...文字列:
MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYADIQMTQS PSSLSASVGD RVTITCRASQ GINNYLAWYQ QKPGKVPKLL IYAASTLQSG VPSRFSGSG SGTAFTLTIL SLQPEDVATY YCQKYNSAPF TFGPGTKVDI KRTVAAPSVF IFPPSDEQLK SGTASVVCLL N NFYPREAK VQWKVDNALQ SGNSQESVTE QDSKDSTYSL SSTLTLSKAD YEKHKVYACE VTHQGLSSPV TKSFNRGEC

+
分子 #9: Fab MSL-109 light chain

分子名称: Fab MSL-109 light chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 9 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 28.355809 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYADIVMTQS PLSLSVTPGE PASISCRSSQ SLLHTNGYNY LDWYVQKPGQ SPQLLIYLAS NRASGVPDR FSGSGSGTDF TLKISRVETE DVGVYYCMQA LQIPRTFGQG TKVEIKRTVA APSVFIFPPS DEQLKSGTAS V VCLLNNFY ...文字列:
MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYADIVMTQS PLSLSVTPGE PASISCRSSQ SLLHTNGYNY LDWYVQKPGQ SPQLLIYLAS NRASGVPDR FSGSGSGTDF TLKISRVETE DVGVYYCMQA LQIPRTFGQG TKVEIKRTVA APSVFIFPPS DEQLKSGTAS V VCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RG ECGLNDI FEAQKIEWHE

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分子 #10: Fab MSL-109 heavy chain

分子名称: Fab MSL-109 heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 10 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 27.547818 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAEEQVLES GGGLVKPGGS LRLSCAASGF TFSPYSVFWV RQAPGKGLEW VSSINSDSTY KYYADSVKG RFTISRDNAE NSIFLQMNSL RAEDTAVYYC ARDRSYYAFS SGSLSDYYYG LDVWGQGTLV TVSSASTKGP S VFPLAPSS ...文字列:
MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAEEQVLES GGGLVKPGGS LRLSCAASGF TFSPYSVFWV RQAPGKGLEW VSSINSDSTY KYYADSVKG RFTISRDNAE NSIFLQMNSL RAEDTAVYYC ARDRSYYAFS SGSLSDYYYG LDVWGQGTLV TVSSASTKGP S VFPLAPSS KSTSGGTAAL GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NH KPSNTKV DKKVEPKSCD

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分子 #11: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

分子名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 11 / コピー数: 14 / 式: NAG
分子量理論値: 221.208 Da
Chemical component information

ChemComp-NAG:
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-アセチル-β-D-グルコサミン

-
実験情報

-
構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

-
試料調製

濃度0.6 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度式名称
300.0 mMNaClsodium chloride
25.0 mMHEPESHEPES
グリッドモデル: UltrAuFoil R0.6/1 / 材質: GOLD / メッシュ: 300
詳細: The grid was incubated with a thiol reactive self-assembling reaction mixture of 4mM monothiolalkane(C11)PEG6-OH (11-mercaptoundecyl) hexaethyleneglycol, (SPT-0011P6, SensoPath Technologies, ...詳細: The grid was incubated with a thiol reactive self-assembling reaction mixture of 4mM monothiolalkane(C11)PEG6-OH (11-mercaptoundecyl) hexaethyleneglycol, (SPT-0011P6, SensoPath Technologies, Inc., Bozeman, MT)[23]. Grids were incubated with this self-assembled, monolayer (SAM) solution for 24 hours. Prior to grid freezing, grids were removed from the SAM solution and rinsed with EtOH.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: blot for 3.5s before plunging.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 10926 / 平均電子線量: 64.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm / 倍率（公称値）: 105000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Movie frames were corrected for motion and aligned. Images with a CTF fit resolution of 5.0 A or better were selected for particle picking.
粒子像選択選択した数: 10680163
CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 4.1.13)
初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: ab-initio using C2 symmetry in cisTEM
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cisTEM (ver. 1.02)
詳細: A composite map was generated from the three individual focused 3D maps.
使用した粒子像数: 504492
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: OTHER
詳細: Manual refine in cisTEM. Map was divided in 3 sections to refine map with focused refinements.
最終 3次元分類クラス数: 27 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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