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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-25385 | |||||||||
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タイトル | Structure of the human proton-activated chloride channel ASOR in desensitized conformation | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | pH-gated chloride channel activity / TMEM206 protein / TMEM206 protein family / chloride transport / chloride channel complex / cell surface / plasma membrane / Proton-activated chloride channel 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Long SB / Wang C / Delgado B | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022 タイトル: Gating choreography and mechanism of the human proton-activated chloride channel ASOR. 著者: Chongyuan Wang / Maya M Polovitskaya / Bryce D Delgado / Thomas J Jentsch / Stephen B Long / 要旨: The proton-activated chloride channel ASOR (TMEM206/PAC) permeates anions across cellular membranes in response to acidification, thereby enhancing acid-induced cell death and regulating endocytosis. ...The proton-activated chloride channel ASOR (TMEM206/PAC) permeates anions across cellular membranes in response to acidification, thereby enhancing acid-induced cell death and regulating endocytosis. The molecular mechanisms of pH-dependent control are not understood, in part because structural information for an activated conformation of ASOR is lacking. Here, we reconstitute function from purified protein and present a 3.1-Å-resolution cryo-electron microscopy structure of human ASOR at acidic pH in an activated conformation. The work contextualizes a previous acidic pH structure as a desensitized conformation. Combined with electrophysiological studies and high-resolution structures of resting and desensitized states, the work reveals mechanisms of proton sensing and ion pore gating. Clusters of extracellular acidic residues function as pH sensors and coalesce when protonated. Ensuing conformational changes induce metamorphosis of transmembrane helices to fashion an ion conduction pathway unique to the activated conformation. The studies identify a new paradigm of channel gating in this ubiquitous ion channel. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_25385.map.gz | 153.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-25385-v30.xml emd-25385.xml | 15.6 KB 15.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_25385.png | 75.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25385 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25385 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_25385_validation.pdf.gz | 315.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_25385_full_validation.pdf.gz | 315.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_25385_validation.xml.gz | 6.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_25385_validation.cif.gz | 7.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25385 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25385 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_25385.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.83125 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : proton activated chloride channel TMEM206 in resting conformation
全体 | 名称: proton activated chloride channel TMEM206 in resting conformation |
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要素 |
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-超分子 #1: proton activated chloride channel TMEM206 in resting conformation
超分子 | 名称: proton activated chloride channel TMEM206 in resting conformation タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: Expi293, Invitrogen |
-分子 #1: Proton-activated chloride channel
分子 | 名称: Proton-activated chloride channel / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 40.092047 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MIRQERSTSY QELSEELVQV VENSELADEQ DKETVRVQGP GILPGLDSES ASSSIRFSKA CLKNVFSVLL IFIYLLLMAV AVFLVYRTI TDFREKLKHP VMSVSYKEVD RYDAPGIALY PGQAQLLSCK HHYEVIPPLT SPGQPGDMNC TTQRINYTDP F SNQTVKSA ...文字列: MIRQERSTSY QELSEELVQV VENSELADEQ DKETVRVQGP GILPGLDSES ASSSIRFSKA CLKNVFSVLL IFIYLLLMAV AVFLVYRTI TDFREKLKHP VMSVSYKEVD RYDAPGIALY PGQAQLLSCK HHYEVIPPLT SPGQPGDMNC TTQRINYTDP F SNQTVKSA LIVQGPREVK KRELVFLQFR LNKSSEDFSA IDYLLFSSFQ EFLQSPNRVG FMQACESAYS SWKFSGGFRT WV KMSLVKT KEEDGREAVE FRQETSVVNY IDQRPAAKKS AQLFFVVFEW KDPFIQKVQD IVTANPWNTI ALLCGAFLAL FKA AEFAKL SIKWMIKIRK RYLKRRGQAT SHIS |
-分子 #2: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 12 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ChemComp-NAG: |
-分子 #3: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 21 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.6 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 4.5 構成要素:
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 2 second blot, blot force of 0. | ||||||||||||
詳細 | Monodisperse sample |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-40 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 157906 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 71.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): -3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): -1.0 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 温度因子: 30 / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |
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得られたモデル | PDB-7sqh: |