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万見
- EMDB-2321: The bacterial DnaC helicase loader is a DnaB ring breaker -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-2321
タイトルThe bacterial DnaC helicase loader is a DnaB ring breaker
マップデータNegative staining reconstruction of E. coli DnaB/DnaC complex
試料
  • 試料: E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor
  • タンパク質・ペプチド: DnaB replicative helicase
  • タンパク質・ペプチド: DnaC helicase loading factor
キーワードBacterial DNA replication / DNA replication initiation / helicase / helicase loader / DnaB / DnaC / electron microscopy / SAXS / clamp loader / structure
機能・相同性
機能・相同性情報


DnaB-DnaC complex / DnaB-DnaC-Rep-PriC complex / DnaB-DnaG complex / DnaB-DnaC-DnaT-PriA-PriC complex / DnaB-DnaC-DnaT-PriA-PriB complex / DNA helicase complex / primosome complex / DNA 5'-3' helicase / DNA replication, synthesis of primer / replisome ...DnaB-DnaC complex / DnaB-DnaC-Rep-PriC complex / DnaB-DnaG complex / DnaB-DnaC-DnaT-PriA-PriC complex / DnaB-DnaC-DnaT-PriA-PriB complex / DNA helicase complex / primosome complex / DNA 5'-3' helicase / DNA replication, synthesis of primer / replisome / response to ionizing radiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / replication fork processing / DNA replication initiation / DNA helicase activity / isomerase activity / helicase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / 5'-3' DNA helicase activity / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / double-stranded DNA helicase activity / forked DNA-dependent helicase activity / four-way junction helicase activity / DNA replication / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / cytosol
類似検索 - 分子機能
DNA replication protein DnaC/insertion sequence putative ATP-binding protein / IstB-like ATP-binding protein / IstB-like ATP binding protein / DNA helicase, DnaB type / DNA helicase, DnaB type / DNA helicase, DnaB-like, N-terminal / DnaB-like helicase N terminal domain / DNA helicase, DnaB-like, N-terminal domain superfamily / DNA helicase DnaB, N-terminal/DNA primase DnaG, C-terminal / DnaB-like helicase C terminal domain ...DNA replication protein DnaC/insertion sequence putative ATP-binding protein / IstB-like ATP-binding protein / IstB-like ATP binding protein / DNA helicase, DnaB type / DNA helicase, DnaB type / DNA helicase, DnaB-like, N-terminal / DnaB-like helicase N terminal domain / DNA helicase, DnaB-like, N-terminal domain superfamily / DNA helicase DnaB, N-terminal/DNA primase DnaG, C-terminal / DnaB-like helicase C terminal domain / DNA helicase, DnaB-like, C-terminal / Superfamily 4 helicase domain profile. / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Replicative DNA helicase DnaB / Replicative helicase loader DnaC
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 25.0 Å
データ登録者Arias-Palomo E / O'Shea VL / Hood IV / Berger JM
引用ジャーナル: Cell / 年: 2013
タイトル: The bacterial DnaC helicase loader is a DnaB ring breaker.
著者: Ernesto Arias-Palomo / Valerie L O'Shea / Iris V Hood / James M Berger /
要旨: Dedicated AAA+ ATPases deposit hexameric ring-shaped helicases onto DNA to promote replication in cellular organisms. To understand how loading occurs, we used electron microscopy and small angle X- ...Dedicated AAA+ ATPases deposit hexameric ring-shaped helicases onto DNA to promote replication in cellular organisms. To understand how loading occurs, we used electron microscopy and small angle X-ray scattering (SAXS) to determine the ATP-bound structure of the intact E. coli DnaB⋅DnaC helicase/loader complex. The 480 kDa dodecamer forms a three-tiered assembly, in which DnaC adopts a spiral configuration that remodels N-terminal scaffolding and C-terminal motor regions of DnaB to produce a clear break in the helicase ring. Surprisingly, DnaC's AAA+ fold is dispensable for ring remodeling because the DnaC isolated helicase-binding domain can both load DnaB onto DNA and increase the efficiency by which the helicase acts on substrates in vitro. Our data demonstrate that DnaC opens DnaB by a mechanism akin to that of polymerase clamp loaders and indicate that bacterial replicative helicases, like their eukaryotic counterparts, possess autoregulatory elements that influence how hexameric motor domains are loaded onto and unwind DNA.
履歴
登録2013年2月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2013年3月13日-
マップ公開2013年4月17日-
更新2013年4月24日-
現状2013年4月24日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_2321.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_2321.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Negative staining reconstruction of E. coli DnaB/DnaC complex
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
4.36 Å/pix.
x 80 pix.
= 348.8 Å		4.36 Å/pix.
x 80 pix.
= 348.8 Å		4.36 Å/pix.
x 80 pix.
= 348.8 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 4.36 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 3.0 / ムービー #1: 3
最小 - 最大-5.65025902 - 13.01332378
平均 (標準偏差)0.0 (±0.99999899)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ808080
Spacing808080
セルA=B=C: 348.80002 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z4.364.364.36
M x/y/z808080
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z348.800348.800348.800
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-36-12-40
NX/NY/NZ732581
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS808080
D min/max/mean-5.65013.0130.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor

全体名称: E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor
要素
  • 試料: E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor
  • タンパク質・ペプチド: DnaB replicative helicase
  • タンパク質・ペプチド: DnaC helicase loading factor

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超分子 #1000: E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor

超分子名称: E. coli DnaB helicase bound to the DnaC loading factor
タイプ: sample / ID: 1000
集合状態: One homohexamer of DnaB binds to one homohexamer of DnaC
Number unique components: 2
分子量理論値: 480 KDa

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分子 #1: DnaB replicative helicase

分子名称: DnaB replicative helicase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Replicative DNA helicase / コピー数: 6 / 集合状態: hexamer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 52 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列UniProtKB: Replicative DNA helicase DnaB / InterPro: DNA helicase, DnaB type

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分子 #2: DnaC helicase loading factor

分子名称: DnaC helicase loading factor / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: DNA replication protein DnaC / コピー数: 6 / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 28 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列UniProtKB: Replicative helicase loader DnaC

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実験情報

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構造解析

手法ネガティブ染色法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 8.5
詳細: 20 mM Tris-HCl pH 8.5, 200 mM NaCl, 5 % glycerol, 5 mM MgCl2, 1 mM beta-mercaptoethanol, and 1 mM ADP-BeF3
染色タイプ: NEGATIVE
詳細: Grids with adsorbed protein were floated on 2% w/v uranyl formate for 45 seconds
グリッド詳細: 400 mesh copper grid with thin carbon support, glow discharged for 20 seconds
凍結凍結剤: NONE / 装置: OTHER

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI 12
温度平均: 297 K
日付2011年1月21日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: GENERIC TVIPS (4k x 4k)
平均電子線量: 25 e/Å2
電子線加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 6.3 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.7 µm / 倍率（公称値）: 49000
試料ステージ試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC

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画像解析

詳細The particles were selected using DoG picker as available in APPION. The contrast transfer function of the microscope for each micrograph was estimated using CTFFIND3 and phase-flipped using SPIDER. DnaBC particles were subjected to a multi-model refinement as implemented in SPARX using the 3D averages obtained from the RCT reconstructions as initial references.
CTF補正詳細: Each micrograph
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 25.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2, SPARX / 使用した粒子像数: 17942

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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