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万見
- EMDB-20617: EM map of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20617
タイトルEM map of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex
マップデータMPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, sharpened map
試料
  • 複合体: Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore
    • タンパク質・ペプチド: Macrophage-Expressed Gene 1 protein (MPEG-1)
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å
データ登録者Pang SS / Bayly-Jones C
資金援助 オーストラリア, 1件
OrganizationGrant number国
Australian Research Council オーストラリア
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019
タイトル: The cryo-EM structure of the acid activatable pore-forming immune effector Macrophage-expressed gene 1.
著者: Siew Siew Pang / Charles Bayly-Jones / Mazdak Radjainia / Bradley A Spicer / Ruby H P Law / Adrian W Hodel / Edward S Parsons / Susan M Ekkel / Paul J Conroy / Georg Ramm / Hariprasad ...著者: Siew Siew Pang / Charles Bayly-Jones / Mazdak Radjainia / Bradley A Spicer / Ruby H P Law / Adrian W Hodel / Edward S Parsons / Susan M Ekkel / Paul J Conroy / Georg Ramm / Hariprasad Venugopal / Phillip I Bird / Bart W Hoogenboom / Ilia Voskoboinik / Yann Gambin / Emma Sierecki / Michelle A Dunstone / James C Whisstock /
要旨: Macrophage-expressed gene 1 (MPEG1/Perforin-2) is a perforin-like protein that functions within the phagolysosome to damage engulfed microbes. MPEG1 is thought to form pores in target membranes, ...Macrophage-expressed gene 1 (MPEG1/Perforin-2) is a perforin-like protein that functions within the phagolysosome to damage engulfed microbes. MPEG1 is thought to form pores in target membranes, however, its mode of action remains unknown. We use cryo-Electron Microscopy (cryo-EM) to determine the 2.4 Å structure of a hexadecameric assembly of MPEG1 that displays the expected features of a soluble prepore complex. We further discover that MPEG1 prepore-like assemblies can be induced to perforate membranes through acidification, such as would occur within maturing phagolysosomes. We next solve the 3.6 Å cryo-EM structure of MPEG1 in complex with liposomes. These data reveal that a multi-vesicular body of 12 kDa (MVB12)-associated β-prism (MABP) domain binds membranes such that the pore-forming machinery of MPEG1 is oriented away from the bound membrane. This unexpected mechanism of membrane interaction suggests that MPEG1 remains bound to the phagolysosome membrane while simultaneously forming pores in engulfed bacterial targets.
履歴
登録2019年8月19日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年9月25日-
マップ公開2019年9月25日-
更新2020年11月25日-
現状2020年11月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.035
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.035
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_20617.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20617.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 149.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, sharpened map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.1 Å/pix.
x 340 pix.
= 374. Å		1.1 Å/pix.
x 340 pix.
= 374. Å		1.1 Å/pix.
x 340 pix.
= 374. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.1 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.035 / ムービー #1: 0.035
最小 - 最大-0.16101511 - 0.27217007
平均 (標準偏差)0.0009211707 (±0.010345885)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ340340340
Spacing340340340
セルA=B=C: 374.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.11.11.1
M x/y/z340340340
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z374.000374.000374.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ172172172
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS340340340
D min/max/mean-0.1610.2720.001

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_20617_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, unsharpened map

ファイルemd_20617_additional.map
注釈MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, unsharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
追加マップ: MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, unsharpened map

ファイルemd_20617_additional_1.map
注釈MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, unsharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, half map #1

ファイルemd_20617_half_map_1.map
注釈MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, half map #1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, half map #2

ファイルemd_20617_half_map_2.map
注釈MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore complex, half map #2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore

全体名称: Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore
要素
  • 複合体: Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore
    • タンパク質・ペプチド: Macrophage-Expressed Gene 1 protein (MPEG-1)

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超分子 #1: Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore

超分子名称: Head-to-head assembly of MPEG-1 (w.t.) soluble pre-pore
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
分子量理論値: 2.3 MDa

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分子 #1: Macrophage-Expressed Gene 1 protein (MPEG-1)

分子名称: Macrophage-Expressed Gene 1 protein (MPEG-1) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: KSGKPSGEMD EVGVQKCKNA LKLPVLEVLP GGGWDNLRNV DMGRVMELTY SNCRTTEDGQ YIIPDEIFTI PQKQSNLEMN SEILESWANY QSSTSYSINT ELSLFSKVNG KFSTEFQRMK TLQVKDQAIT TRVQVRNLVY TVKINPTLEL SSGFRKELLD ISDRLENNQT ...文字列:
KSGKPSGEMD EVGVQKCKNA LKLPVLEVLP GGGWDNLRNV DMGRVMELTY SNCRTTEDGQ YIIPDEIFTI PQKQSNLEMN SEILESWANY QSSTSYSINT ELSLFSKVNG KFSTEFQRMK TLQVKDQAIT TRVQVRNLVY TVKINPTLEL SSGFRKELLD ISDRLENNQT RMATYLAELL VLNYGTHVTT SVDAGAALIQ EDHLRASFLQ DSQSSRSAVT ASAGLAFQNT VNFKFEENYT SQNVLTKSYL SNRTNSRVQS IGGVPFYPGI TLQAWQQGIT NHLVAIDRSG LPLHFFINPN MLPDLPGPLV KKVSKTVETA VKRYYTFNTY PGCTDLNSPN FNFQANTDDG SCEGKMTNFS FGGVYQECTQ LSGNRDVLLC QKLEQKNPLT GDFSCPSGYS PVHLLSQIHE EGYNHLECHR KCTLLVFCKT VCEDVFQVAK AEFRAFWCVA SSQVPENSGL LFGGLFSSKS INPMTNAQSC PAGYFPLRLF ENLKVCVSQD YELGSRFAVP FGGFFSCTVG NPLVDPAISR DLGAPSLKKC PGGFSQHPAL ISDGCQVSYC VKSGLFTGGS LPPARLPPFT RPPLMSQAAT NTVIVTNSEN ARSWIKDSQT HQWRLGEPIE LRRAMNVIHG DGGGLSHHHH HH

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2 mg/mL
緩衝液pH: 7.2
グリッド詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
平均電子線量: 45.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: D16 (2回x16回 2面回転対称)
解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 25359
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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