+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20040 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Precursor ribosomal RNA processing complex, State 2. | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | Complex / Ribonuclease / Polynucleotide kinase / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / Las1 complex / RNA processing / rRNA processing / endonuclease activity / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Chaetomium thermophilum (菌類) / Chaetomium thermophilum (strain DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719) (菌類) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Pillon MC / Hsu AL | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2019 タイトル: Cryo-EM reveals active site coordination within a multienzyme pre-rRNA processing complex. 著者: Monica C Pillon / Allen L Hsu / Juno M Krahn / Jason G Williams / Kevin H Goslen / Mack Sobhany / Mario J Borgnia / Robin E Stanley / 要旨: Ribosome assembly is a complex process reliant on the coordination of trans-acting enzymes to produce functional ribosomal subunits and secure the translational capacity of cells. The ...Ribosome assembly is a complex process reliant on the coordination of trans-acting enzymes to produce functional ribosomal subunits and secure the translational capacity of cells. The endoribonuclease (RNase) Las1 and the polynucleotide kinase (PNK) Grc3 assemble into a multienzyme complex, herein designated RNase PNK, to orchestrate processing of precursor ribosomal RNA (rRNA). RNase PNK belongs to the functionally diverse HEPN nuclease superfamily, whose members rely on distinct cues for nuclease activation. To establish how RNase PNK coordinates its dual enzymatic activities, we solved a series of cryo-EM structures of Chaetomium thermophilum RNase PNK in multiple conformational states. The structures reveal that RNase PNK adopts a butterfly-like architecture, harboring a composite HEPN nuclease active site flanked by discrete RNA kinase sites. We identify two molecular switches that coordinate nuclease and kinase function. Together, our structures and corresponding functional studies establish a new mechanism of HEPN nuclease activation essential for ribosome production. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20040.map.gz | 39.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-20040-v30.xml emd-20040.xml | 12.1 KB 12.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_20040.png | 95.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-20040.cif.gz | 5.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20040 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20040 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_20040_validation.pdf.gz | 487.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_20040_full_validation.pdf.gz | 487.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_20040_validation.xml.gz | 6.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_20040_validation.cif.gz | 7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20040 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20040 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20040.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 42.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Precursor Ribosomal RNA Processing Complex
全体 | 名称: Precursor Ribosomal RNA Processing Complex |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Precursor Ribosomal RNA Processing Complex
超分子 | 名称: Precursor Ribosomal RNA Processing Complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 詳細: Precursor Ribosomal RNA Processing Complex coordinates removal of a transcribed spacer. |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (菌類) |
分子量 | 理論値: 234 KDa |
-分子 #1: Ribonuclease
分子 | 名称: Ribonuclease / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (strain DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719) (菌類) 株: DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719 |
分子量 | 理論値: 43.842871 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSYYHHHHHH DYDIPTTENL YFQGAMGSMV QYIFTPWRNR AELLAVRAQF YPEHTSKTHL KKHHQSTFQD DEHIRSEKQK AVARVSMWM QRGGCPHMVE STALLVAAIL SDEAQGSGAA GGYAVRAAYS AAFSRFVTGL LDSHQDKQRK QSMYDVAKAV G LPAAFVEL ...文字列: MSYYHHHHHH DYDIPTTENL YFQGAMGSMV QYIFTPWRNR AELLAVRAQF YPEHTSKTHL KKHHQSTFQD DEHIRSEKQK AVARVSMWM QRGGCPHMVE STALLVAAIL SDEAQGSGAA GGYAVRAAYS AAFSRFVTGL LDSHQDKQRK QSMYDVAKAV G LPAAFVEL RHQATHEQLP SLTRLRSAAR RALEWIWWYY WKGLGPVDMV QRGVNGKGVA GVGDTSESEE KDVGEEGGDA AA RCREGVV RLLESDVRVG GEAINGPGKE ELLAEFGEAL VLTTLDAAAG NTRDVGVLRR AIGLMREIVN GGDEDCMQLE NGK GNRDVE KLKEELKKGW EEIKRLAQEK EDSGDDQTED EDVDMEAEEE DKKEQQSGWV LYDEKEWVPK PIGIV UniProtKB: Uncharacterized protein |
-分子 #2: CLP1_P domain-containing protein
分子 | 名称: CLP1_P domain-containing protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (strain DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719) (菌類) 株: DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719 |
分子量 | 理論値: 69.660539 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MHHSSFQPNN SNFQRKAGGR LVLSTPDVER FVILGNYGVK VHQGEVTIAG ATLTPIDDVQ WVHAPHCHAL PVLRTANDTV IELLPCPTA QGLRELARLN PLFGRLWNET SDTFQIIYTS ADAPKRTSLR ELASHPAWNK KISELLTSTR RKPSPILFIC G PKSSGKST ...文字列: MHHSSFQPNN SNFQRKAGGR LVLSTPDVER FVILGNYGVK VHQGEVTIAG ATLTPIDDVQ WVHAPHCHAL PVLRTANDTV IELLPCPTA QGLRELARLN PLFGRLWNET SDTFQIIYTS ADAPKRTSLR ELASHPAWNK KISELLTSTR RKPSPILFIC G PKSSGKST FGRLLTNRLM TDRAGHKSRS WKPVMVLDLD PGQPEFSPPG VVSLTKLRRP NLAPPFCHPG LSFGEKGLDG GN EGMTTVR MHAIASVTPA LDPAHFIACA RDLFAYYRRS ASQENIPLVV NTPGWIQGTG LDLLAELIAV LRPTEVLYMS EDG PEETVS ALREACASSS TIPFTMLPSQ PNSSGEGGGG GAASWTPATL RSMAMQSYFH LSPFSRDQQG GPGCEWNPTP LTHL CPWRV RLAGRPDERG VLGIVCYDHQ YAPELVSDAI NGMVMGLVRI EKKEALRGLA VPGDTSLSFT SSTSQGGCDD ELDSD SNSS SAPSFTSSSP SHLNSTPLLP LIPNPTGSPL SPQYTSLVGL VLIRGVSLTA SNPELHLLTP VPPSVLHSFR GDELVL VAG KFDAPTWAYV EGLYWKSNSK AAKRVDEERE DEDREESGGV EEEEEQDEVP WVEMLHGSAG RDVGSRVWRV RRDLGRS UniProtKB: Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase GRC3 |
-分子 #3: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER
分子 | 名称: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 2 / 式: AGS |
---|---|
分子量 | 理論値: 523.247 Da |
Chemical component information | ChemComp-AGS: |
-分子 #4: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: MG |
---|---|
分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: NITROGEN |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
---|---|
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 70561 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |