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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1883 | |||||||||
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タイトル | Three-dimensional structure of the RNA polymerase II-Iwr1 complex | |||||||||
![]() | This is a map of the RNA Polymerase II-Iwr1 complex. | |||||||||
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![]() | transcription / Pol II / nuclear import | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 20.9 Å | |||||||||
![]() | Czeko E / Seizl M / Augsberger C / Mielke T / Cramer P | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Iwr1 directs RNA polymerase II nuclear import. 著者: Elmar Czeko / Martin Seizl / Christian Augsberger / Thorsten Mielke / Patrick Cramer / ![]() 要旨: RNA polymerase (Pol) II transcribes protein-coding genes in the nucleus of eukaryotic cells and consists of 12 polypeptide subunits. It is unknown how Pol II is imported into the nucleus. Here we ...RNA polymerase (Pol) II transcribes protein-coding genes in the nucleus of eukaryotic cells and consists of 12 polypeptide subunits. It is unknown how Pol II is imported into the nucleus. Here we show that Pol II nuclear import requires the protein Iwr1 and provide evidence for cyclic Iwr1 function. Iwr1 binds Pol II in the active center cleft between the two largest subunits, maybe facilitating or sensing complete Pol II assembly in the cytoplasm. Iwr1 then uses an N-terminal bipartite nuclear localization signal that is recognized by karyopherin α to direct Pol II nuclear import. In the nucleus, Iwr1 is displaced from Pol II by transcription initiation factors and nucleic acids, enabling its export and recycling. Iwr1 function is Pol II specific, transcription independent, and apparently conserved from yeast to human. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 1.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 10 KB 10 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 65.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is a map of the RNA Polymerase II-Iwr1 complex. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.71 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : RNA polymerase II-Iwr1
全体 | 名称: RNA polymerase II-Iwr1 |
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要素 |
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-超分子 #1000: RNA polymerase II-Iwr1
超分子 | 名称: RNA polymerase II-Iwr1 / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Monomeric / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 550 KDa |
-分子 #1: DNA-directed RNA polymerase
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Pol II / コピー数: 1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 510 KDa |
-分子 #2: Import adaptor
分子 | 名称: Import adaptor / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Iwr1 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 40 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.25 詳細: 5 mM HEPES, 40 mM Ammonium sulfate, 10 microM Zinc chloride, 10 mM DTT |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 80 K / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: FEI Vitrobot / 手法: Blot for 10 s before plunging |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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温度 | 平均: 80 K |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: OTHER / 実像数: 35 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 67000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Multispecimen holder / 試料ホルダーモデル: OTHER |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | Particles were selected using Signature and thereafter checked manually |
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CTF補正 | 詳細: Defocus groups |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 20.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER / 使用した粒子像数: 25206 |
最終 角度割当 | 詳細: SPIDER |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: ![]() |
詳細 | Protocol: Rigid body |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Least-square |